Cellule di Ramos - Ricerca sul linfoma a cellule B: L'importanza delle cellule Ramos
Le celluleRamos sono una linea cellulare di linfociti B ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. In particolare, trovano applicazioni primarie negli studi di immunologia e oncologia. I ricercatori impiegano queste cellule per valutare i farmaci citotossici e studiare gli antigeni di superficie delle cellule B, le mutazioni e i meccanismi apoptotici.
Origine e caratteristiche generali delle cellule Ramos s
La comprensione dell'origine e degli attributi essenziali di una linea cellulare svolge un ruolo cruciale nel decidere la sua idoneità per la ricerca. Pertanto, è consigliabile valutare a fondo queste informazioni prima di iniziare qualsiasi lavoro su di essa. Questa sezione tratta le seguenti domande frequenti: Che cos'è la linea cellulare Ramos? Che cos'è la linea cellulare Ramos CD19? Che cos'è la linea cellulare Ramos CD20? Qual è l'origine delle cellule Ramos? Quali sono i marcatori della linea cellulare Ramos? Qual è la dimensione delle cellule Ramos? Qual è la morfologia della linea cellulare Ramos?
- La linea cellulare Ramos è stata creata nel 1972. Queste cellule sono state derivate dal liquido ascitico di un bambino caucasico di 3 anni affetto da linfoma di Burkitt di tipo americano [1].
- Esprimono i principali marcatori delle cellule B, tra cui l'immunoglobulina M (IgM), il CD19, il CD20 e il CD22.
- Le cellule di Ramos sono cellule negative al virus di Epstein bar. Tuttavia, possono essere spostate in modo permanente verso cellule positive al virus di Epstein-Barr.
- Questi linfoblasti B possiedono una morfologia di forma rotonda.
Cellule blu di Ramos e cellule B di Ramos
Le cellule blu Ramos e le cellule B Ramos sono entrambe cellule di linfoma di Burkitt umano. Entrambe sono negative al virus di Epstein bar. La differenza tra queste cellule è che le cellule blu Ramos esprimono un gene reporter induttore di NF-κB/AP-1 chiamato SEAP (fosfato alcalino embrionale secreto), mentre le cellule bianche Ramos non lo esprimono.
Coltura delle cellule Ramos
Questa sezione dell'articolo è dedicata all'apprendimento di informazioni imperative sulla coltura cellulare delle cellule Ramos. Qui potrete conoscere: Qual è il tempo di raddoppio delle linee cellulari? Qual è il terreno di coltura consigliato? Come si coltivano le cellule Ramos?
Punti chiave per la coltura delle cellule Ramos
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Tempo di raddoppio: |
Il tempo di raddoppio delle cellule Ramos è di circa 20,4 ± 1,5 ore. Tuttavia, può variare a seconda delle condizioni di coltura delle cellule. |
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Aderenti o in sospensione: |
Le cellule Ramos crescono in sospensione. |
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Densità cellulare: |
La densità cellulare ottimale per la linea cellulare Ramos è di 3 x105 cellule/ml . Per la subcoltura, le cellule in sospensione vengono raccolte mediante centrifugazione. Le cellule vengono aggiunte di terreno fresco e risospese con cura. Successivamente, le cellule sono state versate nella nuova fiasca a una densità compresa tra 3 e 9 x105 cellule/ml . |
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Terreno di crescita: |
Per la coltura delle cellule Ramos si utilizza RPMI 1640 integrato con 10% di siero fetale bovino, 2,1 mM di glutammina stabile e 2,0 g/L di NaHCO3. Il terreno deve essere sostituito 2 volte a settimana. |
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Condizioni di crescita: |
La linea cellulare di linfoma di Burkitt umano (Ramos) viene mantenuta in un incubatore umidificato al 5% di CO2 e a 37°C di temperatura. |
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Conservazione: |
Le cellule Ramos congelate sono conservate a una temperatura inferiore a -150 gradi Celsius o nella fase vapore dell'azoto liquido per proteggere la vitalità delle cellule a lungo termine. |
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Processo e terreno di congelamento: |
Per le cellule di Ramos si raccomanda il terreno di congelamento CM-1 o CM-ACF. Si utilizza un processo di congelamento lento che consente una diminuzione graduale della temperatura di 1 grado Celsius al minuto. Questo congelamento lento protegge le cellule da eventuali shock e ne aumenta la vitalità. |
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Processo di scongelamento: |
Per lo scongelamento, le cellulecongelate vengono tenute in un bagno d'acqua preriscaldato a 37°C per 40-60 secondi, finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Successivamente, si aggiunge del terreno fresco e le cellule vengono centrifugate per rimuovere gli elementi del terreno di congelamento. Il pellet viene nuovamente risospeso e le cellule vengono dispensate in una nuova fiasca contenente terreno di coltura. |
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Livello di biosicurezza: |
Il laboratorio di livello di biosicurezza 1 è essenziale per mantenere le colture di cellule Ramos negative al virus di Epstein-Barr. Tuttavia, il livello di biosicurezza passa a 2 quando le cellule Ramos vengono trasformate in modo permanente in cellule positive al virus di Epstein-Barr. |
Ramos: Vantaggi e limiti
Come altre linee cellulari, anche le cellule Ramos presentano vantaggi e limiti distinti. In questa sezione ne verranno analizzati alcuni che possono influenzare in modo significativo il loro utilizzo nella ricerca.
