Cellule HL-60: elementi fondamentali per la ricerca sulla leucemia mieloide acuta
HL-60 è una linea cellulare immortale di leucemia umana. È ampiamente utilizzata per studiare la biologia del cancro e per valutare l'efficacia dei farmaci antitumorali. Inoltre, può essere impiegata per comprendere i diversi meccanismi cellulari e molecolari coinvolti nella proliferazione e nella differenziazione delle cellule leucemiche.
- Terreno di coltura
- Vedi la pagina del prodotto
- Tempo di raddoppio
- Vedi pagina del prodotto
- Tipo di crescita
- Adesivo
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina HL-60
- Linea cellulare HL-60: Origine e informazioni generali
- Informazioni sulla coltura cellulare HL-60
- Cellule HL-60: vantaggi e svantaggi
- Applicazioni della linea cellulare HL-60 nella ricerca: dal cancro all'immunologia e oltre
- La linea cellulare HL-60 per la tua ricerca
- Cellule HL-60: pubblicazioni di ricerca
- Risorse sulla linea cellulare HL-60: protocolli, video e altro
- Linea cellulare HL-60: domande frequenti essenziali per i ricercatori
- Riferimenti
- Domande frequenti
Linea cellulare HL-60: Origini e informazioni generali
La linea cellulare HL-60 funge da modello fondamentale nella ricerca ematologica, offrendo approfondimenti significativi sulla natura e sul trattamento della leucemia promielocitica acuta. Questo articolo del blog approfondisce le origini e le caratteristiche distintive della linea cellulare HL-60, mettendo in luce il suo ruolo cruciale nella ricerca medica e negli sviluppi terapeutici.
La linea cellulare HL-60 è stata inizialmente isolata dalle cellule leucemiche di una donna caucasica di 36 anni a cui era stata diagnosticata una leucemia promielocitica acuta. Questo lavoro pionieristico è stato condotto da S.J. Collins e dal suo team, segnando una svolta significativa poiché HL-60 è stata la prima linea cellulare di leucemia mieloide ad essere isolata e coltivata con successo in sospensione. Questo risultato ha facilitato numerose opportunità di ricerca nello studio della leucemia e di altre malattie correlate. In termini di caratteristiche fisiche, le cellule HL-60 presentano una morfologia linfoblastica e sono note per crescere in sospensione, apparendo di forma rotonda. La dimensione di queste cellule varia, con diametri compresi tra 9 e 25 μm, riflettendo la loro eterogeneità. A livello genomico, la linea cellulare HL-60 è prevalentemente pseudodiploide, con un numero modale di cromosomi pari a 43. È interessante notare che una piccola percentuale (6,2%) delle cellule presenta una componente 2S, aggiungendo un ulteriore livello di complessità al loro corredo genetico [1].
La comprensione di questi aspetti fondamentali delle cellule HL-60 non solo migliora la nostra conoscenza della leucemia a livello cellulare, ma sostiene anche gli sforzi di ricerca in corso per scoprire nuove modalità di trattamento. Nelle sezioni seguenti, esploreremo come le proprietà uniche della linea cellulare HL-60 abbiano contribuito a significativi progressi nella ricerca medica.
Informazioni sulla coltura cellulare HL-60
La coltura delle cellule HL-60 è semplice e facile. Questa sezione vi fornirà informazioni di base quali: qual è il tempo di raddoppio della linea cellulare HL-60? La coltura delle cellule HL-60 è aderente o in sospensione? Qual è la densità di semina della linea cellulare HL-60? Quale terreno di coltura viene utilizzato per la crescita delle cellule HL-60?
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio delle cellule HL-60 è di circa 36-48 ore.
Aderenze o in sospensione:
Le cellule HL-60 crescono come colture in sospensione.
Densità di semina:
Queste cellule vengono seminate a una densità di 1 x 106 cellule/ml quando vengono subcoltivate e a 2 x 105 cellule/ml quando si avvia una nuova coltura.
Terreno di coltura:
Per la coltura delle cellule HL-60 si utilizza un terreno di crescita RPMI 1640 con aggiunta di 10 % di FBS e 2,5 mM di L-glutammina. Il terreno deve essere rinnovato 2-3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le cellule HL-60 vengono coltivate in un incubatore umidificato a una temperatura di 37 °C e con un'alimentazione di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le cellule HL-60 vengono conservate a una temperatura inferiore a -150 °C o nella fase vapore dell'azoto liquido per mantenere il maggior numero possibile di cellule vitali.
