Cellule A431 - Analisi approfondita delle cellule di carcinoma epidermoide nella ricerca dermatologica
A431 è una linea cellulare di carcinoma epidermoide umano. È ampiamente utilizzata nel campo della ricerca biomedica, soprattutto negli studi di biologia del cancro, immuno-oncologia e tossicologia. Inoltre, le cellule A431 sovraesprimono l'EGFR (recettore del fattore di crescita epidermico) e sono quindi utilizzate come modello in vitro per studiare il ciclo cellulare e le vie di segnalazione cellulare associate al cancro.
Questo articolo spiega le basi della linea cellulare A431. Imparerete quanto segue:
- Cellule A431: Caratteristiche generali e origine
- Linea cellulare A431: Informazioni sulla coltura
- Vantaggi e svantaggi della linea cellulare A431
- Applicazioni di ricerca delle cellule A431
- Pubblicazioni di ricerca sulle cellule A431
- Risorse per la linea cellulare A431: Protocolli, video e altro
1. Cellule A431: Caratteristiche generali e origine
Questa sezione dell'articolo vi aiuterà a conoscere le informazioni generali sulla linea cellulare A431 che dovete sapere prima di lavorare con essa. Ad esempio, qual è l'origine della linea cellulare A431? Quali sono le caratteristiche della linea cellulare A431? Qual è la morfologia delle cellule A431? Da dove provengono le cellule A431?
- A431, una linea cellulare umana di cancro della pelle, è stata ottenuta dall'epidermide di una donna di 85 anni affetta da carcinoma epidermoide [1]. È stata creata da D.J. Giard, et al. che hanno sviluppato molte altre linee cellulari da tumori solidi.
- Le cellule A-431 possiedono una morfologia epiteliale. Si aggregano e formano ammassi di cellule.
- La linea cellulare di cancro della pelle a431 è ipertriploide. Il numero modale di cromosomi per questa linea cellulare è 74, presente in circa il 36% delle cellule. Esistono anche ploidie superiori in circa l'1% di una popolazione cellulare.
2.linea cellulare A431: Informazioni sulla coltura
Conoscere i requisiti e le procedure di coltura di una linea cellulare può renderne agevole la gestione. Questa parte dell'articolo vi aiuterà a conoscere i punti chiave per la coltura della linea cellulare A431. Ad esempio, saprete: qual è il tempo di raddoppiamento delle cellule A431? La linea cellulare A431 è aderente? Quale terreno di coltura si utilizza per l'A431?
Punti chiave per la coltura delle cellule A431
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Tempo di raddoppiamento: |
Il tempo di raddoppiamento della popolazione delle cellule A431 varia da 80 a 100 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
A431 è una linea cellulare aderente. |
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Densità di semina: |
la densità di 1 x104 cellule/cm2 è ideale per la linea cellulare A431. A questa densità le cellule impiegano quasi 4 giorni per diventare confluenti. Le cellule aderenti vengono lavate con PBS (1x) e incubate con la soluzione passante Accutase. Successivamente, le cellule sono state risospese in un terreno di coltura e centrifugate. Le cellule raccolte sono state nuovamente risospese e distribuite in nuove fiasche per la crescita. |
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Terreno di crescita: |
Per la coltura della linea cellulare A431 si utilizza un terreno DMEM integrato con 10% di siero fetale bovino, 4,5 g/L di glucosio, 1,0 mM di piruvato di sodio, 1,5 g/L di NaHCO3 e 4 mM di L-Glutammina. Il terreno di coltura deve essere sostituito ogni 2 o 3 giorni alla settimana. |
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Condizioni di crescita: |
Le cellule tumorali A431 sono coltivate in un incubatore umidificato dotato di una fonte di CO2 al 5% alla temperatura di 37°C. |
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Conservazione: |
La linea cellulare può essere conservata in un congelatore elettrico o in una fase vapore di azoto liquido a una temperatura inferiore a -150°C, in quanto contribuisce a proteggere la vitalità delle cellule. |
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Processo e terreno di congelamento: |
CM-1 o CM-ACF sono i due terreni di congelamento altamente raccomandati per le cellule A431. Le cellule vengono congelate utilizzando un metodo di congelamento lento che consente alla temperatura di scendere di solo 1 grado al minuto. |
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Processo di scongelamento: |
Le cellule A431 congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua a 37°C contenente un agente antimicrobico per 40-60 secondi. Quando rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio, le cellule vengono aggiunte al terreno di coltura e centrifugate. Le cellule raccolte vengono risospese e versate in fiasche di coltura per la crescita. |
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Livello di sicurezza biologica: |
Per la manipolazione e il mantenimento delle colture di A431 si raccomanda il livello di biosicurezza uno. |
3.vantaggi e svantaggi della linea cellulare A431
La linea cellulare A431 possiede caratteristiche distinguibili e offre diversi vantaggi e svantaggi. Di seguito ne abbiamo riassunti alcuni.
Vantaggi
I principali vantaggi della linea cellulare A431 sono:
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Sovraespressione di EGFR |
Le cellule A431 sovraesprimono il recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR). Servono come controllo positivo per studiare la segnalazione dell'EGFR e le sue implicazioni nel cancro. Vengono inoltre utilizzate per valutare nuove terapie antitumorali. |
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Tumorigenicità |
Le cellule A431 sono tumorigeniche e hanno la capacità di formare tumori. Possono essere utilizzate per sviluppare modelli tumorali xenotrapiantati, che sono strumenti preziosi per lo studio delle dinamiche di crescita del tumore e per la valutazione di nuovi trattamenti antitumorali. |
Svantaggi
Gli svantaggi delle cellule A431 sono
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Anomalie genetiche |
A431 è una linea cellulare tumorale che presenta mutazioni e alterazioni genetiche che possono differenziarla dalle caratteristiche del tumore originale. |
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Contaminazione microbica |
A431 è soggetta a contaminazione microbica, soprattutto batterica. Tuttavia, il mantenimento di condizioni di coltura asettiche standard può aiutare a prevenire tale contaminazione nelle colture di cellule A431. |