Vantaggi
- Modello cellulare di linfoma di Burkitt: Le cellule Ramos sono state sviluppate a partire da un paziente affetto da linfoma di Burkitt, il che le rende un modello cellulare rilevante per lo studio delle neoplasie linfoidi
- Facilità di coltura: Le cellule Ramos sono facili da coltivare e mantenere in laboratorio. Hanno requisiti e condizioni di coltura cellulari semplici
Limitazioni
- Modello in vitro: Le cellule Ramos potrebbero non rappresentare completamente la complessità genetica dei tumori dei pazienti, limitando così la loro applicabilità. Inoltre, i risultati degli esperimenti condotti con la linea cellulare Ramos potrebbero non rispecchiare completamente le condizioni in vivo, il che potrebbe portare a sfide traslazionali
applicazioni delle cellule Ramos nella ricerca
Ramos offre applicazioni promettenti in campo biomedico. Alcuni degli usi imperativi delle cellule Ramos nella ricerca includono:
- Biologia dei linfomi: Le cellule Ramos sono ampiamente utilizzate per studiare la biologia del linfoma. Vengono utilizzate per esplorare i fattori genetici e molecolari alla base delle neoplasie linfoidi. Inoltre, grazie a queste cellule di linfoma di Burkitt, i ricercatori acquisiscono conoscenze sull'inizio, la progressione e l'eterogeneità della malattia. Vengono anche studiate le mutazioni genetiche e le vie di segnalazione, che possono portare allo sviluppo di approcci diagnostici e terapeutici più precisi. Uno studio condotto nel 2019 ha rilevato che l'inibizione dell'istone acetiltransferasi GCN5 (General control non-depressible 5) riduce la tumorigenicità delle cellule di linfoma di Burkitt umano (Ramos) attraverso l'interruzione della segnalazione BCR. Pertanto, il GCN5 viene suggerito come un bersaglio fattibile per lo sviluppo di una terapia farmacologica del linfoma [2].
- Screening e test dei farmaci: La linea cellulare Ramos è ampiamente utilizzata per lo screening e la sperimentazione di farmaci. I ricercatori valutano l'efficacia di potenziali composti terapeutici nell'inibire la proliferazione e la crescita cellulare e nell'indurre la morte cellulare nelle cellule di linfoma. Questo aiuta a identificare candidati farmaci promettenti, facilitando così lo sviluppo di trattamenti mirati per i pazienti affetti da linfoma. La ricerca ha dimostrato che l'estratto metanolico della buccia, della polpa e dei semi del frutto di Annona ha esercitato effetti moderati, mentre l'estratto di cloroformio ha mostrato effetti robusti sulla proliferazione delle cellule di Ramos. Lo studio ha quindi proposto che i frutti di Annona potrebbero rivelarsi efficaci nella prevenzione e nel trattamento del linfoma [3].
Cellule Ramos per la vostra ricerca
Pubblicazioni con cellule Ramos
Questa sezione dell'articolo elenca alcune interessanti pubblicazioni di ricerca riguardanti la linea cellulare Ramos:
Questa ricerca è stata pubblicata sulla rivista The EMBO nel 2018. Lo studio ha rilevato che le cellule B Ramos richiedono l'espressione dei marcatori CD19 e CD79b (componente di segnalazione BCR Igβ) per la loro idoneità e crescita competitiva.
Questo studio pubblicato su Neoplasia (2021) ha utilizzato cellule Ramos e ha proposto che il dominio della chinasi di lignaggio misto (MLKL) sia regolato epigeneticamente nelle cellule di linfoma di Burkitt (Ramos). Si tratta quindi di un promettente marcatore prognostico per il successo delle terapie legate alla necroptosi.
Questo articolo di ricerca pubblicato su Cancer Letters (2022) suggerisce che l'asse di segnalazione JAK2/TOPK/istone H3 svolge un ruolo cruciale nella proliferazione di linee cellulari di linfoma B in vitro.
Questo articolo è stato pubblicato nel 2020 su Toxins. Lo studio propone che il trattamento con verotossina-1 induca lo stress del reticolo endoplasmatico (ER) nelle cellule B Ramos. Questo porta all'avvio della segnalazione apoptotica o di sopravvivenza nelle linee cellulari di linfoma.
Questo studio pubblicato sull'Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) riporta che un composto naturale, la silimarina, sopprime l'espressione del TLR8 (Toll-like receptor 8) e l'apoptosi nella linea cellulare Ramos.
Risorse per la linea cellulare Ramos: Protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse online sulle cellule Ramos:
- Trasfezione delle cellule Ramos: Questo documento vi aiuterà a conoscere il protocollo di trasfezione della linea cellulare Ramos.
Il seguente link contiene il protocollo di coltura delle cellule Ramos:
- Cellule Ramos: Questo sito web contiene informazioni di base sulla linea cellulare Ramos. Contiene anche un protocollo per la subcoltura delle cellule Ramos e per la gestione delle colture proliferanti e crioconservate. Inoltre, sono disponibili informazioni sui terreni di coltura delle cellule Ramos, sul tempo di raddoppio e sulla densità cellulare.
Approfondimenti sulle cellule Ramos: Domande frequenti
Riferimenti
- Kerntke, C.G., Analisi dell'organizzazione e della capacità di segnalazione delle IgE di membrana durante la loro interazione con CD19 e CD23 nei linfociti B. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., L'inibizione di GCN5 HAT riduce la sopravvivenza delle cellule di linfoma Burkitt umano attraverso la riduzione dell'espressione del gene target MYC e l'impedimento delle vie di segnalazione BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Profilo fitochimico e attività antiossidante del frutto di annona e suo effetto sulla proliferazione delle cellule di linfoma. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.