Terreno e processo di congelamento:
Per il congelamento delle cellule HL-60 si utilizzano i mezzi di congelamento CM-1 o CM-ACF. Per il congelamento delle cellule HL-60 è preferibile un metodo di congelamento lento.
Processo di scongelamento:
La fiala congelata di cellule HL-60 viene agitata rapidamente in un bagno d'acqua a una temperatura di 37 °C. Successivamente, le cellule vengono centrifugate per rimuovere il mezzo di congelamento. Viene aggiunto un nuovo mezzo di coltura e le cellule vengono risospese per essere trasferite in un pallone per la crescita.
Livello di biosicurezza:
Per la manipolazione delle colture di HL-60 si raccomanda il livello di biosicurezza 1.
Cellule HL-60: vantaggi e svantaggi
Prima di lavorare con qualsiasi linea cellulare, è bene conoscerne i vantaggi e gli svantaggi. Questa sezione dell'articolo tratterà alcuni pro e contro dell'utilizzo delle cellule HL-60.
Vantaggi
Alcuni dei principali vantaggi della linea cellulare HL-60 sono:
- Versatilità: le cellule HL-60 hanno la capacità di differenziarsi in diversi tipi cellulari, tra cui monociti, macrofagi e granulociti, in condizioni di crescita appropriate. Ciò le rende utili per lo studio della differenziazione cellulare e di altri processi cellulari.
- Facilità di coltura: le cellule HL-60 sono facili da coltivare e mantenere in colture in sospensione, il che le rende uno strumento pratico per lo studio di molteplici processi cellulari.
- Modello in vitro di leucemia: queste cellule sono state ottenute da un paziente affetto da leucemia mieloide acuta e presentano quindi caratteristiche genetiche e molecolari simili a quelle della malattia.
Svantaggi
Gli svantaggi della linea cellulare HL-60 sono:
- Potenziale di differenziazione limitato: le cellule HL-60 possono differenziarsi in alcuni lignaggi mieloidi in risposta a stimoli, ma il loro potenziale di differenziazione è limitato rispetto alle cellule primarie.
Applicazioni della linea cellulare HL-60 nella ricerca: dal cancro all'immunologia e oltre
La linea cellulare HL-60, derivata da un paziente affetto da leucemia promielocitica acuta, è diventata una pietra miliare nella ricerca medica grazie alla sua versatilità e facilità di coltura. Queste colture a bassa manutenzione sono fondamentali in una miriade di applicazioni di ricerca e il nostro obiettivo è quello di esplorarne alcune tra le più significative, incorporando un'ampia gamma di parole chiave di ricerca per fornire una panoramica completa.
Ricerca sul cancro
Nel campo dell'oncologia, la linea cellulare HL-60 è stata fondamentale per svelare le complessità della segnalazione delle cellule tumorali, approfondendo la nostra comprensione dell'espressione degli oncogeni e promuovendo la scoperta di nuovi bersagli terapeutici. Questa linea cellulare fa parte del pannello di linee cellulari leucemiche utilizzato per lo screening di nuovi agenti chemioterapici. Un esempio significativo è l'uso delle cellule HL-60 per accertare le proprietà antileucemiche di composti estratti da organismi marini, rivelando effetti sia antiproliferativi che pro-apoptotici [2]. Inoltre, la linea cellulare ha facilitato l'esame di vie di segnalazione fondamentali come JAK/STAT e la loro influenza sulla proliferazione delle cellule leucemiche, oltre a valutare il potenziale terapeutico di composti bioattivi come il timochinone [3].
Immunologia
Le cellule HL-60 costituiscono un solido sistema in vitro per sondare varie risposte immunitarie, compreso il complesso processo della chemiotassi e la regolazione dell’espressione dei principali mediatori immunitari. Queste cellule possono differenziarsi in cellule mieloidi simili a macrofagi e neutrofili, fungendo da modello versatile per lo studio delle vie infiammatorie. Ad esempio, le cellule simili ai macrofagi derivate da HL-60 sono state impiegate per esplorare il potenziale antinfiammatorio dei fitochimici del genere Brassica [4]. In un altro studio, la differenziazione delle cellule HL-60 in cellule simili ai neutrofili ha permesso ai ricercatori di identificare i geni fondamentali per la differenziazione cellulare e le relative funzioni immunitarie [5].
