Cellule B16-F10 - Approfondimento sulla linea cellulare di melanoma B16-F10 nella ricerca sulle metastasi
Le cellule B16-F10 costituiscono una linea cellulare di melanoma derivata dal topo C57BL/6J. Sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro della pelle. I ricercatori utilizzano queste cellule per studiare lo sviluppo e la progressione del tumore e gli interventi terapeutici. Questo articolo tratterà gli aspetti fondamentali delle cellule di melanoma B16-F10. In particolare, includerà:
- Terreno di coltura
- Le cellule B16-F10 vengono coltivate nel terreno DMEM. Il terreno è integrato con 10% di FBS, 4 mM di L-glutammina, 1,5 g/L di NaHCO3, 4,5 g/L di glucosio e 1,0 mM di piruvato di sodio per una crescita cellulare ottimale. Il terreno di coltura deve essere sostituito 2 o 3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio delle cellule B16-F10 è di circa 20,1 ore. Può variare da 17 a 21 ore, a seconda delle condizioni di coltura.
- Tipo di crescita
- B16-F10 è una linea cellulare aderente. Le cellule crescono rapidamente e formano monostrati.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina B16-F10
- Origine e caratteristiche generali della linea cellulare B16-F10
- Informazioni sulla coltura delle cellule B16-F10
- Cellule B16-F10: vantaggi e svantaggi
- Applicazioni di ricerca delle cellule B16-F10
- Pubblicazioni relative alla linea cellulare B16-F10
- Risorse per la linea cellulare B16-F10: protocolli, video e altro
- Origine e caratteristiche generali della linea cellulare B16-F10
- Informazioni sulla coltura delle cellule B16-F10
- Cellule B16-F10: vantaggi e svantaggi
- Applicazioni di ricerca delle cellule B16-F10
- 5. Pubblicazioni relative alla linea cellulare B16-F10
- Risorse per la linea cellulare B16-F10: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Origine e caratteristiche generali della linea cellulare B16-F10
Questa sezione ti fornirà informazioni dettagliate sull'origine e sulle caratteristiche distintive delle cellule tumorali del melanoma B16F10. Ti aiuterà a utilizzare la linea cellulare in modo efficiente nel tuo lavoro di ricerca. In particolare, imparerai: Cosa sono le cellule B16-F10? Da cosa deriva la linea B16-F10? Qual è la morfologia della linea cellulare B16-F10? Qual è la dimensione delle cellule B16-F10?
- La B16-F10 è un sottoclone della linea cellulare tumorale B16 derivata dal tessuto cutaneo di topi C57BL/6J. In questo caso, le cellule di melanoma B16F10 sono state sviluppate dopo l'iniezione endovenosa della linea B16 in topi immunocompromessi o singeneici. Queste cellule sono state selezionate per la loro capacità di formare colonie polmonari metastatiche in vivo e successivamente stabilizzate dopo dieci cicli di formazione di colonie polmonari in vitro [1]. È stata sviluppata da Fidler e colleghi nel 1976.
- Le linee cellulari B16-F10 hanno un aspetto epiteliale e fusiforme.
- La dimensione approssimativa delle cellule B16-F10 è di 15,4 ± 1,4 μm [2].
Cellule B16-F1 e B16-F10
Le cellule B16-F1 e B16-F10 derivano dalla linea cellulare madre B16. Entrambe hanno la stessa origine e presentano caratteristiche quasi simili. Tuttavia, la differenza principale è la loro capacità metastatica. Le cellule B16-F10 hanno un potenziale metastatico elevato, mentre le B16-F1 ne hanno uno basso [3].
Informazioni sulla coltura delle cellule B16-F10
Prima di manipolare e coltivare una linea cellulare, è necessario conoscere il suo tempo di raddoppio, i terreni di coltura, le condizioni e i protocolli di coltura cellulare. In questa sezione tratteremo: Qual è il tempo di raddoppio delle cellule B16-F10? Come si coltivano le cellule B16-F10? Qual è il terreno di coltura delle cellule B16-F10? Quali sono le condizioni di coltura raccomandate per le cellule B16-F10?
Punti chiave per la coltura delle cellule B16-F10
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio delle cellule B16-F10 è di circa 20,1 ore. Può variare da 17 a 21 ore, a seconda delle condizioni di coltura.
