Linea cellulare BxPC-3
BxPC-3 è una linea cellulare di cancro al pancreas di derivazione umana. Trova ampia applicazione negli studi sul cancro. I ricercatori impiegano queste cellule principalmente per studiare la biologia del cancro al pancreas, identificare bersagli terapeutici e sviluppare farmaci antitumorali.
Questo articolo contiene informazioni cruciali sulla linea cellulare BxPC-3 che possono aiutare in modo significativo a lavorare con essa. Principalmente, vengono trattati i seguenti argomenti:
- Informazioni generali e origine della linea cellulare BxPC-3
- Coltura delle cellule BxPC-3
- Linea cellulare BxPC-3: Vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule BxPC-3 nella ricerca
- Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BxPC-3
- Risorse per la linea cellulare BxPC-3: Protocolli, video e altro
1. informazioni generali e origine della linea cellulare BxPC-3
Conoscere l'origine di una linea cellulare è fondamentale per la sua applicabilità nella ricerca. La familiarità con le sue caratteristiche, tra cui la morfologia, le dimensioni delle cellule e la ploidia, rende il suo utilizzo più semplice e conveniente. In questa sede, imparerete a conoscere l'origine e le caratteristiche generali delle cellule BxPC-3: Cosa sono le cellule BxPC-3? Che cos'è la linea cellulare BxPC-3? Qual è l'origine della linea cellulare BxPC-3? Qual è la morfologia delle BxPC-3?
- Le cellule di carcinoma pancreatico umano BxPC-3 sono state derivate da una donna europea di 61 anni affetta da adenocarcinoma pancreatico nel 1986. Queste cellule si sono confermate tumorigeniche anche dopo che la paziente è stata sottoposta a diverse sedute di radio e chemioterapia. Questa linea cellulare è quindi un modello prezioso per studiare lo sviluppo e la progressione del cancro.
- Le cellule BxPC-3 hanno una morfologia simile alle cellule epiteliali.
- Il numero modale di cromosomi per le BxPC-3 è 59. Queste cellule presentano una delezione omozigote sul cromosoma 18q, che codifica per la proteina SMAD4/DPC4. Inoltre, la linea cellulare non presenta la mutazione kras di BxPC-3, comune tra i tumori pancreatici. Anche la delezione di BxPC-3 braf è presente in queste cellule di cancro al pancreas.
Qual è la differenza tra BxPC3 e PANC-1?
Le cellule BxPC-3 PADC (adenocarcinoma duttale pancreatico) e PANC-1 sono linee cellulari primarie di cancro del pancreas con morfologia epiteliale. Le prime cellule possiedono proprietà più simili a quelle epiteliali, mentre le seconde presentano caratteristiche più mesenchimali [1].
2. coltura delle cellule BxPC-3
La linea cellulare BxPC-3 è ampiamente utilizzata nei laboratori di ricerca sul cancro. È necessario conoscere i seguenti punti chiave per una coltura efficiente di questa linea cellulare di cancro del pancreas. Imparerete a conoscere: Qual è il tempo di raddoppio di bxpc3? Come si coltiva la linea cellulare BxPC-3?
