Linea cellulare KG-1
Le celluleKG-1 costituiscono una linea cellulare leucemica di derivazione umana ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. Offrono diverse applicazioni nella ricerca immunologica, oncologica e tossicologica. I ricercatori impiegano queste cellule per studiare i meccanismi delle malattie e testare potenziali terapie. Questo articolo fornirà informazioni complete sulla linea cellulare KG-1 che potranno aiutarvi nel vostro lavoro. In particolare, verranno trattati i seguenti argomenti:
- Caratteristiche generali e origine della linea cellulare KG-1
- Informazioni sulla coltura della linea cellulare KG-1
- Linea cellulare KG-1: Vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule KG-1 nella ricerca
- Pubblicazioni sulle cellule KG-1
- Risorse per la linea cellulare KG-1: Protocolli, video e altro
1. Caratteristiche generali e origine della linea cellulare KG-1
L'origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare aiutano il ricercatore a deciderne l'utilizzo nel proprio lavoro. È possibile indagare su queste informazioni prima di iniziare a lavorare su di essa. Questa sezione dell'articolo tratta dell'origine e delle caratteristiche dei macrofagi KG-1. Qui imparerete a conoscere: Cosa sono le cellule KG-1? Che cos'è la linea cellulare KG-1a? Qual è l'origine della linea cellulare KG-1? Qual è la morfologia delle cellule KG-1?
- KG-1 è una linea cellulare linfoblastica derivata dall'aspirato midollare di un uomo caucasico (59 anni) affetto da leucemia mieloide acuta. È stata creata da Koeffler e Golde nel 1978. Queste cellule si trovano principalmente allo stadio di maturazione di promielociti o mieloblasti [1].
- Le cellule KG-1 possiedono una morfologia simile a quella dei linfoblasti.
- Il cariotipo della linea cellulare KG-1 presenta un numero modale di cromosomi pseudodiploidi.
KG-1 e KG-1a
KG-1a è una sottoclasse delle cellule KG-1 parentali. È stata sviluppata dopo 35 passaggi della linea cellulare KG1. È meno differenziata rispetto alla linea cellulare KG-1. Inoltre, questa sublinea è citochimicamente, morfologicamente e funzionalmente meno matura rispetto alla linea cellulare parentale (KG-1).
2. Informazioni sulla coltura della linea cellulare KG-1
Questa sezione dell'articolo contiene tutte le informazioni essenziali sulla coltura delle cellule KG-1 che possono facilitare il vostro lavoro. Qui imparerete a conoscere: Qual è il tempo di raddoppio della linea cellulare KG-1? Quali sono le condizioni di coltura dei macrofagi KG-1? Come si coltivano le cellule KG-1?
Punti chiave per la coltura delle cellule KG-1
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Tempo di raddoppio: |
Il tempo di raddoppiamento delle cellule KG-1 è di circa 45 ore. Tuttavia, può variare a seconda delle condizioni di coltura. |
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Aderenti o in sospensione: |
Le cellule KG-1 crescono in sospensione. |
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Densità cellulare: |
La densità cellulare ottimale per la linea cellulare KG1 va da 1 a 3 x105 cellule/ml. Per la subcoltura, la sospensione cellulare viene trasferita in una provetta sterile e centrifugata. Le cellule raccolte vengono quindi aggiunte di terreno fresco e risospese con cura. Successivamente, le cellule vengono dispensate in nuove fiasche e coltivate a una densità cellulare ottimale. Le cellule possono essere suddivise quando raggiungono una densità cellulare massima di 1 - 2 x106 cellule/ml. |
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Terreno di crescita: |
Per la coltura delle cellule KG-1 si utilizza IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) contenente 10% FBS, 4,5 g/L di glucosio, 4 mM di L-Glutamina, 1,0 mM di piruvato di sodio e 3,0 g/L di NaHCO3. Il terreno deve essere sostituito dopo tre giorni. |
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Condizioni di crescita: |
La linea cellulare KG1 AML viene coltivata in un incubatore umidificato a 37°C e con un apporto di CO2 del 5%. |
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Conservazione: |
Le cellule congelate sono conservate nella fase vapore dell'azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150 °C in un congelatore elettrico a bassissima temperatura per proteggere la vitalità delle cellule. |
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Processo e terreno di congelamento: |
CM-1 o CM-ACF sono adatti per il congelamento delle cellule KG-1. Le cellule vengono congelate con un processo di congelamento lento per proteggere le cellule da eventuali shock. Questo metodo consente un calo graduale della temperatura di 1 °C al minuto. |
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Processo di scongelamento: |
Le cellule vengono scongelate in un bagno d'acqua preriscaldato a 37 °C finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Le cellule scongelate vengono aggiunte al terreno fresco e centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Il pellet cellulare viene accuratamente risospeso e versato in nuove fiasche contenenti il terreno di crescita. |
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Livello di biosicurezza: |
Il laboratorio di livello di biosicurezza 1 è essenziale per il mantenimento delle colture cellulari KG-1. |
3. Linea cellulare KG-1: Vantaggi e limiti
Come altre linee cellulari, anche quella della leucemia mieloide KG-1 presenta numerosi vantaggi e limiti. In questa sezione ne illustreremo alcuni che possono essere determinanti per decidere il suo utilizzo nella vostra ricerca.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule KG-1 sono
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Facilità di coltura
Le cellule KG-1 sono facilmente coltivabili nei laboratori di ricerca e vantano requisiti di coltura cellulare non complicati. La facilità di manutenzione e le condizioni di crescita consentono l'accesso a un ampio spettro di ricercatori con strutture di coltura cellulare di base.
