Linea cellulare A375 - Guida alla ricerca sul melanoma
A375 è una linea cellulare di melanoma umano ampiamente utilizzata nella ricerca tossicologica e immuno-oncologica. I ricercatori utilizzano questa linea cellulare per studiare la biologia del cancro e le vie di segnalazione, testare o selezionare potenziali agenti antitumorali e sviluppare terapie nuove ed efficaci.
- Terreno di coltura
- Vedi la pagina del prodotto
- Tempo di raddoppio
- Vedi la pagina del prodotto
- Tipo di crescita
- Adesivo
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina A375
- Origine e caratteristiche generali delle cellule A375
- Cellule A375: Informazioni sulla coltura cellulare
- Vantaggi e limiti della linea cellulare A375
- Acquista subito le tue cellule A375
- Applicazioni di ricerca della linea cellulare A375
- Cellule A375: Pubblicazioni
- Risorse per la linea cellulare A375: protocolli, video e altro
- Domande frequenti (FAQ) sulle cellule A375
- Riferimenti
- Domande frequenti
Origine e caratteristiche generali delle cellule A375
Conoscere l'origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare può aiutarti a pianificarne l'uso nella ricerca. Questa sezione dell'articolo tratterà l'origine e le caratteristiche della linea cellulare A375. Ad esempio, cos'è la linea cellulare A375? Quali sono le caratteristiche della linea cellulare A375? Da dove provengono le cellule A375? Qual è la morfologia delle cellule di melanoma A375? Qual è la dimensione delle cellule A375?
- La linea cellulare di cancro della pelle A375 ha avuto origine dalla coltura di espianto di un tumore solido di una donna di 54 anni affetta da melanoma maligno [1].
- Le cellule A375 hanno una morfologia di tipo epiteliale.
- La dimensione delle cellule A375 è relativamente più piccola rispetto ad altre linee cellulari. Hanno un diametro di circa 12 µm.
- Le cellule del melanoma A375 sono ipotriploidi. Il numero modale di cromosomi per questa linea cellulare è 62. Di solito, ogni cellula ha nove cromosomi marcatori e una copia dei cromosomi normali N2, N6 e N22.
Cellule A375: Informazioni sulla coltura cellulare
Le colture cellulari A375 sono facili da mantenere. Non presentano requisiti particolari per la coltura cellulare. Questa sezione ti aiuterà ad apprendere le informazioni necessarie sulla coltura cellulare. Ad esempio, qual è il tempo di raddoppio delle cellule A375? Qual è il terreno di coltura della linea cellulare A375? Qual è la densità di semina delle cellule A375? Le cellule di melanoma A375 sono aderenti?
Punti chiave per la coltura delle cellule A375
Tempo di raddoppio della popolazione:
Il tempo di raddoppio delle cellule A375 è di 20 ore.
Aderenzi o in sospensione:
L'A375 è una linea cellulare di melanoma umano aderente.
Densità di semina:
Una densità cellulare di 1 x 104 cellule/cm2 è ideale per le colture cellulari A375. Le cellule aderenti vengono risciacquate con tampone fosfato salino (PBS) 1x e incubate con soluzione di passaggio (Accutase). Successivamente, alle cellule vengono aggiunti terreni di coltura e vengono centrifugate. Le cellule raccolte vengono risospese in un terreno di coltura e trasferite in nuove fiasche per la crescita.
Terreno di crescita:
Il DMEM è raccomandato come terreno di coltura ideale per le cellule A375 se integrato con siero fetale bovino (FBS) al 10%, 4,5 g/L di glucosio, 1,5 g/L di NaHCO3, 4 mM di L-glutammina e 1,0 mM di piruvato di sodio. Il terreno di coltura per le cellule A375 deve essere rinnovato 2-3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le cellule di melanoma A375 vengono coltivate in un incubatore umidificato (37 °C) con un'alimentazione di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le cellule A375 congelate devono essere conservate a una temperatura inferiore a -150 °C nella fase vapore dell'azoto liquido o in un congelatore elettrico.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Per congelare la linea cellulare A375 si utilizzano i terreni di coltura CM-1 o CM-ACF. Per proteggere la vitalità delle cellule si è optato per un processo di congelamento lento che consente una graduale diminuzione della temperatura di 1 °C.
Processo di scongelamento:
La fiala contenente le cellule di melanoma A375 congelate viene agitata rapidamente in un bagno d'acqua per 40-60 secondi fino a quando rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio. Alle cellule vengono aggiunti terreni di coltura freschi e vengono centrifugate per rimuovere gli elementi del terreno di congelamento. Il pellet cellulare ottenuto viene nuovamente risospeso e versato in nuove fiasche.
Livello di biosicurezza:
Le colture A375 vengono manipolate e mantenute in laboratori con livello di biosicurezza 1.
Vantaggi e limiti della linea cellulare A375
Come altre linee cellulari, la linea cellulare di melanoma A375 presenta una combinazione unica di vantaggi e limiti, che la rendono uno strumento prezioso per la ricerca sul melanoma. Questa sezione elenca solo alcuni dei principali pro e contro della linea cellulare A375.
Vantaggi
I vantaggi significativi delle cellule A375 sono riportati di seguito:
- Modello tumorale del melanoma: la linea cellulare A375 deriva da un tumore maligno di melanoma, fungendo quindi da prezioso modello tumorale per lo studio della biologia del melanoma e degli interventi terapeutici. Queste cellule presentano proprietà simili al melanoma, quali un elevato tasso di proliferazione e invasività.
