Linea cellulare MX-1

MX-1 è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario umano derivata da un modello di xenotrapianto di tumore al seno in topi atimici. Le cellule di adenocarcinoma mammario umano sono state isolate da un tumore al seno di una donna caucasica di 29 anni. Le cellule MX-1 appartengono alla categoria del carcinoma mammario triplo negativo (TNBC) e sono ampiamente utilizzate per la ricerca sulla resistenza ai farmaci, la segnalazione cellulare, i meccanismi di risposta ai farmaci, ecc.

Origine e informazioni generali sulle cellule MX-1

Prima di lavorare con questa linea cellulare, è necessario conoscerne le caratteristiche fondamentali. Esamineremo quasi tutte le informazioni generali relative alla linea cellulare MX-1.

La linea cellulare immortale MX-1 è una linea cellulare tumorigenica ottenuta da un xenotrapianto tumorale. Le cellule MX-1 sono considerate un tipo di carcinoma mammario triplo negativo (TNBC) [1]. Inoltre, queste cellule sono negative per il recettore degli estrogeni e per p53, in quanto non esprimono questi geni.

Cellule MX-1: un sistema modello per il carcinoma mammario triplo-negativo

Le condizioni di coltura della linea cellulare MX-1 non sono particolarmente esigenti. Queste cellule possono essere facilmente propagate e utilizzate in vari laboratori di ricerca per studi di trasfezione. Il metodo di trasfezione transitoria viene comunemente impiegato per studiare i meccanismi cellulari sottostanti e i modelli di espressione genica in questa linea cellulare [2, 3].

Questa linea cellulare rappresenta un valido sistema modello per i carcinomi mammari. Può essere utilizzata per comprendere i meccanismi molecolari alla base della progressione della malattia, nonché per lo screening e lo sviluppo di farmaci per combatterla. Più specificamente, la linea cellulare umana MX-1 di adenocarcinoma mammario può costituire un’alternativa alle cellule TNBC, in quanto è negativa al recettore degli estrogeni [4].

Pubblicato: 2023 | Ultima revisione: maggio 2026

Linea cellulare MX-1: Informazioni sulla coltura

• Tempo di raddoppio: il tempo di raddoppio della popolazione delle cellule INS-1 è di circa 44 ore.
• Aderenzi o in sospensione: le cellule INS-1 crescono sia in sospensione che in forma aderente.
• Rapporto di subcoltura: le cellule INS-1 vengono sottoposte a subcoltura con un rapporto di divisione di 1:3. In breve, le cellule in sospensione vengono raccolte. Le cellule aderenti vengono risciacquate con PBS e incubate con la soluzione Accutase. Dopo il distacco, alle cellule viene aggiunto terreno di coltura fresco. Successivamente, sia le cellule in sospensione che quelle aderenti vengono centrifugate e raccolte. Le cellule vengono accuratamente risospese e distribuite in nuove fiasche per la crescita.
• Terreno di coltura: per la coltura della linea cellulare di insulinoma di ratto INS-1 si utilizza l’RPMI 1640. Il terreno è integrato con siero fetale bovino inattivato termicamente al 10%, glutammina stabile a 2,1 mM, HEPES a 10 mM, NaHCO₃ a 2,0 g/L e piruvato di sodio a 1 mM.
• Condizioni di crescita: le cellule INS-1 vengono mantenute in un incubatore umidificato impostato a una temperatura di 37 °C e con un apporto continuo di CO₂ al 5%.
• Conservazione: le cellule beta INS-1 possono essere conservate a lungo termine nella fase vapore dell’azoto liquido o a temperature inferiori a -150 °C in un congelatore elettrico.
• Processo di congelamento e terreno di coltura: per congelare le cellule INS-1 mediante un processo di congelamento lento si utilizzano i terreni CM-1 o CM-ACF. Ciò consente un abbassamento della temperatura di soli 1 °C al minuto per proteggere la vitalità cellulare.
• Processo di scongelamento: le cellule INS-1 congelate vengono scongelate in un bagno d’acqua preimpostato a una temperatura di 37 gradi Celsius per 40-60 secondi. Dopo lo scongelamento, alle cellule viene aggiunto un terreno fresco e vengono trasferite direttamente in una nuova fiasca per la crescita. Dopo 24 ore il terreno viene sostituito per eliminare i componenti del terreno di congelamento.
• Livello di biosicurezza: Per la coltura delle cellule di insulinoma di ratto INS-1 è necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1.

