Cellule NCI-H1299: Ricerca e implicazioni cliniche delle cellule NCI-H1299 per il cancro al polmone
NCI-H1299 è una linea cellulare immortalizzata per il cancro polmonare non a piccole cellule, ampiamente utilizzata nella ricerca immunologica, oncologica e nella scoperta di farmaci. Inoltre, i ricercatori hanno utilizzato queste cellule per studiare la sensibilità ai farmaci, le vie di segnalazione e i meccanismi molecolari legati al cancro del polmone. Inoltre, queste cellule sono impiegate per studiare le infezioni virali come la SARS-CoV-2.
Caratteristiche generali e origine delle cellule NCI-H1299
La prima cosa da sapere su una linea cellulare è la sua origine e le sue caratteristiche generali, in quanto aiutano a definire il suo utilizzo nella ricerca. Questa sezione dell'articolo vi aiuterà a conoscere alcune informazioni importanti sull'origine e sulle caratteristiche di NCI-H1299. Ad esempio, cosa sono le cellule del cancro del polmone NCI-H1299? Che tipo di cellula è NCI-H1299? Qual è la dimensione delle cellule NCI-H1299? Qual è la differenza tra A549 e NCI-H1299?
- La linea cellulare NCI-H1299 proviene da una metastasi linfonodale del polmone di un paziente caucasico di 43 anni affetto da cancro.
- Queste cellule possiedono una delezione parziale omozigote del gene p53; pertanto, non esprimono la proteina p53. La mancanza di espressione della proteina p53 NCI-H1299 contribuisce alla tendenza proliferativa delle cellule di cancro del polmone H1299.
- Oltre alla p53, queste cellule immortalizzate presentano la mutazione NCI-H1299 KRAS, responsabile delle loro proprietà di crescita, proliferazione, migrazione e invasione.
- Il cariotipo di NCI-H1299 è quasi diploide.
- Le cellule NCI-H1299 hanno una morfologia simile alle cellule epiteliali.
- Queste cellule sono appiattite e hanno uno spessore inferiore a 5 µm.
NCI-H1299 e A549
Le cellule NCI-H1299 e A549 sono linee cellulari di carcinoma polmonare non a piccole cellule. Le cellule NCI-H1299 sono più aggressive e sensibili rispetto alle A549. Entrambe presentano mutazioni relativamente simili, come il KRAS. Tuttavia, a differenza delle cellule NCI-H1299, le cellule A549 esprimono il gene P53.
Informazioni sulla coltura
Mantenere una coltura di una linea cellulare non è facile se non si conoscono tutte le informazioni chiave su di essa, tra cui: Qual è il tempo di raddoppiamento di NCI-H1299? Qual è la densità di semina di NCI-H1299? Qual è il terreno di coltura di NCI-H1299? Come si coltivano le linee cellulari NCI-H1299? Questa sezione vi aiuterà a trovare le risposte a tutte queste domande sulla coltura delle cellule NCI-H1299.
Punti chiave per la coltura delle cellule NCI-H1299
|
Tempo di raddoppio: |
Il tempo di raddoppiamento delle cellule NCI-H1299 varia da 22 a 30 ore. |
|
Aderenti o in sospensione: |
NCI-H1299 è una linea cellulare aderente. |
|
Rapporto di subcoltivazione: |
Le cellule NCI-H1299 vengono subcoltivate in un rapporto raccomandato da 1:3 a 1:6. Per la semina, le cellule aderenti vengono lavate con 1x PBS e incubate con la soluzione passante Accutase per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Le cellule staccate vengono aggiunte al terreno di coltura fresco e centrifugate. Il pellet cellulare viene quindi risospeso e le cellule vengono versate in nuove fiasche contenenti terreno di coltura. |
|
Terreno di coltura: |
RPM1 1640 è il terreno di coltura ideale per le cellule NCI-H1299. È integrato con il 10% di siero fetale bovino, 4500 mg/L di glucosio, 2,0 mM di L-glutammina, 1 mM di piruvato di sodio, 1500 mg/L di NaHCO3 e 10 mM di HEPES. I terreni devono essere rinnovati ogni 2 o 3 volte alla settimana. |
|
Condizioni di crescita: |
Le colture di cellule di carcinoma polmonare NCI-H1299 sono mantenute in un incubatore umidificato a 37°C con un apporto di CO2 del 5%. |
|
Conservazione: |
La linea cellulare NCI-H1299 può essere conservata a lungo termine nella fase vapore dell'azoto liquido o in congelatori a bassissima temperatura, a una temperatura inferiore a -150°C. |
|
Processo e terreno di congelamento: |
CM-1 o CM-ACF sono i terreni di congelamento delle cellule NCI-H1299. Le cellule vengono congelate con un processo di congelamento lento che consente una diminuzione della temperatura di solo 1 grado al minuto per proteggere la vitalità delle cellule. |
