Cellule DU-145 - Guida completa per ricercatori
DU-145 è una linea cellulare di carcinoma prostatico umano ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. Queste cellule costituiscono un modello prezioso per lo studio della biologia del cancro alla prostata, la sperimentazione farmacologica e lo sviluppo di farmaci. Inoltre, i ricercatori utilizzano le cellule DU-145 per studiare i meccanismi molecolari alla base dello sviluppo, della crescita e della progressione del cancro alla prostata.
- Terreno di coltura
- EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) con integratori di terreno, ovvero 10% di siero fetale bovino (FBS), 2 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO3 ed EBSS. Il terreno viene rinnovato 2-3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio della linea DU-145 varia tra le 30 e le 40 ore.
- Tipo di crescita
- La linea cellulare DU-145 è una linea cellulare aderente.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina DU-145
- Informazioni generali e origine della linea cellulare DU-145
- Coltura delle cellule DU-145
- Linea cellulare DU-145: vantaggi e limiti
- Applicazioni di ricerca delle cellule DU-145
- 5. Pubblicazioni di ricerca sulle cellule DU-145
- Risorse per la linea cellulare DU-145: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Informazioni generali e origine della linea cellulare DU-145
Prima di iniziare a lavorare con una linea cellulare, è fondamentale comprenderne le caratteristiche fondamentali e l'origine. Questa sezione fornirà una comprensione completa delle caratteristiche e dell'origine della linea cellulare DU-145. Imparerete: Cosa sono le cellule tumorali DU145? Qual è la morfologia delle cellule DU145? Qual è la differenza tra PC-3 e DU145?
- La DU-145, una linea cellulare di cancro alla prostata umana, è stata derivata dal cervello di un uomo caucasico (69 anni) affetto da carcinoma prostatico metastatico. Queste cellule sono state depositate per la prima volta da K.R. Stone e colleghi nel 1978.
- Come le cellule tumorali della prostata PC-3, anche le DU-145 esprimono i recettori degli androgeni. Tuttavia, quando queste cellule sono sottoposte a trattamento con ligandi androgenici, non mostrano alcuna attività dei geni sensibili ai recettori degli androgeni e sono quindi considerate cellule androgeno-indipendenti.
- Le cellule DU-145 possiedono una morfologia epiteliale.
- Le cellule DU-145 sono ipotriploidi e hanno un numero cromosomico modale di 64. Presentano diversi cromosomi marcatori, quali del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) e del (9) (p11).
PC-3 vs DU145
Entrambe le linee cellulari del cancro alla prostata sono indipendenti dal recettore degli androgeni. Si differenziano in termini di potenziale tumorigenico e metastatico. Quando iniettata in un topo immunocompromesso, la linea cellulare PC-3 forma un adenocarcinoma di grado IV altamente metastatico. Al contrario, la linea cellulare DU-145 sviluppa un cancro alla prostata con un potenziale metastatico moderato [1].
Coltura delle cellule DU-145
La linea cellulare DU-145 è ampiamente utilizzata nei laboratori di ricerca sul cancro alla prostata. È necessario apprendere i seguenti punti chiave per facilitarne la coltura in modo semplice ed efficiente. Questa sezione includerà informazioni sul terreno di coltura DU145, sul tempo di raddoppio, sulle condizioni di coltura cellulare e sui protocolli.
Punti chiave per la coltura delle cellule DU-145
Tempo di raddoppio della popolazione:
Il tempo di raddoppio delle cellule DU-145 varia tra le 30 e le 40 ore.
Aderenzi o in sospensione:
La DU-145 è una linea cellulare aderente.
Densità di semina:
Le cellule DU-145 vengono seminate a una densità cellulare raccomandata di 2 x 104 cellule/cm2. A questa densità, le cellule formano un monostrato confluente in circa 4 giorni. Per la semina, le cellule vengono lavate con soluzione salina tamponata con fosfato 1x e incubate con la soluzione di passaggio Accutase. Dopo 8-10 minuti di incubazione a temperatura ambiente, alle cellule vengono aggiunti terreni di coltura freschi e vengono centrifugate. Il pellet cellulare raccolto viene accuratamente risospeso e le cellule vengono trasferite in nuove fiasche di coltura per la crescita.
