Tovább a honlapra
Bevásárlókosár 0,00 EUR*
Minden kategória megjelenítése SK-MEL sejtek az immunterápiás válasz előrejelzésében Vissza

SK-MEL sejtek az immunterápiás válasz előrejelzésében

Az immunterápia forradalma átalakította a melanoma kezelését, az ellenőrzőpont-gátlókkal a betegek jelentős részhalmazában tartós választ lehet elérni. A Cytionnál felismertük, hogy továbbra is kritikus kihívás annak előrejelzése, hogy mely betegek fognak reagálni az immunterápiára, amihez olyan robusztus preklinikai modellekre van szükség, amelyek reprodukálják a tumor-immun kölcsönhatásokat. Az SK-MEL melanoma sejtvonalak alapvető platformot biztosítanak az immunterápiás válasz molekuláris meghatározóinak tanulmányozásához és olyan biomarkerek azonosításához, amelyek irányt mutathatnak a betegek kiválasztásában ezekre az átalakító kezelésekre.

A legfontosabb tudnivalók

  • Az SK-MEL vonalak változó PD-L1 expressziót mutatnak, ami befolyásolja az ellenőrzőpont-inhibitorokra adott választ
  • A tumor mutációs terhe és a neoantigén prezentáció korrelál az immunogenitással
  • Az immunsejtekkel együtt tenyésztett rendszerek lehetővé teszik a daganatellenes immunitás funkcionális értékelését
  • Az interferon-gamma jelátviteli útvonal integritása előrejelzi az immunterápiás érzékenységet
  • Az ellenállási mechanizmusok, beleértve az antigénprezentációs hibákat is, in vitro modellezhetők
SK-MEL sejtek az immunterápiás kutatásban SK-MEL panel SK-MEL-1: BRAF WT SK-MEL-2: NRAS mut SK-MEL-5: BRAF V600E SK-MEL-28: BRAF V600E SK-MEL-29.1: Rezisztens Változó PD-L1/HLA Immun-ellenőrzési pont tengely SK-MEL PD-L1+ T sejt PD-1+ Gátló jel → Anti-PD-1 által blokkolt Válasz biomarkerek - PD-L1 expressziós szint - Tumor mutációs teher - Neoantigén terhelés - HLA I. osztályú expresszió - IFN-γ útvonal státusza - β2-mikroglobulin épségben Immunterápiás rezisztencia mechanizmusok HLA elvesztése/leépülése β2M mutációk JAK1/2 mutációk IFN-γ érzéketlenség Ko-kultúrás vizsgálati rendszerek - SK-MEL + PBMC ko-kultúrák - Tumor-reaktív T-sejtek pusztítása - IFN-γ/Granzim B felszabadulás - Valós idejű citotoxicitás (xCELLigence) Kombinációs stratégiák - Anti-PD-1 + Anti-CTLA-4 - Checkpoint + BRAF/MEK-gátló - ICI + onkolitikus vírus - ICI + sugárterápia © Cytion - A melanoma immunterápiás kutatások lehetővé tétele

Az SK-MEL melanoma sejtvonal panel

Az SK-MEL sorozat több, különböző betegektől és metasztatikus helyekről származó melanoma-sejtvonalat foglal magában, így változatos panelt biztosít az immunterápiás válasz heterogenitásának tanulmányozásához. Ezek a vonalak különböznek egymástól a driver mutációk, az immunmarkerek expressziója, valamint a célzott és immunalapú terápiákra való érzékenységük tekintetében.

SK-MEL-28 sejtjeink (300337 ) a melanomák mintegy 50%-ában megtalálható BRAF V600E mutációt hordozzák. Ez a vonal mérsékelt PD-L1-szintet expresszál, és széles körben használták a BRAF-célzott terápia és az immunterápia közötti kölcsönhatás tanulmányozására.

Az SK-MEL-5 sejtek (300157 ) hasonlóan BRAF V600E-t hordoznak, de eltérő immunológiai tulajdonságokkal rendelkeznek, ami lehetővé teszi annak összehasonlító vizsgálatát, hogy a genetikai háttér hogyan befolyásolja az immunfelismerést. Az SK-MEL-1 sejtek (300424) és az SK-MEL-2 sejtek (300423 ) BRAF vad típusú melanomákat képviselnek, eltérő NRAS státusszal.

A szélesebb körű melanoma-kutatáshoz az A375-sejtjeink (300110 ) egy további BRAF-mutáns modellt biztosítanak jól jellemzett immunológiai tulajdonságokkal.

PD-L1-expresszió és ellenőrzőpont-blokád-válasz

A programozott halál-ligand 1 (PD-L1) expressziója a tumorsejteken a checkpoint-inhibitorokra adott válasz kulcsfontosságú biomarkereként szolgál, bár előrejelző értéke nem tökéletes. Az SK-MEL vonalak változó konstitutív PD-L1-expressziót mutatnak, amely interferon-gamma hatására tovább indukálható, ami utánozza a betegek daganataiban megfigyelt adaptív immunrezisztencia-mechanizmust.

