Linea cellulare MX-1

MX-1 è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano derivata da un modello di xenotrapianto di cancro al seno in topi atimici. Le cellule di adenocarcinoma mammario umano sono state ottenute dal tumore al seno di una donna caucasica di 29 anni. Le cellule MX1 sono cellule di carcinoma mammario triplo-negativo (TNBC), ampiamente utilizzate per la ricerca sulla resistenza ai farmaci, sulla segnalazione cellulare, sul meccanismo di risposta ai farmaci, ecc.

Origine e informazioni generali sulle cellule MX-1

Prima di lavorare con questa linea cellulare, è necessario conoscerne i dettagli. Passeremo in rassegna quasi tutte le informazioni generali relative alla linea cellulare MX-1.

La linea cellulare immortale MX-1 è una linea cellulare tumorigenica ottenuta da uno xenotrapianto tumorale. Le cellule MX-1 sono considerate un tipo di cancro al seno triplo negativo (TNBC) [1]. Inoltre, queste cellule sono negative al recettore degli estrogeni e alla p53, in quanto non esprimono questi geni.

Cellule MX-1 - Un sistema modello per il cancro al seno triplo negativo

Le condizioni di coltura della linea cellulare MX-1 non sono complesse. Queste cellule possono essere facilmente propagate e utilizzate in vari laboratori di ricerca per studi di trasfezione. Il metodo di trasfezione transitoria studia comunemente i meccanismi cellulari sottostanti e i modelli di espressione genica in questa linea cellulare [2, 3].

Questa linea cellulare è un valido sistema modello per il carcinoma mammario. Può essere utilizzata per comprendere i meccanismi molecolari alla base della progressione della malattia e per lo screening e lo sviluppo di farmaci per combattere la malattia. In particolare, la linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano MX-1 può essere un'alternativa alle cellule TNBC in quanto è negativa per il recettore degli estrogeni [4].

Linea cellulare MX-1: Informazioni sulla coltura

• Tempo di raddoppiamento: il tempo di raddoppiamento della popolazione delle cellule INS-1 è di circa 44 ore.
• Aderenti o in sospensione: Le cellule INS-1 crescono sia in sospensione che in forma aderente.
• Rapporto di subcoltivazione: Le cellule INS-1 vengono subcoltivate con un rapporto di divisione di 1:3. In breve, le cellule in sospensione vengono raccolte. Le cellule aderenti vengono risciacquate con PBS e incubate con la soluzione di Accutase. Dopo il distacco, le cellule vengono aggiunte con terreno fresco. Successivamente, sia le cellule sospese che quelle aderenti vengono centrifugate e raccolte. Le cellule vengono accuratamente risospese e distribuite nelle nuove fiasche per la crescita.
• Terreno di crescita: Per la coltura della linea cellulare di insulinoma di ratto INS-1 si utilizza il terreno RPMI 1640. Il terreno è integrato con il 10% di siero fetale bovino inattivato a caldo, 2,1 mM di glutammina stabile, 10 mM di HEPES, 2,0 g/L di NaHCO3 e 1 mM di piruvato di sodio.
• Condizioni di crescita: Le cellule INS-1 sono mantenute in un incubatore umidificato a 37°C e con un apporto continuo di CO2 al 5%.
• Conservazione: Le cellule INS-1 beta possono essere conservate a lungo termine nella fase vapore dell'azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150°C in un congelatore elettrico.
• Processo e terreno di congelamento: I terreni CM-1 o CM-ACF sono utilizzati per congelare le cellule INS-1 attraverso un processo di congelamento lento. Consente un calo di temperatura di solo 1°C al minuto per proteggere la vitalità delle cellule.
• Processo di scongelamento: Le cellule INS-1 congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua preimpostato a 37 gradi Celsius per 40-60 secondi. Dopo lo scongelamento, le cellule vengono aggiunte al terreno fresco e versate direttamente in una nuova fiasca per la crescita. Dopo 24 ore il terreno viene sostituito per eliminare i componenti del terreno di congelamento.
• Livello di biosicurezza: Per la coltura delle cellule di insulinoma di ratto INS-1 è necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1.