Terreno di crescita:
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) con integratori del terreno, ovvero 10% di siero fetale bovino (FBS), 2 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO3 ed EBSS. Il terreno viene rinnovato 2-3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le colture di DU-145 vengono mantenute in un incubatore umidificato a 37 °C con una fonte di CO₂ al 5%.
Conservazione:
Le cellule DU-145 vengono conservate in fase vapore di azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150 °C in un congelatore elettrico per mantenere la vitalità cellulare a lungo termine.
Processo di congelamento e terreno:
Per le cellule di cancro alla prostata DU-145 si raccomandano i terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF. Per congelare le cellule si opta per un metodo di congelamento lento che permette alla temperatura di scendere gradualmente di 1 °C. Questo previene qualsiasi shock alle cellule e aiuta a mantenerne la vitalità.
Processo di scongelamento:
Le fiale di cellule DU-145 congelate vengono scongelate rapidamente in un bagno d'acqua a 37 °C per 40-60 secondi. Successivamente, alle cellule vengono aggiunti terreni di coltura e vengono centrifugate per rimuovere i componenti del mezzo di congelamento. Le cellule raccolte vengono risospese in un terreno di crescita e versate nel pallone per la crescita. Il recupero dal congelamento richiede circa 24 ore.
Livello di biosicurezza:
Per la coltura della linea cellulare DU145 indipendente dal recettore degli androgeni sono necessarie condizioni di biosicurezza di livello 1.
Linea cellulare DU-145: vantaggi e limiti
Come altre linee cellulari, la linea cellulare del cancro alla prostata DU-145 presenta alcuni pro e contro. Queste caratteristiche possono aiutarti a decidere se utilizzarla nella tua ricerca. I principali vantaggi e svantaggi delle cellule DU-145 sono riportati di seguito.
Vantaggi
I vantaggi delle cellule DU-145 sono:
Tumorigenicità
La DU-145 è una linea cellulare di cancro alla prostata aggressiva e tumorigenica con un potenziale metastatico moderato. Viene usata per sviluppare il modello di xenotrapianto DU145 in topi immunocompromessi per studiare la biologia, lo sviluppo e la crescita del cancro alla prostata in vitro e in vivo.
Indipendenza dal recettore degli androgeni
Le cellule del cancro alla prostata DU-145 sono indipendenti dal recettore degli androgeni. Non dipendono dagli androgeni per la crescita e non mostrano alcuna risposta a livello cellulare e molecolare quando trattate con androgeni. Ideali per la ricerca sui meccanismi del cancro alla prostata indipendente dagli ormoni.
Limiti
Le limitazioni della linea cellulare DU-145 sono:
Modello in vitro
DU-145 è un modello cellulare in vitro di carcinoma prostatico metastatico, quindi potrebbe non rappresentare appieno la complessità dei tumori primari della prostata. Inoltre, potrebbe non essere rappresentativo di tutti i tipi e sottotipi di cancro alla prostata a causa di caratteristiche specifiche quali l'indipendenza dal recettore degli androgeni.
Applicazioni di ricerca delle cellule DU-145
La linea cellulare DU-145 del cancro alla prostata ha una vasta gamma di applicazioni di ricerca. Di seguito sono elencate alcune applicazioni promettenti.
- Biologia del cancro alla prostata: la linea cellulare DU-145 è un modello rilevante per lo studio della biologia del cancro alla prostata. I ricercatori utilizzano queste cellule per indagare i meccanismi molecolari che guidano lo sviluppo, la progressione e la metastasi del cancro. Inoltre, vengono esplorate anche le alterazioni genetiche comunemente associate al cancro alla prostata. Una ricerca condotta nel 2021 ha esaminato le cellule DU-145 per identificare potenziali biomarcatori per efficienti implicazioni diagnostiche e terapeutiche. Lo studio ha suggerito l'actina gamma 1 (ACTG1) come potenziale biomarcatore del cancro alla prostata, poiché promuove la proliferazione delle cellule tumorali e regola le metastasi tramite l'attivazione della via MAPK/ERK [2].