|
Processo di scongelamento: |
Le cellule NCI-H1299 congelate vengono agitate rapidamente in un bagno d'acqua preriscaldato a 37 gradi Celsius per 40-60 secondi finché non rimane un piccolo pezzo di ghiaccio. Le cellule scongelate vengono aggiunte al terreno fresco e possono essere coltivate direttamente in nuove fiasche o centrifugate. Nel primo caso, il terreno deve essere sostituito dopo 24 ore di incubazione. La centrifugazione aiuta a rimuovere gli elementi del terreno di coltura congelati. Successivamente, le cellule raccolte vengono risospese in terreno fresco e distribuite nella nuova fiasca per la coltura. |
|
Livello di biosicurezza: |
È necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1 per gestire la coltura di cellule NCI-H1299. |
Acquisto della linea cellulare NCI-H1299: strumenti di ricerca di alta qualità per lo studio della biologia del cancro al polmone
Vantaggi e svantaggi delle cellule NCI-H1299
Come altre linee cellulari tumorali umane, anche le NCI-H1299 possiedono alcune caratteristiche distintive associate a specifici pro e contro. Qui di seguito ne abbiamo riassunti alcuni significativi.
Vantaggi
I principali vantaggi della linea cellulare NCI-H1299 per il tumore del polmone non a piccole cellule sono:
-
Modello di tumore polmonare in vitro
Le linee cellulari NCI-H1299 sono state sviluppate a partire da metastasi linfonodali di carcinoma polmonare e quindi possiedono proprietà relativamente simili. Pertanto, queste cellule possono servire come modello in vitro per studiare la biologia del cancro del polmone, i meccanismi cellulari e molecolari e per esaminare e testare potenziali terapie.
-
Facili da coltivare
Le cellule NCI-H1299 sono facili da coltivare e mantenere in un laboratorio di ricerca. Non ci sono requisiti e procedure di coltura cellulare complesse.
-
NCI-H1299 P53 e NCI-H1299 mutazione KRAS
Le cellule NCI-H1299 mancano dell'espressione del gene p53, che consente alle cellule di proliferare vigorosamente. Inoltre, possiedono la mutazione KRAS che contribuisce alla crescita, alla proliferazione, all'invasione e alla migrazione delle cellule. In considerazione di ciò, i ricercatori utilizzano le cellule H1299 per studiare i meccanismi molecolari relativi alle mutazioni KRAS e P53.
Svantaggi
Gli svantaggi delle cellule NCI-H1299 sono:
-
Specificità tissutale
Le NCI-H1299 provengono da tessuto polmonare. Pertanto, la sua applicabilità è per lo più limitata alla ricerca sul carcinoma polmonare. Potrebbe non rappresentare pienamente l'eterogeneità e le caratteristiche generali di altri tipi di cancro.
Applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H1299
La linea cellulare NCI-H1299 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro del polmone. Qui di seguito vengono citate alcune applicazioni promettenti di questa linea cellulare.
- Biologia del cancro: Le cellule NCI-H1299 sono un ottimo strumento di ricerca per studiare lo sviluppo e la progressione del cancro e i relativi meccanismi cellulari e molecolari. Queste cellule presentano alcune mutazioni che consentono ai ricercatori di esplorare i comportamenti delle cellule tumorali, le vie di segnalazione e i profili di espressione genica correlati. Diversi studi hanno utilizzato la linea cellulare di carcinoma polmonare non a piccole cellule NCI-H1299 per studiare la biologia del cancro del polmone. Ad esempio, uno studio condotto nel 2018 ha analizzato la via di segnalazione coinvolta nell'apoptosi delle cellule di carcinoma polmonare utilizzando cellule NCI-H1299. I ricercatori hanno scoperto che la via PI3K/AKT contribuisce alla proliferazione cellulare e la sua inibizione può causare la morte delle cellule tumorali [1]. Allo stesso modo, un'altra ricerca ha studiato i meccanismi coinvolti nella transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) delle cellule NCI-H1299. Questo studio ha proposto che una proteina extracellulare SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) contribuisca all'EMT e alla migrazione di NCI-H1299, promuovendo così la tumorigenesi nelle cellule: la proteina SPARC agisce come mediatore della segnalazione di TGF-β1 [2].