Cellule MX-1: Applicazioni nella ricerca

Questa linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano MX-1 viene comunemente utilizzata negli studi sul cancro al seno al posto di cellule come MDA-MB-231 o MCF-7. Ecco alcune applicazioni speciali di questa linea cellulare nella ricerca sul cancro.

Meccanismi di resistenza ai farmaci

Le cellule MX-1 sono utilizzate per studiare i fattori molecolari che mediano lo sviluppo della resistenza ai farmaci contro il cancro al seno. Gli studi hanno ampiamente utilizzato le cellule MX-1 per stabilire modelli di resistenza ai farmaci. Uno studio pubblicato nel 2021 ha riportato l'uso di cellule MX-1 per generare una linea cellulare di cancro al seno resistente alla doxorubicina. Il modello cellulare sviluppato ha convalidato il coinvolgimento del trasportatore ABC ABCB1 e della transizione epitelio-mesenchimale (EMT) nell'acquisizione della chemioresistenza [5].

Espressione genica e vie di segnalazione cellulare

La linea cellulare MX-1 può essere trasfettata transitoriamente per chiarire i modelli di espressione genica e le vie di segnalazione cellulare. Alcuni studi hanno utilizzato le cellule MX-1 per la trasfezione di shRNA (short hairpin RNA) e RNA non codificanti per esplorare il loro effetto sulla proliferazione e sulla crescita delle cellule di cancro al seno. Inoltre, sono state delucidate le vie di segnalazione genica associate [2, 6].

Screening di potenziali inibitori

Le cellule MX-1 possono essere utilizzate per lo screening di potenziali farmaci contro il cancro al seno, poiché imitano il microambiente delle cellule tumorali. Uno studio ha dimostrato l'attività terapeutica della vinorelbina, una tossina dei microtubuli, che ha innescato la morte cellulare e la poliploidia nelle cellule MX-1 [4].

Ordinate oggi la vostra linea cellulare MX-1

Risorse per la linea cellulare MX-1: Protocolli, video e altro

Le risorse disponibili per quanto riguarda i metodi di coltura e trasfezione sono limitate, ma abbiamo raccolto il maggior numero possibile di informazioni per voi.

Protocolli di coltura cellulare

Le cellule MX-1 sono utilizzate in molti studi di analisi di trasfezione transitoria. Qui abbiamo elencato alcune risorse per aiutarvi con i protocolli di trasfezione.

• Trasfezione di cellule MX-1: Questa pubblicazione descrive il protocollo di trasfezione con siRNA in cellule MX-1 per lo sviluppo di un modello di gene knock-out.
• Trasfezione di cellule di mammifero: Questo articolo contiene tutte le informazioni essenziali sui metodi di trasfezione utilizzati nelle linee cellulari di mammifero.

Ci auguriamo che questo articolo vi abbia fornito preziose conoscenze sulla linea cellulare MX-1 e che abbiate capito meglio come coltivare, mantenere e utilizzare queste cellule nella vostra ricerca. Se siete interessati a lavorare con la linea cellulare MX-1, non esitate a ordinare da noi per iniziare il vostro percorso di ricerca!

Domande frequenti sulla linea cellulare di carcinoma mammario MX-1

Riferimenti

1. Stefanski, C.D. e J.R. Prosperi, Combating CHK1 resistance in triple negative breast cancer: L'inibizione dell'EGFR come potenziale terapia combinata. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., L'analogo del cGAMP, c-di-AMP, attiva la via di morte cellulare mediata da STING nelle cellule di cancro al seno negative ai recettori per gli estrogeni. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Analisi proteomica dell'inibitore dell'apoptosiprotein-likeprotein-2sulla proliferazione delle cellule di cancro al seno. Rapporti di medicina molecolare, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa e J. Magae, Vinorelbine, una tossina dei microtubuli, induce apoptosi e poliploidia in MX-1, una linea cellulare umana di cancro al seno triplo-negativo. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., L'attivatore ABCB1 non genotossico tetrafenilfosfonio può contribuire alla resistenza alla doxorubicina nella linea cellulare di cancro al seno MX-1. Rapporti scientifici, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Analisi mixomica del cancro al seno: L'RNA lungo non codificante linc01561 agisce come ceRNA coinvolto nella progressione del cancro al seno. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.