Punti chiave per la coltura delle cellule BxPC-3
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Tempo di raddoppio della popolazione: |
Il tempo di raddoppiamento delle cellule BxPC-3 varia da 48 a 60 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
BxPC-3 è una linea cellulare aderente. |
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Rapporto di divisione: |
Le cellule BxPC-3 vengono subcoltivate in un rapporto compreso tra 1:2 e 1:4. Le cellule vengono lavate con 1 x PBS e incubate con una soluzione passante chiamata accutase. Dopo 8-10 minuti, alle cellule viene aggiunto del terreno fresco e le cellule vengono centrifugate. Il pellet viene nuovamente risospeso nel terreno e le cellule vengono versate in un nuovo recipiente di coltura per la crescita. |
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Terreno di crescita: |
Per la coltura della linea cellulare BxPC-3 si utilizza il terreno RPMI 1640. È integrato con il 10% di siero fetale bovino, 2,1 mM di glutammina stabile e 2,0 g/L di NaHCO3 per ottenere una crescita cellulare ideale. Il terreno deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana. |
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Condizioni di crescita: |
Le colture di cellule BxPC-3 sono mantenute in un incubatore umidificato a 37 °C collegato a una fonte di CO2 al 5%. |
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Conservazione: |
Le cellule congelate sono generalmente conservate a una temperatura inferiore a -150 °C o nella fase vapore dell'azoto liquido per proteggere la vitalità delle cellule. |
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Processo e terreno di congelamento: |
Per congelare le colture di cellule BxPC-3 si possono usare CM-1 o CM-ACF. Si segue un processo di congelamento lento che consente un calo della temperatura di solo 1 °C per evitare che le cellule subiscano uno shock. |
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Processo di scongelamento: |
Le cellule BxPC-3 congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua a 37 °C preimpostato per 40-60 secondi. Dopo aver lasciato un piccolo grumo di ghiaccio, le cellule vengono aggiunte al terreno di coltura fresco e centrifugate per rimuovere gli elementi del terreno congelato. Quindi, il pellet cellulare viene risospeso e le cellule vengono distribuite nella fiasca per la crescita. |
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Livello di biosicurezza: |
Le colture di cellule BxPC-3 vengono mantenute in laboratori di livello di biosicurezza 1. |
3. linea cellulare BxPC-3: Vantaggi e limiti
BxPC-3 è una nota linea cellulare di adenocarcinoma pancreatico associata a diversi vantaggi e limiti. I principali vantaggi e svantaggi della linea cellulare sono elencati qui di seguito.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule BxPC-3 sono:
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Modello in vitro di cancro al pancreas
Le cellule BxPC-3, derivate da pazienti affetti da adenocarcinoma pancreatico, presentano caratteristiche rilevanti, che le rendono un modello adatto per studiare il comportamento del tumore del pancreas in vitro.
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Linea cellulare tumorigenica
Le cellule BxPC-3 possiedono proprietà tumorigeniche e possono formare tumori quando vengono iniettate in topi nudi o immunocompromessi. Questi tumori assomigliano molto ai tumori primari dell'adenocarcinoma pancreatico, rendendo il modello di xenotrapianto BxPC-3 ideale per lo studio della crescita e della progressione del cancro.
Limitazioni
Le limitazioni associate alla linea cellulare BxPC-3 sono:
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Contaminazione incrociata
La linea cellulare BxPC-3, come qualsiasi altra, comporta un rischio di contaminazione incrociata. I ricercatori devono esercitare cautela e attenersi a rigorosi protocolli di prevenzione della contaminazione quando manipolano queste cellule.
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Tasso di crescita lento
Le cellule BxPC-3 presentano un tasso di proliferazione relativamente lento, con un tempo di raddoppio compreso tra 48 e 60 ore. Questa caratteristica può richiedere periodi di incubazione più lunghi per esperimenti specifici, causando potenzialmente ritardi nei progressi della ricerca.
4. applicazioni delle cellule BxPC-3 nella ricerca
Le cellule BxPC-3 offrono numerose applicazioni nella ricerca sul cancro. Le applicazioni più comuni sono:
- Ricerca sul cancro del pancreas: Le cellule BxPC-3 imitano l'adenocarcinoma pancreatico e vengono quindi utilizzate per esplorare i meccanismi genetici e molecolari alla base dello sviluppo e della crescita del tumore. Inoltre, i ricercatori scoprono nuovi biomarcatori e bersagli terapeutici utilizzando queste cellule. Inoltre, le cellule BxPC-3 esprimono significativamente fattori angiogenici, come l'interleuchina-8 (IL-8), la prostaglandina E2 (PGE2) e il fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF), che le rendono adatte allo studio dell'angiogenesi. L'angiogenesi è un processo cruciale associato alla crescita del cancro e alle metastasi. Uno studio pubblicato nel 2022 ha studiato che la sovraespressione della laminina-5 gamma-2 (LAMC2) nel PDAC (adenocarcinoma duttale pancreatico) BxPC3 ne aumenta la tumorigenesi attraverso la regolazione della via di segnalazione EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR [2].