Aderenzi o in sospensione:
La B16-F10 è una linea cellulare aderente. Le cellule crescono rapidamente e formano monostrati.
Rapporto di divisione:
Le cellule B16-F10 vengono subcoltivate con un rapporto di divisione compreso tra 1:2 e 1:4. Le cellule vengono lavate con soluzione salina tamponata con fosfato (1x) e quindi incubate con soluzione di passaggio Accutase per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Alle cellule viene aggiunto terreno fresco e vengono centrifugate. Il pellet cellulare raccolto viene nuovamente risospeso e le cellule vengono distribuite in una nuova fiasca contenente terreno di coltura fresco in base al rapporto di divisione.
Terreno di crescita:
Le cellule B16-F10 vengono coltivate nel terreno DMEM. Il terreno viene integrato con 10% di FBS, 4 mM di L-glutammina, 1,5 g/L di NaHCO3, 4,5 g/L di glucosio e 1,0 mM di piruvato di sodio per una crescita cellulare ottimale. Il terreno di coltura deve essere sostituito 2 o 3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le cellule B16-F10 vengono coltivate in un incubatore umidificato a 37 °C con un'alimentazione di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le cellule congelate vengono conservate a una temperatura inferiore a -150 °C in un congelatore elettrico a bassissima temperatura o nella fase vapore dell'azoto liquido per mantenere la vitalità cellulare.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Le cellule B16-F10 vengono congelate in terreni di coltura CM-1 o CM-ACF per la conservazione. A tal fine, si raccomanda un processo di congelamento lento che consenta una diminuzione della temperatura di solo 1 °C al minuto, per evitare qualsiasi shock alle cellule.
Processo di scongelamento:
Le cellule B16-F10 congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua preimpostato a 37 °C per 40-60 secondi. Successivamente, le cellule vengono aggiunte a un terreno fresco e centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Le cellule raccolte vengono risospese in un terreno di crescita e versate in fiasche per la coltura.
Livello di biosicurezza:
Per la manipolazione e la conservazione della linea cellulare B16-F10 è necessario un laboratorio di biosicurezza di livello 1.
Cellule B16-F10: vantaggi e svantaggi
Come altre linee cellulari, anche la B16-F10 presenta alcuni vantaggi e svantaggi. In questa sezione vengono discussi alcuni pro e contro significativi di questa linea cellulare di melanoma cutaneo.
Vantaggi
La linea cellulare B16-F10 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro. I vantaggi delle cellule B16-F10 sono:
Potenziale metastatico
Le cellule B16F10 del melanoma cutaneo presentano un elevato potenziale metastatico, il che le rende preziose per lo studio delle metastasi tumorali e dei meccanismi sottostanti.
Modello tumorale in vitro
Le cellule B16-F10 fungono da modello in vitro per lo studio della progressione e della crescita del cancro, aiutando i ricercatori a comprendere i meccanismi cellulari e molecolari che ne sono alla base.
Svantaggi
Gli svantaggi associati alla linea cellulare B16-F10 sono:
Linea cellulare derivata dal topo
La B16-F10 è una linea cellulare derivata dal topo, il che ne limita l'applicabilità agli studi specifici sull'uomo. I risultati delle ricerche condotte su queste cellule potrebbero non essere sempre realmente trasferibili alla biologia umana.
Applicazioni di ricerca delle cellule B16-F10
La linea cellulare B16-F10 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro. Di seguito vengono discusse alcune applicazioni promettenti di questa linea cellulare.
- Ricerca sul cancro: la linea cellulare B16-F10 è un modello prezioso per lo studio dei processi delle cellule tumorali, tra cui proliferazione, invasione, migrazione e morte cellulare o apoptosi. Inoltre, aiuta i ricercatori ad acquisire conoscenze sui meccanismi molecolari e sui percorsi che guidano questi processi cellulari. Uno studio condotto nel 2018 ha esplorato il ruolo del CCR5 (recettore delle chemochine C-C di tipo cinque) nella transizione epiteliale-mesenchimale e nelle metastasi delle cellule di melanoma. I risultati hanno rivelato che la carenza di CCR5 limita la crescita tumorale e le metastasi, mentre un'elevata espressione porta a una maggiore crescita e metastasi delle cellule B16-F10. Ulteriori ricerche hanno riportato che il CCR5 regola l'espressione del TGFβ1, il quale a sua volta regola la via di segnalazione PI3K/AKT/GSK3β per promuovere la transizione epiteliale-mesenchimale e la migrazione cellulare [4].