A felszíni PD-L1 áramlási citometriás számszerűsítése lehetővé teszi az expressziós szintek jellemzését az egyes SK-MEL-vonalakban. A konstitutív expresszió az alacsony és a mérsékelt között változik, az IFN-γ kezelés (10-50 ng/ml 24-48 órán keresztül) drámaian felszabályozza a PD-L1-et a reagáló vonalakban.

A PD-L1 IFN-γ általi indukálhatósága intakt interferon-szignalizációra utal, ami korrelál a checkpoint-inhibitor érzékenységgel. A hibás JAK-STAT jelátvitellel rendelkező vonalak csökkent PD-L1-indukciót mutatnak, és gyakran immunterápiás rezisztenciát mutatnak, ami egy klinikailag releváns rezisztencia-mechanizmust modellez.

Tumor-immun ko-kultúra rendszerek

A daganatellenes immunitás funkcionális értékeléséhez olyan ko-kultúrás rendszerekre van szükség, amelyek lehetővé teszik az SK-MEL sejtek és az immunhatású sejtek közötti kölcsönhatást. A perifériás vér mononukleáris sejtjei (PBMC) vagy tisztított T-sejtpopulációk melanomasejtekkel együtt tenyészthetők az immunmediált ölés értékelésére.

A citotoxicitási próbák az SK-MEL célpontok T-sejtes elpusztítását számszerűsítik különböző kijelzésekkel, beleértve a króm felszabadulását, a laktát-dehidrogenáz (LDH) felszabadulását vagy a valós idejű impedancia-monitorozást. Az e ko-kultúrákhoz hozzáadott ellenőrzőpont-antitestek fokozhatják a T-sejtek citotoxicitását, ami a PD-1/PD-L1 tengely blokkolásának funkcionális validálását biztosítja.

A citokinfelszabadulási próbák mérik a T-sejtek IFN-γ, TNF-α, granzim B és perforin szekrécióját SK-MEL sejtekkel való együttkultúrázáskor. A fokozott citokintermelés produktív T-sejt-aktivációt jelez, amely előre jelezheti az in vivo immunterápiás választ.

A háromdimenziós szferoid-kultúrák jobban modellezik a tumoros mikrokörnyezetet, beépítve a T-sejtek beszivárgását és elpusztítását befolyásoló térbeli korlátokat. A T-sejtekkel együtt termesztett SK-MEL szferoidok lehetővé teszik az immunsejtek behatolásának és a célsejtek elpusztításának vizualizálását a tumorszerű struktúrákon belül.

Antigénprezentáció és neoantigén-felismerés

A hatékony tumorellenes immunitáshoz a tumorsejtek felismerése szükséges a tumorantigének T-sejtek számára történő prezentációján keresztül a fő hisztokompatibilitási komplex (MHC) segítségével. Az SK-MEL vonalak HLA I. osztályú expressziója eltérő, ami közvetlenül befolyásolja az immunfelismerést és az ellenőrzőpont-inhibitor-választ.

A HLA tipizálás és expressziós elemzés jellemzi az egyes SK-MEL vonalak antigénprezentációs képességét. A HLA I. osztály elvesztése genetikai változások (β2-mikroglobulin mutációk, HLA gén deléciók) vagy epigenetikus csendesedés révén gyakori immunterápiás rezisztencia mechanizmust jelent, amely specifikus SK-MEL vonalak segítségével modellezhető.

A neoantigén-előrejelző algoritmusok elemzik az SK-MEL vonalak mutációs tájképét a potenciális tumorspecifikus antigének azonosítása érdekében. A nagyobb mutációs teherrel rendelkező vonalak általában több neoantigént tartalmaznak, ami korrelál a fokozott immunogenitással és a kontrollpont-gátlóra adott válasszal.

A rezisztenciamechanizmusok modellezése

Az immunterápiás rezisztencia megértése alapvető fontosságú a kezelés kudarcának leküzdésére irányuló stratégiák kidolgozásához. Az SK-MEL sejtek felhasználhatók mind az elsődleges, mind a szerzett rezisztencia mechanizmusok modellezésére.

A JAK1/2 mutációk megzavarják a PD-L1 indukciójához és a T-sejtek által közvetített öléshez nélkülözhetetlen IFN-γ jelátvitelt. A mesterséges JAK-mutációkkal rendelkező SK-MEL-vonalak ezt a rezisztencia-mechanizmust modellezik, és lehetővé teszik az érzékenység helyreállítására irányuló stratégiák szűrését.

a β2-mikroglobulin elvesztése megszünteti a felszíni HLA I. osztályú expressziót, így a tumorsejtek láthatatlanná válnak a citotoxikus T-sejtek számára. Ez a mechanizmus az immunterápiára rezisztens melanomák mintegy 30%-ában fordul elő, és CRISPR knockout segítségével modellezhető az SK-MEL vonalakban.

Ajánlott termékek a melanoma immunterápiás kutatásához:

Ez a weboldal cookie-kat használ, hogy a legjobb élményt nyújtsa a weboldalon... További információ.
- Imprint

Azt észleltük, hogy Ön egy másik országban él, vagy a jelenleg kiválasztottól eltérő böngészőnyelvet használ. Szeretné elfogadni a javasolt beállításokat?

Zárja be a