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Modello di leucemia mieloide acuta (AML)
Derivata da un paziente maschio affetto da leucemia mieloide acuta (AML), la linea cellulare KG-1 AML è uno strumento prezioso per studiare la biologia dell'AML e condurre ricerche su potenziali terapie, offrendo approfondimenti sui meccanismi alla base di questa malattia e sulle strategie di trattamento.
limitazioni
Le limitazioni associate alla linea cellulare KG1 sono:
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Modello in vitro
Le cellule KG-1 sono un valido modello in vitro per la ricerca sulla LAM; tuttavia, è importante notare che potrebbero non replicare completamente la complessità della malattia in vivo, fungendo da modello cellulare semplificato che potrebbe non comprendere tutti gli aspetti della biologia della LAM.
4. Applicazioni delle cellule KG-1 nella ricerca
Le cellule KG-1 offrono diverse applicazioni promettenti nella ricerca biomedica. Alcune delle importanti ricerche che utilizzano i macrofagi KG1 includono:
- Ricerca sul cancro: Le cellule KG-1 sono state derivate da un paziente affetto da leucemia mieloide acuta e sono quindi considerate un valido strumento di ricerca per studiare la biologia della LAM. I ricercatori utilizzano queste cellule per studiare i meccanismi cellulari e molecolari che guidano lo sviluppo, la crescita e la resistenza ai farmaci della LAM. Ciò comporta anche l'identificazione e la scoperta di nuovi biomarcatori, mutazioni genetiche e vie di segnalazione associate alla LAM. Ad esempio, uno studio condotto nel 2019 ha analizzato che l'RNA lungo non codificante linc00239 facilita la resistenza alla doxorubicina e il comportamento maligno nelle cellule di leucemia mieloide acuta KG-1. Un ulteriore studio ha rivelato che il lncRNA attiva la segnalazione PI3K/Akt/mTOR per esercitare questi effetti nelle cellule AML [2].
- Tossicologia: La linea cellulare KG1 è ampiamente utilizzata nella ricerca tossicologica. I ricercatori testano la tossicità e l'efficacia di potenziali agenti terapeutici, tra cui farmaci chemioterapici e terapie mirate sulle cellule di leucemia mieloide KG1, per identificare candidati farmaci promettenti per future valutazioni precliniche e cliniche. La ricerca condotta nel 2018 ha analizzato la tossicità dei nano-niosomi contenenti doxorubicina sulla linea cellulare KG1 AML. Lo studio ha proposto che il nano-niosoma è un vettore adatto per la somministrazione di farmaci in quanto aumenta l'efficacia del trattamento [3]. In un'altra indagine, i ricercatori hanno esplorato gli effetti terapeutici del tè all'ortica preparato dalle foglie della pianta Urtica dioica. Lo studio ha rivelato che questo estratto acquoso di foglie della pianta esercita effetti antitumorali sulle cellule di leucemia mieloide acuta KG-1 e U937 [4].
5. Pubblicazioni sulle cellule KG-1
In questa sezione dell'articolo sono riportate alcune interessanti pubblicazioni di ricerca sulle cellule KG-1.
Questo articolo è stato pubblicato sul Journal of Cellular Physiology (2019). Lo studio propone che il composto quercetina sensibilizzi la linea cellulare KG1 AML contro il ligando di induzione dell'apoptosi legato al TNF (TRAIL) e possa aumentare l'effetto della citotossicità indotta da TRAIL nelle cellule.
Questo articolo del Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) propone che la downregulation del fattore di trascrizione krüppel-like 8 sopprima la proliferazione e la glicolisi delle cellule di AML, favorendo l'apoptosi attraverso la regolazione della via di segnalazione AKT/mTOR.
Questo studio pubblicato su Cell Journal (Yakhteh) (2020) ha esplorato i potenziali effetti del triossido di arsenico e del sorafenib sulle cellule U937 e KG-1.
Questo studio pubblicato su Medical Oncology (2020) ha valutato l'OXPHOS e la glicolisi come bersagli terapeutici nella linea cellulare KG-1 della LMA.
In questa pubblicazione Drug Design, Development, and Therapy, 2020 è stato proposto che i composti di curcumina e talidomide esercitano sinergicamente effetti apoptotici nelle cellule KG-1 attraverso la riduzione dell'espressione di STAT3 e Bcl-xL.
6. Risorse per la linea cellulare KG-1: Protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse online disponibili sulle cellule KG-1.
- Subcoltura di cellule in sospensione: Questo video descrive il protocollo per la subcoltura di colture cellulari in sospensione come la KG-1.
Il seguente link contiene il protocollo di coltura delle cellule KG-1:
- Linea cellulare KG-1: Questo sito web contiene informazioni di base sulla coltura cellulare KG-1. Include informazioni sui terreni della linea cellulare e sui protocolli per la subcoltura e la manipolazione delle colture crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Pelliccia, F., V. Ubertini e N. Bosco, L'importanza dell'analisi citogenetica molecolare prima dell'utilizzo di linee cellulari nella ricerca: Il caso della linea cellulare leucemica KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., L'RNA lungo noncodificantelinc00239 promuove i comportamenti maligni e la chemioresistenza alla doxorubicina in parte attraverso l'attivazione della via PI3K/Akt/mTOR nelle cellule di leucemia mieloide acuta. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Preparazione e studio di nano-niosomi contenenti doxorubicina e valutazione della sua tossicità sulla linea cellulare di leucemia mieloide acuta KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Il tè all'ortica inibisce la crescita delle cellule di leucemia mieloide acuta in vitro promuovendo l'apoptosi. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.