Cellule MX-1: applicazioni nella ricerca

Questa linea cellulare MX-1 di adenocarcinoma mammario umano è comunemente utilizzata negli studi sul cancro al seno al posto di cellule quali MDA-MB-231 o MCF-7. Di seguito sono riportate alcune applicazioni specifiche di questa linea cellulare nella ricerca sul cancro.  

Meccanismi di resistenza ai farmaci

Le cellule MX-1 vengono utilizzate per studiare i fattori molecolari che mediano lo sviluppo della resistenza ai farmaci antitumorali per il cancro al seno. Diversi studi hanno ampiamente utilizzato le cellule MX-1 per creare modelli di resistenza ai farmaci. Uno studio pubblicato nel 2021 ha riportato l’uso delle cellule MX-1 per generare una linea cellulare di carcinoma mammario resistente alla doxorubicina. Il modello cellulare sviluppato ha confermato il coinvolgimento del trasportatore ABC ABCB1 e della transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) nell’acquisizione della chemioresistenza [5].

Espressione genica/vie di segnalazione cellulare

La linea cellulare MX-1 può essere trasfettata in modo transitorio per chiarire i modelli di espressione genica e le vie di segnalazione cellulare. Alcuni studi hanno utilizzato le cellule MX-1 per la trasfezione di shRNA (RNA a forcina corta) e di RNA non codificante, al fine di esplorarne l’effetto sulla proliferazione e sulla crescita delle cellule tumorali al seno. Inoltre, sono state chiarite le vie di segnalazione genica associate [2, 6].

Screening di potenziali inibitori

Le cellule MX-1 possono essere utilizzate per lo screening di potenziali farmaci contro il carcinoma mammario, poiché riproducono il microambiente delle cellule tumorali. Uno studio di ricerca ha dimostrato l’attività terapeutica della vinorelbina, una tossina dei microtubuli, che ha indotto la morte cellulare e la poliploidia nelle cellule MX-1 [4].

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Risorse sulla linea cellulare MX-1: protocolli, video e altro

Le risorse disponibili sui metodi di coltura e trasfezione sono limitate, ma abbiamo raccolto per voi quante più informazioni possibili.

Protocolli di coltura cellulare

Le cellule MX-1 sono utilizzate in numerosi studi di analisi sulla trasfezione transitoria. Di seguito abbiamo elencato alcune risorse utili per i protocolli di trasfezione.

• Trasfezione delle cellule MX-1: questa pubblicazione descrive il protocollo per la trasfezione con siRNA nelle cellule MX-1 finalizzato allo sviluppo di un modello di knock-out genico.
• Trasfezione di cellule mammifere: questo articolo contiene tutte le informazioni essenziali sui metodi di trasfezione utilizzati nelle linee cellulari mammifere.

Ci auguriamo che questo articolo vi abbia fornito preziose conoscenze sulla linea cellulare MX-1 e che abbiate acquisito una migliore comprensione di come coltivare, mantenere e utilizzare queste cellule nella vostra ricerca. Se siete interessati a lavorare con la linea cellulare MX-1, non esitate a ordinarla da noi per dare il via al vostro percorso di ricerca!

Domande frequenti sulla linea cellulare di carcinoma mammario MX-1

Riferimenti

1. Stefanski, C.D. e J.R. Prosperi, Combattere la resistenza a CHK1 nel carcinoma mammario triplo negativo: l'inibizione dell'EGFR come potenziale terapia combinata. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., L’analogo del cGAMP, il c-di-AMP, attiva la via di morte cellulare mediata da STING nelle cellule di carcinoma mammario negative al recettore degli estrogeni. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Analisi proteomica della proteina simile all’inibitore dell’apoptosi 2 (IAP-2) sulla proliferazione delle cellule tumorali mammarie. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa e J. Magae, La vinorelbina, una tossina dei microtubuli, induce l’apoptosi e la poliploidia nella linea cellulare MX-1, una linea cellulare umana di carcinoma mammario triplo-negativo. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): pp. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Il tetrafenilfosfonio, un attivatore non genotossico dell’ABCB1, può contribuire alla resistenza alla doxorubicina nella linea cellulare di carcinoma mammario MX-1. Scientific reports, 2021. 11(1): pp. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Analisi mixomica del carcinoma mammario: l’RNA lungo non codificante linc01561 agisce come ceRNA coinvolto nella progressione del carcinoma mammario. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: pp. 1-9.