- Scoperta e screening di farmaci: La NCI-H1299, una linea cellulare di cancro al polmone umano, è ampiamente utilizzata per valutare la tossicità e l'efficacia di potenziali farmaci. Inoltre, viene utilizzata dai ricercatori per studiare il meccanismo d'azione dei farmaci antitumorali. Gli studi hanno anche utilizzato queste cellule per identificare possibili bersagli farmacologici e meccanismi di resistenza. Ad esempio, una ricerca condotta da Xiao-Yun Shen e colleghi ha studiato il potenziale antitumorale del composto naturale bruceina D (BD). I risultati hanno rivelato che il BD impedisce in modo significativo la proliferazione, l'invasione e la migrazione delle cellule NCI-H1299. Pertanto, può essere considerata una potenziale terapia adiuvante per il trattamento del carcinoma polmonare non a piccole cellule [3]. Analogamente, uno studio ha valutato gli effetti citotossici dello xantoumolo da solo e in combinazione con il farmaco chemioterapico cisplatino sulle cellule di carcinoma polmonare NCI-H1299 [4].
Pubblicazioni di ricerca con cellule NCI-H1299
Qui sono riportate alcune pubblicazioni di ricerca significative e più citate sulla linea cellulare di carcinoma polmonare NCI-H1299.
Questo articolo è stato pubblicato sulla rivista Human and Experimental Toxicology (2021). Lo studio propone che l'indolo-3-carbinolo induca l'apoptosi nelle cellule H1299 attraverso l'innalzamento dei livelli di specie reattive dell'ossigeno (ROS).
Questa ricerca è stata pubblicata nel 2018 sulla rivista Cellular Physiology and Biochemistry. I risultati della ricerca hanno rivelato che la combinazione di acido caffeico e paclitaxel esercita un effetto antitumorale sinergico nella linea cellulare di cancro al polmone non a piccole cellule NCI-H1299.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato su Molecular Medicine Reports (2018). Lo studio ha valutato l'effetto antitumorale del tubeimoside-1, una saponina triterpenoide, e i meccanismi sottostanti nella linea cellulare NCI-H1299.
Questo articolo pubblicato sul Journal of Cancer (2020) propone che la prismerina, un composto naturale, sopprime la proliferazione e la migrazione delle cellule NCI-H1299.
Meccanismo di regolazione del gene VIPR1 nelle cellule di adenocarcinoma polmonare umano H1299
Questo studio pubblicato su Medical Oncology (2019) ha esplorato i potenziali effetti della sovraespressione del gene VIPR1 sulla linea cellulare di adenocarcinoma NCI-H1299.
Risorse per la linea cellulare NCI-H1299: Protocolli, video e altro
Ecco alcune risorse online relative alle cellule NCI-H1299.
- Trasfezione di NCI-H1299: Questo video spiega il protocollo di trasfezione transitoria per le linee cellulari NCI-H1299.
- Sottocoltura di una linea cellulare aderente: Questo video vi aiuterà ad apprendere una procedura generale di subcoltura per una linea cellulare aderente.
Il seguente link contiene informazioni sulla coltura cellulare per le cellule NCI-H1299.
- Linea cellulare NCI-H1299: Questo link può aiutare a conoscere il protocollo di passaging e trasfezione delle cellule NCI-H1299.
Domande frequenti sulla linea cellulare NCI-H1299
Riferimenti
- Gu, J., et al., Studio dell'apoptosi indotta dall'EGCG nelle cellule di cancro al polmone mediante l'inibizione della via di segnalazione PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC agisce come mediatore del TGF-β1 nel promuovere la transizione epiteliale-mesenchimale nelle cellule di cancro al polmone A549 e H1299. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Uno studio sul meccanismo della bruceina D nel trattamento delle cellule di cancro al polmone non a piccole cellule H1299. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Effetti citotossici dello xantoumolo e della sua combinazione con il cisplatino sulle cellule di cancro al polmone umano metastatico H1299. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.