Ricerca farmacologica
Le capacità di differenziazione mieloide delle cellule HL-60 sono state sfruttate anche nella scoperta di farmaci, in particolare per identificare candidati in grado di modulare la via di differenziazione, fondamentale nel trattamento della leucemia. Ciò è esemplificato da studi che hanno utilizzato la linea cellulare HL-60 per valutare il potenziale antitumorale di prodotti naturali [6].
Inoltre, la linea cellulare HL-60 viene utilizzata per studiare vari aspetti della biologia delle linee cellulari mieloidi, come la comprensione di come il trattamento con agenti quali l'acido retinoico possa portare alla differenziazione monocitaria, o di come queste cellule imitino i neutrofili primari nella generazione di trappole extracellulari. L'uso del modello per chiarire gli eventi molecolari delle neoplasie ematologiche è ulteriormente esteso dalla sua applicazione negli studi sui pannelli di cellule mutanti, in particolare nel contesto dell'analisi degli hotspot p53 nella leucemia.
Per chi esplora la meccanica cellulare, il tempo di raddoppio delle HL-60 e la loro risposta all'elettroporazione nei canali microfluidici, la linea cellulare offre una piattaforma affidabile per la ricerca.
Linea cellulare HL-60 per la tua ricerca
Cellule HL-60: Pubblicazioni di ricerca
Sono disponibili diversi studi di ricerca sulle cellule HL-60. Di seguito abbiamo elencato alcuni esempi degni di nota:
Questo articolo di ricerca ha proposto l'effetto antitumorale di un composto, lo Stigmast-5-en-3-ol, sulle cellule di leucemia HL-60 e sulle cellule di cancro al seno MCF7.
Questo studio descrive il ruolo della segnalazione JAK/STAT nella proliferazione delle cellule HL-60. Inoltre, i ricercatori indagano il potenziale terapeutico del composto timochinone utilizzando questa linea cellulare leucemica. Il composto inibisce la proliferazione cellulare e induce la morte cellulare riattivando l'espressione dei regolatori negativi della cascata JAK/STAT.
Questo studio ha utilizzato cellule HL-60 per derivare un modello cellulare simile ai macrofagi, al fine di studiare l'attività antinfiammatoria dei composti vegetali della Brassica.
Questo studio, pubblicato sulla rivista International Immunopharmacology, ha sviluppato un mimico delle cellule neutrofile dalla linea cellulare HL-60 utilizzando il dimetilsolfossido. Lo studio ha osservato che il gene ERK è coinvolto nella differenziazione di queste cellule.
Questo articolo di ricerca indaga il potenziale antitumorale dei composti polifenolici vegetali, ovvero l'acido gallico e l'acido ellagico, sulle cellule di leucemia HL-60 sensibili ai farmaci e resistenti.
Linea cellulare HL-60 Risorse: protocolli, video e altro
Sono disponibili numerose risorse didattiche online sulla linea cellulare HL-60. Questa sezione tratterà alcune risorse che descrivono la coltura e la trasfezione di questa linea cellulare.
Protocolli di coltura cellulare
Le risorse che descrivono i metodi di coltura delle cellule HL-60 sono:
- Propagazione delle cellule HL-60: questo documento fornisce informazioni sulla subcoltura delle cellule HL-60.
- Linea cellulare HL-60: questo sito web contiene le informazioni di base sulle cellule HL-60 e sui protocolli, tra cui la coltura, il congelamento e lo scongelamento delle cellule.
Protocolli di trasfezione
Di seguito sono riportate alcune risorse che descrivono i metodi di trasfezione scelti per le cellule HL-60.
- Trasfezione delle cellule HL-60: questo link contiene una procedura dettagliata di trasfezione per le cellule leucemiche HL-60.
- Trasfezione transitoria delle cellule HL-60: questo documento contiene informazioni utili sulla linea cellulare e fornisce un protocollo dettagliato per la trasfezione transitoria delle cellule HL-60.
Video relativi alla linea cellulare HL-60
Le risorse video sulle cellule HL-60 sono molto limitate.
- Passaggio delle cellule HL-60: questo video spiega il protocollo per la subcoltura delle cellule HL-60.
Ci auguriamo che questo articolo vi fornisca le informazioni di base sulla coltura e il mantenimento della linea cellulare HL-60. Inoltre, può approfondire la vostra conoscenza dei vantaggi dell'utilizzo di queste cellule leucemiche nella ricerca. Se avete intenzione di utilizzare questa linea cellulare, ordinatela da noi.
Linea cellulare HL-60: domande frequenti fondamentali per i ricercatori
La linea cellulare HL-60 è una linea cellulare di leucemia promielocitica derivata da un paziente affetto da leucemia promielocitica acuta. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca per studiare la differenziazione delle cellule mieloidi e l'espressione degli oncogeni.