- Test e sviluppo di farmaci: le cellule tumorali del melanoma B16F10 sono altamente aggressive e quindi adatte per testare potenziali farmaci e trattamenti antitumorali. I ricercatori utilizzano queste cellule e valutano l'effetto di diversi composti sulla crescita cellulare, la proliferazione e le metastasi, contribuendo allo sviluppo di farmaci. Uno studio condotto nel 2018 da Valentina Nanni e colleghi ha indagato gli effetti terapeutici dell'estratto idroalcolico dei fiori di Spartium junceum. Lo studio ha suggerito che l'estratto di fiori fosse efficace nell'indurre la senescenza nelle cellule B16-F10, il che porta alla soppressione della crescita cellulare e della melanogenesi; pertanto, può esercitare potenziali attività antitumorali [5].
5. Pubblicazioni relative alla linea cellulare B16-F10
Di seguito sono riportate alcune importanti pubblicazioni di ricerca che trattano la linea cellulare di melanoma B16-F10:
Questo studio è stato pubblicato su Nutrients (2020). Esso ha suggerito che l'estratto etanolico di Sorghum bicolor abbia un effetto anti-melanogenico nelle cellule di melanoma cutaneo B16F10.
Il calcitriolo inibisce la proliferazione e induce potenzialmente l'apoptosi nelle cellule B16–F10
La ricerca pubblicata su Medical Science Monitor Basic Research (2022) ha suggerito che il farmaco calcitriolo eserciti effetti antitumorali nelle cellule di melanoma B16-F10 inibendo la proliferazione e inducendo l'apoptosi.
Questo articolo è stato pubblicato su Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). I risultati hanno rivelato che i cardoli, lipidi resorcinolici, esercitano un'intensa citotossicità sulla linea cellulare B16-F10.
Lo studio pubblicato su Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) ha esplorato il potenziale antimetastatico dell'estratto di esocarpo di Ginkgo biloba utilizzando cellule B16-F10.
Questa ricerca pubblicata su World Neurosurgery (2018) ha suggerito che il timochinone possa essere una terapia efficace contro le lesioni metastatiche intracerebrali, poiché sopprime la crescita delle cellule B16-F10 e induce l'apoptosi.
Risorse per la linea cellulare B16-F10: protocolli, video e altro
Le cellule endoteliali B16F10 sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro della pelle. Ecco alcune risorse online che spiegano i protocolli di coltura e trasfezione:
- Trasfezione delle cellule di melanoma B16F10: questo video tutorial può aiutarti a imparare il protocollo di trasfezione per le cellule B16-F10.
- Trasfezione delle cellule B16-F10: questo documento illustra il protocollo di trasfezione del DNA in vitro per le cellule B16F10 del melanoma cutaneo.
Il seguente link contiene il protocollo di coltura cellulare per le cellule B16-F10:
- Subcoltura di B16-F10: questo sito web contiene informazioni utili sulle cellule tumorali del melanoma B16F10. Include terreni di coltura, tempo di raddoppio, condizioni di coltura e protocollo per la subcoltura delle cellule, nonché la gestione delle colture crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Poste, G., et al., Confronto delle proprietà metastatiche dei cloni di melanoma B16 isolati da linee cellulari coltivate, tumori sottocutanei e singole metastasi polmonari. Cancer Research, 1982. 42(7): pagg. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono e S. Sugita, Meccanofenotipizzazione delle varianti cellulari del melanoma B16 per la valutazione dell'efficacia del trattamento con (-)-epigallocatechina gallato utilizzando un dispositivo microfluidico affusolato. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Comportamento di quattro diverse sottolinee di cellule di melanoma murino B16: pelle C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): pp. 73-80.
- Liu, J., et al., L'elevata espressione di CCR5 nel melanoma potenzia la transizione epiteliale-mesenchimale e le metastasi tramite TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., L'estratto idroalcolico dei fiori di Spartium junceum L. inibisce la crescita e la melanogenesi nelle cellule B16-F10 inducendo la senescenza. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.