- Scoperta e sviluppo di farmaci: La linea cellulare BxPC-3 funge da prezioso modello di sperimentazione di farmaci antitumorali. I ricercatori esaminano gli effetti citotossici, antimetastatici e apoptotici di potenziali farmaci sul PDAC BxPC3. Uno studio condotto da Alexandria Turner e colleghi nel 2020 ha esplorato le proprietà apoptotiche degli estratti di frutta di Elaeocarpus reticulatus nelle cellule di cancro al pancreas BxPC-3 [3]. Allo stesso modo, nel 2020 è stata condotta una ricerca che ha determinato il potenziale antitumorale di un estratto metanolico di una pianta chiamata Oxialis obtriangulata nelle cellule BxPC-3. Inoltre, i ricercatori hanno anche studiato la via cellulare meccanicistica attraverso la quale l'estratto della pianta esercitava gli effetti terapeutici [4].
5.pubblicazioni di ricerca sulle cellule BxPC-3
In questa sezione sono elencate alcune delle pubblicazioni più citate e interessanti riguardanti la linea cellulare BxPC-3.
Il licocumarone induce la morte delle cellule di adenocarcinoma pancreatico BxPC-3 inibendo DYRK1A
Questa pubblicazione su Chemico-Biological Interactions (2020) ha esplorato gli effetti apoptotici di un prodotto naturale, il licocumarone, sulle cellule di tumore pancreatico BxPC-3.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato su Anticancer Research (2022). Lo studio propone che l'idrossiclorochina provochi la morte delle cellule BxPC3 inibendo il gene BCL-XL.
La ricerca è stata pubblicata nel 2020 sul Journal of Cellular Biochemistry. Lo studio afferma che un composto naturale, il salidroside, mostra attività antitumorali nelle cellule BxPC-3 regolando la cascata di segnalazione HIF-1α (hypoxia-inducible factor) e LOXL2.
Questo articolo pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy suggerisce che ibrutinib può essere utilizzato come ottimo radiosensibilizzatore nei pazienti affetti da cancro al pancreas. Uno studio in vitro su cellule BxPC-3 indica che l'ibrutinib riduce la fosforilazione dell'EGFR e l'espressione di pAKT e dei geni a valle upregolati dalla radioterapia.
Questo studio pubblicato su Integrative Cancer Therapies propone che un prodotto naturale, la chelidonina, eserciti un'attività apoptotica nelle cellule pancreatiche umane BxPC-3 attraverso la regolazione della segnalazione p53 e GADD45a di BxPC3.
6. risorse per la linea cellulare BxPC-3: Protocolli, video e altro
La linea cellulare BxPC-3 presenta molti vantaggi interessanti che la rendono adatta alla ricerca. Molte risorse online sulla linea cellulare BxPC-3 ne citano la manipolazione, la manutenzione e il protocollo di trasfeziones.
- Trasfezione di BxPC3: Questo video è una guida passo-passo per l'apprendimento del protocollo di trasfezione delle cellule BxPC-3.
Questa sezione dell'articolo comprende alcuni link che spiegano i protocolli di coltura delle cellule BxPC3.
- Coltura di cellule BxPC3: Questo sito web vi aiuterà a imparare i protocolli per la subcultura e la manipolazione di colture BxPC-3 crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Kim, Y., et al., Profilazione proteomica comparativa di linee cellulari di adenocarcinoma duttale pancreatico. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., La sovraespressione della laminina-5 gamma-2 promuove la tumorigenesi dell'adenocarcinoma duttale pancreatico attraverso la cascata EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Gli estratti di frutta di Elaeocarpus reticulatus riducono la vitalità e inducono l'apoptosi nelle cellule di cancro al pancreas in vitro. Rapporti di biologia molecolare, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potenziale antitumorale di Oxialis obtriangulata nelle cellule di cancro al pancreas attraverso la regolazione della via mediata da ERK/Src/STAT3. Molecole, 2020. 25(10): p. 2301.