SW-620 sejtek - a vastagbélrák kutatására és kísérletezésére gyakorolt hatása
Az SW-620 sejtek a Dukes-féle C stádiumú humán vastagbélrák sejtvonalát alkotják. Magas tumorigén és metasztatikus potenciállal rendelkeznek. Ezért széles körben alkalmazzák őket a rák- és toxikológiai vizsgálatokban. Ez a cikk az SW-620 vastagbélrákos sejtvonal alapvető szempontjait vizsgálja.
Az SW-620 sejtek eredete és általános jellemzői
Az eredet és az általános jellemzők az elsődleges információk egy sejtvonalról. Ennek előzetes ismerete alapvető fontosságú azon kutatók számára, akik azt fontolgatják, hogy bevonják a kutatási tanulmányukba. A cikk ezen szakasza az SW-620 sejtvonal legfontosabb jellemzőit és eredetét ismerteti. Elsősorban a következőket fogja megtudni: Mi az az SW620 sejtvonal? Melyek az SW620 sejtvonal jellemzői? Mi az SW620 eredete? Mi az SW-640 sejtméret? És mi a különbség az SW620 és az SW480 között?
- Az SW-620 egy vastagbélrákos sejtvonal, amely egy 51 éves kaukázusi férfi vastagbél adenokarcinómában szenvedő, mediatizált nyirokcsomó-elváltozásából származik [1]. Ezt a sejtvonalat A Leibovitz és munkatársai helyezték letétbe.
- Az SW-620 sejtek epithelialis morfológiával rendelkeznek. Kicsi kerek és bipoláris sejtekből áll, amelyek megfelelnek a mikrovilláknak.
- Az SW-620 sejtek mérete 14,4 ± 0,3 μm átmérőjű.
- Ezek a vastagbélrákos sejtek hiperdiploid kariotípussal rendelkeznek. Az SW-620 sejtek modális kromoszómaszáma 50, amely 45 és 53 között változhat.
SW-480 Vs SW-620
Az SW480 és az SW620 vastagbélrákos sejtvonalak. Az SW-480 primer tumorból származik, míg az SW-620 metasztatizált nyirokcsomóból származik. Ezenkívül az ezekből a sejtvonalakból kifejlesztett xenotranszplantátumok különböznek egymástól. Az SW620 xenograftok tumorsejt-lapokat, míg az SW480 xenograftok mirigyszerű struktúrákat képeznek [2]. Mindkét sejtvonal mutációs profilja azonos.
SW-620 cellák: Culturing information
Egy sejtvonal alapvető sejttenyésztési koncepciójának megértése elengedhetetlen, mivel ez vezethet a megfelelő kezeléshez és karbantartáshoz. Ebben a szakaszban az SW-620 sejtek tenyésztésével kapcsolatos néhány kulcsfontosságú pontot említünk, amelyek segíthetnek a megismerésben: Milyen az SW-620 táptalaj? Mennyi az SW-620 megduplázódási ideje? Hogyan kell az SW-620 sejteket tenyészteni?