- Tumorigenicità: le cellule A375 sono altamente tumorigeniche, il che significa che possono formare tumori. È stato riportato che le cellule A375 producono melanomi amelanotici aggressivi nei topi NIH Swiss trattati con siero anti-timocita (un agente immunosoppressivo).
- Ben caratterizzata: A375 è una linea cellulare geneticamente ben caratterizzata. Possiede mutazioni genetiche specifiche come il melanoma. Le mutazioni di A375 includono l'alterazione del gene BRAF, che la rende sensibile agli inibitori specifici del BRAF. Questo profilo genetico rende quindi le cellule A375 un ottimo strumento di ricerca sul cancro per studiare i percorsi molecolari sottostanti e le terapie mirate.
Limiti
I limiti associati alle cellule A375 sono:
- Limiti in vitro: A375 è un modello tumorale in vitro. Sebbene imiti le caratteristiche del melanoma, non può rappresentare appieno la complessità dei tumori del melanoma. Pertanto, è necessario prestare attenzione quando i risultati in vitro vengono generalizzati agli studi clinici.
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Applicazioni di ricerca della linea cellulare A375
La linea cellulare A375 ha ampie applicazioni nella ricerca sul cancro. Ecco alcune delle aree più comuni in cui vengono utilizzate le cellule A375.
- Ricerca sul cancro: le cellule A375 hanno applicazioni molto diffuse nella ricerca sul melanoma. I ricercatori hanno utilizzato queste cellule per studiare la biologia del cancro della pelle, i processi e i meccanismi di segnalazione cellulare sottostanti, tra cui la proliferazione, la migrazione e l'invasione cellulare. Ciò potrebbe anche aiutare i ricercatori a identificare nuovi bersagli terapeutici molecolari. Uno studio condotto da Lin Zhu e colleghi nel 2019 ha utilizzato cellule di melanoma A375 altamente aggressive e ha individuato il ruolo del microRNA-3662 nella crescita e nell'invasione delle cellule di melanoma A375. I risultati dello studio indicano che il microRNA-3662 agisce sul gene ZEB1 e regola la crescita delle cellule di melanoma in vitro e in vivo nel modello tumorale A375 [2]. Allo stesso modo, una ricerca condotta nel 2018 ha scoperto che le vie PI3K/AKT e MAPK/ERK sono coinvolte nella proliferazione e nella metastasi della linea cellulare A375 [3].
- Ricerca e sperimentazione farmacologica: la linea cellulare A375 è un utile modello tumorale in vitro per testare e selezionare potenziali agenti antitumorali. I ricercatori valutano la tossicità e l'efficacia di nuovi farmaci chemioterapici, composti e altre terapie utilizzando queste cellule di melanoma A375. Ad esempio, uno studio ha esplorato le proprietà antitumorali delle micro e nanovesicole derivate dal pompelmo sulle cellule tumorali del melanoma umano A375. I risultati hanno rivelato che le micro e nanovesicole inducono l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi e ostacolano l'espressione genica nella proliferazione, migrazione e invasione cellulare [4].
Cellule A375: Pubblicazioni
Di seguito sono riportate alcune pubblicazioni di ricerca significative che trattano delle cellule A375.
Questo studio è stato pubblicato sul Journal of Oncology nel 2019. Lo studio ha suggerito che il trattamento combinato con vitamina D e analoghi migliora l'attività antitumorale del cisplatino e della dacarbazina nelle cellule di melanoma A375.
Questa ricerca è stata pubblicata sul Journal of Herbal Medicine nel 2022. Lo studio ha esaminato gli effetti anti-melanoma del gel di aloe vera nelle cellule di melanoma A375.
Questo studio pubblicato su Oncogene (2021) ha ipotizzato che il membro 2 della famiglia Fermitin (FERMT2 o kindlin-2) favorisca la progressione del melanoma attivando la MAPK attraverso il legame con p-α-Pix e Rac1.
Questo studio pubblicato su The American Journal of Dermatopathology (2019) ha ipotizzato che FARP1 possa facilitare lo sviluppo e la progressione del melanoma cutaneo. Pertanto, può rappresentare un utile bersaglio terapeutico.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato su Bioengineered (2019). Lo studio ha esaminato l'attività citotossica e apoptotica di un estratto della pianta Phyllodium elegans su linee cellulari di carcinoma umano, tra cui la A375.
Risorse per la linea cellulare A375: protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse online relative alle cellule A375.
- Trasfezione delle cellule A375: questo video tutorial vi aiuterà a imparare passo dopo passo la trasfezione delle cellule A375.
- Coltura cellulare: questo video contiene informazioni molto utili sulla coltura delle linee cellulari.
I protocolli di coltura cellulare per le cellule A375 sono elencati qui.
- Linea cellulare A375: questo link contiene informazioni utili sulla coltura e il mantenimento della linea cellulare A375, compresi i terreni di coltura A375 e la gestione delle colture A375 congelate e in proliferazione.
Domande frequenti (FAQ) per le cellule A375
Riferimenti
- Avram, S., et al., Standardizzazione dei modelli di melanoma umano A375 su membrana corioallantoica di embrione di pollo e topi nudi Balb/c. Oncol Rep, 2017. 38(1): pagg. 89-99.
- Zhu, L., et al., Il microRNA-3662 agisce su ZEB1 e attenua l'invasività della linea cellulare di melanoma altamente aggressiva A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., L'oxyfadichalcone C inibisce la proliferazione e la metastasi delle cellule del melanoma A375 attraverso la soppressione delle vie PI3K/Akt e MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al., Le micro e nanovesicole derivate dal pompelmo mostrano profili metabolomici distinti e attività antitumorali nella linea cellulare di melanoma umano A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.