L'acido retinoico induce la differenziazione nella linea cellulare HL-60, stimolando la maturazione delle cellule in cellule simili ai granulociti. Questo processo è fondamentale per lo studio dei meccanismi alla base della differenziazione mieloide.
Il siero è un componente fondamentale dei terreni di coltura delle cellule ematopoietiche, in quanto fornisce i fattori di crescita e le sostanze nutritive essenziali necessari per la proliferazione e il mantenimento delle cellule HL-60 in coltura.
Sì, la linea cellulare HL-60 è in grado di effettuare la chemiotassi, ovvero il movimento delle cellule in risposta a stimoli chimici. Ciò la rende utile per i test di chemiotassi e per lo studio della migrazione cellulare.
La linea cellulare HL60, che presenta espressione di oncogeni cellulari, funge da sistema modello per studiare la regolazione dell'espressione degli oncogeni e il loro ruolo nella leucemogenesi.
La linea cellulare HL-60 è di inestimabile utilità negli studi di biologia cellulare, in particolare per lo studio del ciclo cellulare, dei processi di differenziazione cellulare e degli eventi molecolari che portano alla leucemia.
I pannelli di linee cellulari leucemiche consentono di condurre studi comparativi su diverse linee cellulari leucemiche, analizzandone il corredo genetico, i profili mutazionali, la risposta ai farmaci e le vie molecolari coinvolte nella leucemogenesi, come la via MAPK.
I certificati di analisi e di origine possono generalmente essere scaricati o richiesti al fornitore o all'archivio che mette a disposizione la linea cellulare HL-60, garantendo così ai ricercatori di ricevere cellule autenticate e prive di contaminazioni per i propri studi.
La linea cellulare HL-60 può essere differenziata per acquisire caratteristiche simili a quelle dei neutrofili primari, compresa la capacità di formare trappole extracellulari, consentendo ai ricercatori di utilizzarla come modello surrogato per studiare il comportamento e la funzione dei neutrofili.
Le cellule HL-60 vengono utilizzate come modello in vitro per lo studio della leucemia promielocitica acuta, della biologia delle linee cellulari mieloidi e degli effetti di vari composti sulla differenziazione e sulla proliferazione. Vengono inoltre impiegate in esperimenti volti a studiare le risposte cellulari quali la chemiotassi, l'espressione degli oncogeni e l'impatto delle mutazioni sui processi cellulari.
L'abbreviazione "HL-60" sta per "Human Leukemia 60" (Leucemia umana 60). Indica la sessantesima linea cellulare ottenuta da pazienti affetti da leucemia al momento della sua creazione. La sigla "HL" indica che si tratta di cellule leucemiche umane.
Il tempo di raddoppio delle cellule HL-60 è di circa 36-48 ore in condizioni di crescita ottimali. Tuttavia, tale valore può variare a seconda delle condizioni di coltura e del numero di passaggi delle cellule.
Quando le cellule HL-60 vengono trattate con il 12-miristato-13-acetato di forbol (PMA), in genere si differenziano in un tipo cellulare simile ai macrofagi o ai monociti. Questa differenziazione rientra nello studio dei percorsi di differenziazione monocitaria e nella comprensione dei meccanismi di differenziazione delle cellule mieloidi.
Riferimenti
- Fleck, R., S. Romero-Steiner e M. Nahm, Uso della linea cellulare HL-60 per misurare la capacità opsonica degli anticorpi pneumococcici. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): pagg. 19-27.
- Fernando, I.S., et al., Effetti apoptotici e antiproliferativi dello Stigmast-5-en-3-ol derivato dalla Dendronephthya gigantea sulle cellule di leucemia umana HL-60 e di carcinoma mammario umano MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: pp. 297-305.
- Almajali, B., et al., Il timochinone sopprime la proliferazione cellulare e potenzia l'apoptosi delle cellule leucemiche HL60 attraverso la riespressione dei regolatori negativi JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analisi del potenziale antinfiammatorio dei composti bioattivi della Brassica in un modello cellulare simile ai macrofagi umani derivato dalle cellule HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., et al., L'ERK è coinvolta nella differenziazione e nella funzione delle cellule simili ai neutrofili HL-60 indotte dal dimetilsolfossido, che imitano i neutrofili infiammatori. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Attività antileucemica dei composti bioattivi derivati dalla Brassica nelle cellule di leucemia mieloide HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.