Linea cellulare BEWO
BeWo è una linea cellulare derivata da coriocarcinoma umano ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. Serve come modello in vitro per esplorare l'intricato processo di sviluppo della placenta e la sincizializzazione dei trofoblasti umani. I ricercatori utilizzano queste cellule anche per studiare il comportamento dei trofoblasti, la produzione di ormoni e il trasporto di sostanze attraverso la placenta. Inoltre, le cellule BeWo offrono anche applicazioni in tossicologia, infezioni e studi sulla trasmissione di malattie.
Questo articolo contiene le conoscenze fondamentali sulle cellule BeWo che possono aiutarvi ad utilizzarle nella vostra ricerca. Include:
- Caratteristiche generali e origine delle cellule BeWo
- Linea cellulare BeWo: Informazioni sulla coltura
- Vantaggi e svantaggi della linea cellulare BeWo
- Applicazioni di ricerca delle cellule BeWo
- Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BeWo
- Risorse per la linea cellulare BeWo: Protocolli, video e altro
1. Caratteristiche generali e origine delle cellule BeWo
La conoscenza preliminare dell'origine e delle caratteristiche generali di una linea cellulare è fondamentale per il suo utilizzo nella ricerca. Questa parte dell'articolo esplora l'origine della linea cellulare BeWo, le sue caratteristiche e molto altro ancora. Qui imparerete a conoscere: Che cos'è la linea cellulare di coriocarcinoma BeWo? Che cos'è la sincizzazione di BeWo? Da dove provengono le cellule BeWo? Qual è la morfologia delle cellule BeWo? Qual è la ploidia di BeWo?
- La linea cellulare placentare BeWo ha avuto origine dal coriocarcinoma gestazionale maligno di una placenta fetale maschile nel 1968 [1]. Pertanto, serve come modello inestimabile per la ricerca sulla placenta.
- Le cellule di BeWo presentano una morfologia simile a quella epiteliale.
- Le cellule BeWo sono relativamente piccole, con dimensioni comprese tra 20 e 30 µM [2].
- Le cellule BeWo presentano un cariotipo stabile. Il loro numero di linee staminali è ipo-tetraploide. Il numero modale di cromosomi delle cellule BeWo è 86. Può variare da 71 a 178. Può variare da 71 a 178.
- Le cellule BeWo producono diversi ormoni, come la somatomammotropina corionica umana, la gonadotropina corionica umana (hCG) e gli ormoni steroidei.
- Le cellule BeWo esprimono marcatori molecolari, tra cui CK 7, E-caderina e VE-caderina.
Sottoclasse B30
La B30 è una sublinea di cellule BeWo. Viene utilizzata per studiare l'assorbimento e il trasporto di sostanze nutritive. Ciò è dovuto alla loro crescita vigorosa su membrane porose.
BeWo e JEG-3
Le linee cellulari BeWo JEG-3 derivano da coriocarcinomi e sono utilizzate nella ricerca sulla placenta. Le cellule BeWo producono ormoni a livelli inferiori rispetto alle JEG-3, come la gonadotropina corionica umana (hCG) e l'estradiolo.
2. Linea cellulare BeWo: Informazioni sulla coltura
Il mantenimento di una coltura cellulare può essere complicato se non si conoscono i dettagli chiave. Ad esempio: Qual è il tempo di raddoppio di BeWo? Qual è il terreno di coltura di BeWo? Come si coltiva la linea cellulare BeWo e come si congelano le cellule BeWo?
Punti chiave per la coltura delle cellule BeWo
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Tempo di raddoppio: |
Il tempo di raddoppio della popolazione delle cellule BeWo è di circa 30 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
BeWo è una linea cellulare aderente. |
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Densità di semina delle cellule: |
La densità di semina raccomandata per le cellule BeWo è di 1 x104 cellule/cm2. Per la semina, il vecchio terreno di coltura viene rimosso dalle cellule e queste vengono risciacquate con 1 x PBS. Successivamente, si aggiunge Accutase (soluzione di passaging) e le cellule vengono incubate per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Quindi, le cellule staccate vengono aggiunte al terreno di coltura e centrifugate. Le cellule raccolte vengono quindi risospese e versate in una nuova fiasca. |
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Terreno di coltura: |
Per la crescita delle cellule BeWo si utilizza il terreno Ham's F12K contenente il 10% di FBS, 2,0 mM di L-Glutamina, 2,0 mM di Sodio piruvato e 2,5 g/L di NaHCO3. Il terreno di coltura delle cellule BeWo deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana. |
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Condizioni di crescita: |
Le cellule BeWo sono mantenute in un incubatore umidificato a 37 gradi Celsius e con un apporto di CO2 del 5%. |
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Conservazione: |
Le cellule BeWo congelate sono conservate a una temperatura inferiore a -150°C in un congelatore elettrico a bassissima temperatura o nella fase vapore dell'azoto liquido. |
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Processo e terreno di congelamento: |
Si raccomanda di congelare le cellule BeWo nel terreno di congelamento CM-1 o CM-ACF. Le cellule vengono congelate con un metodo di congelamento lento. Questo metodo consente una diminuzione della temperatura di solo 1 grado al minuto, evitando così alle cellule qualsiasi shock e proteggendo la vitalità delle cellule. |
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Processo di scongelamento: |
Le cellule congelate vengono scongelate immergendole in un bagno d'acqua a 37°C preimpostato per 40-60 secondi, finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Quindi si aggiunge del terreno di crescita fresco e le cellule vengono centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Il pellet cellulare raccolto viene risospeso e distribuito in una fiasca di coltura per la crescita. |
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Livello di biosicurezza: |
Il laboratorio di livello 1 di biosicurezza è necessario per gestire e mantenere le colture cellulari BeWo. |
3. Vantaggi e svantaggi della linea cellulare BeWo
Le cellule BeWo presentano caratteristiche uniche e sono dotate di specifici pro e contro. In questa sezione ne esploreremo alcuni degni di nota.