- Screening e sviluppo di farmaci: le cellule del cancro alla prostata DU-145 sono ampiamente utilizzate per testare la citotossicità e l'efficacia di potenziali farmaci antitumorali. Ciò aiuta i ricercatori a identificare nuovi farmaci, a comprendere la resistenza ai farmaci e i meccanismi molecolari sottostanti. Uno studio condotto nel 2022 ha esplorato l'effetto citotossico di una miscela resinosa, la propoli o colla d'api, nelle linee cellulari del cancro alla prostata PC-3 e DU-145. Lo studio ha mostrato effetti inibitori della crescita di questa sostanza naturale in entrambe le linee cellulari e ne ha proposto il potenziale antitumorale [3]. Nel 2019 è stato condotto un altro studio che ha esaminato gli effetti antiproliferativi di un composto naturale, la betaina, nelle cellule del cancro alla prostata DU-145. La ricerca ha dimostrato che la betaina esercita attività antiproliferative aumentando la morte cellulare mediata dallo stress ossidativo e l'infiammazione nelle cellule DU-145 [4].
5. Pubblicazioni scientifiche relative alle cellule DU-145
Di seguito sono riportate alcune pubblicazioni di ricerca sulla linea cellulare DU-145.
Questo studio, pubblicato su Biological Trace Element Research nel 2020, ha suggerito che il solfato di zinco (ZnSO4) eserciti effetti antiproliferativi nelle cellule DU-145 attraverso l'induzione di apoptosi, cambiamenti morfologici, danno ossidativo e infiammazione.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato su BMC Complementary Medicine and Therapies nel 2020. Lo studio ha esplorato il potenziale citotossico e antimetastatico di una pianta, l'estratto di corteccia di Annona muricata L., e del suo principio bioattivo, l'annonacina, nella linea cellulare DU-145.
Questa pubblicazione su IUBMB Life (2019) ha ipotizzato che l'interazione dell'RNA lungo non codificante LOXL1-AS1 con miR-let-7a-5p e la via EGFR regolino la resistenza alla doxorubicina nelle cellule del cancro alla prostata DU-145.
Questo articolo pubblicato su Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) ha affermato che la sottoregolazione del gene Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) provoca la morte delle cellule DU-145 e inibisce la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) attraverso l'attivazione della via Pyk2/MKK7.
Questo studio pubblicato sul Journal of Food Biochemistry (2019) ha suggerito che la casticina, un polimetossiflavone, inibisce la migrazione e l'invasione delle cellule DU-145 regolando la segnalazione Ras/Akt/NF-κB.
Risorse per la linea cellulare DU-145: protocolli, video e altro
Sono disponibili molte risorse online sulla linea cellulare DU-145 del cancro alla prostata. In questa sezione verranno menzionate alcune risorse che spiegano la manipolazione, la manutenzione e il protocollo di trasfezione per queste cellule:
- Trasfezione DU-145: questo video tutorial è una guida passo passo per imparare il protocollo di trasfezione delle cellule DU-145.
Il protocollo di coltura cellulare DU-145 è menzionato qui.
- Subcoltura delle cellule DU-145: questo link vi aiuterà a imparare il protocollo per la subcoltura delle cellule DU-145.
- Cellule DU-145: questo sito web contiene molte informazioni utili sulla linea cellulare DU-145, tra cui il terreno di coltura DU145, il protocollo per la subcoltura e la gestione delle colture proliferative e crioconservate.
Riferimenti
- Lima, A.R., et al., Discriminazione tra l'esometaboloma delle cellule prostatiche umane normali e quelle tumorali mediante GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., Il silenziamento dell'espressione di ACTG1 induce la transizione epiteliale-mesenchimale del cancro alla prostata attraverso la via di segnalazione MAPK/ERK. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Effetti antitumorali degli estratti di propoli ottenuti con il metodo di separazione a freddo sulle linee cellulari del cancro alla prostata PC-3 e DU-145. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., La betaina sopprime la proliferazione cellulare aumentando l'apoptosi mediata dallo stress ossidativo e l'infiammazione nella linea cellulare del cancro alla prostata umano DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.