Az SW-620 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
Az SW-620 sejtek megduplázódási ideje 20 és 26 óra között van. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
Az SW-620 sejtvonal adherens. A sejtek monoréteget képeznek a tenyésztőedény felszínén. |
|
Szubkultivációs arány: |
Az SW-620 sejteket 1:3 osztási arányban szubkultúráztatjuk. Az adherens sejteket magnézium és kalcium nélküli foszfát sóoldatos pufferrel (1X) öblítjük. Ezután Accutase passzázsoldatot adunk hozzá, és a sejteket szobahőmérsékleten inkubáljuk 8-10 percig. Friss tápfolyadékot adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk. Ezután a begyűjtött sejteket óvatosan reszuszpendáljuk a növekedési táptalajban, és új lombikokba adagoljuk a növekedéshez. |
|
Növesztőközeg: |
Az SW-620 sejtek ideális növekedéséhez 10% magzati szarvasmarha szérummal, 4,5 g/L glükózzal, 4 mM L-Glutaminnal, 1,5 g/L NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal kiegészített DMEM táptalajt használunk. A táptalajt hetente kétszer kell megújítani. |
|
Növekedési feltételek: |
Az SW-620 vastagbélkarcinóma sejteket 37°C-os hőmérsékleten és 5%CO2 mellett, párásított inkubátorban tenyésztjük. |
|
Tárolás: |
Fagyasztás után az SW-620 sejteket -150°C alatti hőmérsékleten, ultraalacsony hőmérsékletű fagyasztókban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tároljuk. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A CM-1 vagy a CM-ACF ideális fagyasztási közeg az SW-620 sejtek számára. Az SW-620 sejtek fagyasztásához lassú fagyasztási eljárást alkalmaznak. Ez percenként csak 1°C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, így védve a sejtek életképességét. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott SW-620 sejteket 37 °C-ra előzetesen beállított vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk fel. A felolvasztás után tápfolyadékot adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk, hogy eltávolítsuk a fagyasztási tápfolyadék elemeit. Ezt követően a kapott sejtpelletet újra szuszpendáljuk a táptalajban, és a sejteket új lombikba öntjük a növekedéshez. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
Az SW-620 kultúrák kezeléséhez 1. biológiai biztonsági szintű (BSL-1) laboratórium szükséges. |
Az SW-620 cellák előnyei
Előnyök
- A vastagbélrák modellezése: Az SW-620 sejtek a vastagbélrák kritikus modelljeként szolgálnak, lehetővé téve a tumor és az áttétképződés mechanizmusainak alapos tanulmányozását, különösen xenograft modellekben.
- Rákkutatás és terápia: Ezek a sejtek megkönnyítik a rák biológiájának, a kemoterápiás hatékonyságnak és a sejthalál mechanizmusainak, köztük az anoikisznak a feltárását.
- CD133-expresszió: A CD133 expressziója az SW-620 sejtekben betekintést nyújt a rákos őssejtek biológiájába és annak a tumorigenezisre és a terápiás rezisztenciára gyakorolt hatásaiba.
- Áramlási citometriás alkalmazások: Az áramlási citometriás elemzés e sejteken lehetővé teszi a sejtpopulációk, az apoptózis szintjének és a proliferációnak az értékelését.
Az SW-620 sejtvonal kutatási alkalmazásai
Az alábbiakban azokat a kutatási területeket tárgyaljuk, ahol az SW-620 sejtek ígéretes hasznosságot találnak:
- Rákkutatás: Az SW-620 felbecsülhetetlen értékű sejtmodell a vastagbélrák biológiájának tanulmányozására. A kutatók ezt az in vitro modellt a rákos sejtek növekedését, invázióját és migrációját irányító molekuláris mechanizmusok feltárására használják. Emellett az SW620 sejtvonal mutációinak, azaz a p53, APC és KRAS mutációinak tanulmányozására is használható. A 2021-ben végzett kutatás az SW620 sejtvonal KRAS mutációjának hatását vizsgálta az FL118 új gyógyszer érzékenységére. Megfigyelték, hogy a KRAS túlterjedése növeli a kolorektális sejtek FL118 által kiváltott apoptózisát, míg annak csendesítése csökkenti azt. Ezek az eredmények segíthetnek megjósolni az FL118 alkalmazását KRAS-mutációval rendelkező vastagbélrákos betegeknél [3].
- Gyógyszer-szűrés és fejlesztés: Az SW-620 sejtvonalat széles körben használják a vastagbélrák elleni potenciális gyógyszerjelöltek szűrésére és tesztelésére. A kutatók ezeket a sejteket a gyógyszerek citotoxicitásának és hatékonyságának értékelésére használják, ami célzott kezelési megközelítések kifejlesztéséhez vezethet. Egy tanulmány például a fahéj és a szegfűszeg egyes illóolaj-vegyületeinek kolorektális rákellenes hatását vizsgálta az SW-620 sejtvonalon [4].