Vantaggi
I principali vantaggi della linea cellulare di coriocarcinoma BeWo sono:
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Modello cellulare placentare in vitro
Le cellule BeWo forniscono un modello in vitro per studiare il comportamento delle cellule del trofoblasto e la sincizializzazione della placenta, replicando processi difficili da osservare in vivo.
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Produzione di ormoni
Le cellule BeWo secernono ormoni, come l'hCG e il lattogeno placentare, rendendole preziose per gli studi sulla regolazione ormonale e la ricerca in biologia riproduttiva.
Svantaggi
Gli svantaggi delle cellule di trofoblasto BeWo sono:
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Linea cellulare cancerogena
Le cellule BeWo sono derivate da un coriocarcinoma, che è un tumore della placenta. Questa origine potrebbe non rappresentare pienamente la normale funzione delle cellule placentari.
4. Applicazioni di ricerca delle cellule BeWo
La linea cellulare BeWo è ampiamente utilizzata nella ricerca sulla placenta. Di seguito vengono citate alcune applicazioni specifiche di questa linea cellulare:
- Ricerca sulla placenta e sulla gravidanza: Le cellule BeWo sono fondamentali nella ricerca sulla placenta e sulla gravidanza. I ricercatori utilizzano queste cellule per studiare il trasporto di sostanze, tra cui farmaci, nutrienti e tossine, attraverso la barriera placentare. Inoltre, studiano anche la produzione e la regolazione degli ormoni, tra cui la gonadotropina corionica umana (hCG), il lattogeno placentare e gli ormoni steroidei. Ciò è importante per comprendere i cambiamenti ormonali durante la gravidanza. Una ricerca condotta nel 2018 ha analizzato l'effetto dei ritardanti di fiamma bromurati (BFR) sull'attività della sulfotransferasi nella linea cellulare trofoblastica umana (BeWo). Questo enzima è coinvolto nella regolazione dei livelli intracellulari dell'ormone tiroideo [3].
- Ricerca su infezioni e malattie: Le cellule BeWo vengono utilizzate anche per esaminare l'interazione tra agenti patogeni e cellule placentari. Questa ricerca è preziosa per comprendere le malattie che possono essere trasmesse dalla madre al feto e per sviluppare strategie per proteggere la salute del feto. Inoltre, questa linea cellulare aiuta i ricercatori a studiare le complicazioni che insorgono durante la gravidanza, come la preeclampsia. Ad esempio, uno studio condotto da Michalina Bralewska nel 2023 ha utilizzato il modello cellulare di trofoblasto BeWo e ha scoperto che sia la cromogranina A (CgA) che il peptide da essa derivato, la catestatina (CST), possono avere un ruolo nell'intricato processo di patogenesi della preeclampsia (PE) [4]. Un altro studio ha esplorato il potenziale antitumorale della tricosantina utilizzando la linea cellulare di coriocarcinoma BeWo. La ricerca ha anche compiuto un ulteriore sforzo per scoprire i biomarcatori eseguendo un'analisi proteomica comparativa prima e dopo l'esperimento [5].
5. Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BeWo
Di seguito sono riportate alcune pubblicazioni di ricerca significative sulle cellule di trofoblasto BeWo.
Questo studio pubblicato su Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) propone che la segnalazione dell'AMPK attivi la mitofagia nelle cellule trofoblasti BeWo attraverso le vie di mitofagia facilitate da FUNDC1 e PRKN. Di conseguenza, la mitofagia contribuisce a mantenere la produzione di ATP e il potenziale di membrana mitocondriale.
Questo articolo è stato pubblicato su Animal Cells and Systems (2020). Lo studio propone che l'etilparabene medi l'apoptosi delle cellule BeWo attraverso la regolazione della via della caspasi-3.
Questo studio, pubblicato su Drug Metabolism and Disposition (2023), ha utilizzato linee cellulari placentari, tra cui BeWo, JAR, JEG-3 e HTR-8/SVneo, per analizzare il deposito di xenobiotici e steroidi nelle cellule.
Questo articolo di ricerca pubblicato sull'International Journal of Molecular Medicine (2020) propone che l'apelina, ligando del recettore APJ, promuova la proliferazione delle cellule BeWo attraverso la segnalazione di APJ e ERK1/2, stat3 e AMPK. Potrebbe quindi essere un'adipochina essenziale che regola lo sviluppo della placenta.
Questo studio pubblicato su Epilepsia (2021) ha esplorato gli effetti dei nutrienti fetali e degli antiepilettici sui trasportatori di colina nella linea cellulare trofoblastica di derivazione umana BeWo.
6. Risorse per la linea cellulare BeWo: Protocolli, video e altro
Ecco alcune risorse online disponibili sulle cellule BeWo:
- Trasfezione in vitro: Questo video vi aiuterà a imparare il protocollo di trasfezione del DNA plasmidico in vitro per le cellule aderenti.
Il seguente link contiene informazioni sulla coltura cellulare delle cellule BeWo:
- Cellule BeWo: Questo sito web contiene informazioni essenziali sulla coltura cellulare della linea BeWo. Include informazioni sui terreni cellulari e sulle condizioni di coltura. Contiene anche protocolli per la subcultura e la manipolazione di colture crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Weber, M., et al., Citogenomica di sei linee cellulari trofoblastiche umane. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Caratteristiche dei trofoblasti in coltura a lungo termine. Bollettino di Biologia e Medicina Sperimentale, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha e A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Analisi proteomica comparativa dell'aggiunta di tricosantina alla linea cellulare BeWo. Molecole, 2022. 27(5): p. 1603.