- Metasztázis-vizsgálatok: A nagy metasztatikus potenciál miatt az SW-620 sejtek felhasználhatók a rákos sejtek metasztázisának hátterében álló molekuláris útvonalak vizsgálatára. Zhou Yang és munkatársai például megállapították a Grainy-head-like 2 (GRHL2) gén szerepét a vastagbélrák progressziójában és metasztázisában. Azt javasolták, hogy a GRHL2 gén expressziója gátolja a vastagbélrák progresszióját és metasztázisát az epiteliális-mesenchymális átmenet (EMT) elnyomása révén [5].
SW620 sejtvonalának biztosítása
SW-620 sejtek: Publikációk
Ez a szakasz az SW-620 sejtekkel kapcsolatos néhány érdekes és legtöbbet idézett kutatási publikációt mutat be.
A Molecular Carcinogenesis (2017) című szaklapban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy egy polifenol, az urolitin A kezelése autofágiát indukál a SW620 vastagbélrákos sejtvonalban. Emellett elnyomta a rákos sejtek metasztázisát is.
Az Oncology Letters (2018) című szaklapban megjelent cikk a tetrandrin, egy bisz-benzilizokinolin alkaloid metasztatikus potenciálját vizsgálta SW-620 sejtek segítségével.
Ez a cikk a Biochemical and Biophysical Research Communications című folyóiratban jelent meg (2018). Azt javasolta, hogy a CDCA3 (Cell division cycle associated 3) gén felszabályozódik a kolorektális rákos sejtekben, és az NF-κB jelátvitel aktiválásán keresztül elősegíti a proliferációjukat.
Az International Journal of Molecular Sciences (2021) tanulmányában egy bispecifikus antitest (ABL001) és kemoterápiás gyógyszerek szinergista hatását vizsgálták a tumor progressziójára SW620 xenograftban.
Ez a cikk a Cells (2018) című folyóiratban jelent meg. A következőkben a Bacopa monnieri, Bacopaside II kivonatát vizsgálták daganatellenes hatásait SW-620 és más vastagbélráksejtekben.
SW-620 sejtvonalra vonatkozó források: Jegyzőkönyvek, videók és még sok más
Az alábbiakban néhány online forrást mutatunk be az SW-620 vastagbélráksejtekkel kapcsolatban.
- SW-620 transzfekció: Ez a cikk röviden ismerteti az SW-620 sejtvonal stabil transzfekciójának protokollját.
A következő link tartalmazza az SW620 sejttenyésztési protokollt.
- SW-620 sejttenyésztési protokoll: Ez a link alapvető információkat nyújt az SW-620 sejtvonalról. Segítséget nyújt továbbá az SW-620 sejtek szubkultúrázására, valamint a kriokonzervált és proliferáló SW620 kultúrák kezelésére vonatkozó protokoll megismerésében.
- Sejttenyésztési protokollok: Ez a videó nagyszerű forrás az adherens sejtek passziválási, fagyasztási és kiolvasztási protokolljainak elsajátításához.
Gyakran ismételt kérdések az SW620 cellákról
Hivatkozások
- Siekmann, W., et al., A lidokain és a ropivakain hatása a primer (SW480) és metasztatikus (SW620) vastagbélrák sejtvonalakra. Oncol Lett, 2019. 18(1): p. 395-401.
- Hewitt, R.E., et al., A vastagbélrák progressziójának modelljének validálása. J Pathol, 2000. 192(4): p. 446-54.
- Thangaiyan, R., et al., Kras mutációs altípusok eltérően befolyásolják a vastagbélráksejtek érzékenységét a survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 és MdmX új inhibitorával, az FL118-cal szemben. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): p. 7458.
- Petrocelli, G., et al., A növényi illóolajokban jelen lévő molekulák a vastagbélrák (CRC) megelőzésére és kezelésére. Molecules, 2021. 26(4): p. 885.
- Yang, Z., et al., A GRHL2 gátolja a vastagbélrák progresszióját és metasztázisát az epiteliális-mesenchymális átmenet elnyomása révén. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): p. 1195-1205.