P19 sejtek - P19 sejtek felhasználásával végzett embrionális karcinóma-kutatás
AP19 egy egér embrionális karcinóma sejtvonal. Széles körben használják az orvosbiológiai kutatásokban, főként a fejlődésbiológia, az őssejtbiológia, a sejtdifferenciálódás és a gyógyszerszűrés tanulmányozására. Mivel a P19 sejtek differenciálódási képességgel rendelkeznek, hasznosak lehetnek olyan komplex biológiai folyamatok vizsgálatában, mint a szövetképződés és a korai embrionális fejlődés. Ebben a cikkben az egérből származó P19 sejtek alapjait tárgyaljuk.
A P19 sejtek általános jellemzői és eredete
Egy sejtvonal általános jellemzőinek és eredetének ismerete alapvető fontosságú, mielőtt elkezdene vele dolgozni. Ez a szakasz a következőkkel foglalkozik: Mi az a P19 sejtvonal? Mekkora a P19 sejtek mérete? Mi a P19 sejtek eredete?
- A P19 a pluripotens embrionális karcinóma sejtek egy típusa, amelyet eredetileg C3H/He egérben kialakult teratocarcinomából nyertek. A sejtvonalat először 1982-ben McBurney és Rogers hozta létre.
- A P19 sejtek szérummal kiegészített táptalajban folyamatosan képesek növekedni. Más sejttípusokká differenciálódhatnak, ha nem toxikus gyógyszereknek, például retinsavnak és dimetil-szulfoxidnak (DMSO) vannak kitéve [1].
- Ezek az egér karcinóma sejtek epithelszerű morfológiával rendelkeznek.
- A P19 sejtvonal euploid hím kariotípusú (n=40; XY).
A P19 sejtekre vonatkozó tenyésztési információk
A P19 sejtvonalat egyedülálló tulajdonságai miatt széles körben tenyésztik a kutatólaboratóriumokban. Termesztése egyszerű és könnyen kezelhető. Ebben a szakaszban megemlítettük az összes kulcsfontosságú információt, amelyre a P19 sejttenyészet fenntartásához és tenyésztéséhez szüksége van. Tudni fogjuk: Mennyi a P19 sejtek megduplázódási ideje? Hogyan kell a P19 sejtvonalat tenyészteni? A P19 egy adherens sejtvonal?
A P19 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A P19 sejtvonal esetében bejelentett megduplázódási idő körülbelül 2-3 nap. |
|
Adherens vagy szuszpenzióban: |
A P19 embrionális karcinóma sejtvonal adherens. |
|
Szubkultúrázási arány: |
A P19 sejteket 48 óránként szubkultúrázni kell, és 1:10 osztási arányt kell fenntartani e sejtek esetében. Az adherens sejteket 1 X foszfátpuffer sóoldattal mossuk, és Accutase-zal inkubáljuk, amíg a sejtek disszociálódnak. A sejtekhez tápfolyadékot adunk, és centrifugálással kitermeljük őket. Az összegyűjtött sejteket óvatosan reszuszpendáljuk és új lombikokba adagoljuk. |
|
Növesztőközeg: |
A P19 sejtek tenyésztéséhez DMEM/Ham's F12 táptalajt használunk, amely 5% magzati szarvasmarha szérumot, 3,1 g/L glükózt, 1,6 mM L-Glutamint, 1,0 mM nátrium-piruvátot, 15 mM HEPES-t és 1,2 g/L NaHCO3-t tartalmaz. |
|
Növekedési feltételek: |
A P19 embrionális karcinóma sejtvonal termesztéséhez és tenyésztéséhez 37 °C-on, 5%-os CO2-ellátással működő, párásított inkubátorban kell termeszteni. |
|
Tárolás: |
A lefagyasztott P19 sejtes fiolákat -150°C alatti hőmérsékleten, fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában kell tárolni a sejtek életképességének hosszabb távú megőrzése érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A P19 sejtek lefagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF médium használható lassú fagyasztási módszerrel, amely megvédi a sejteket a sokktól és megőrzi életképességüket. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A lefagyasztott P19 sejtek 37 °C-os vízfürdőben felolvaszthatók az injekciós üveg gyors, 40-60 másodperces keverésével. A sejtekhez friss tápfolyadékot adunk, majd centrifugálással eltávolítjuk a fagyasztási tápfolyadék elemeit. A sejtpalettát ismét reszuszpendáljuk, és a sejteket a növekedéshez új lombikba öntjük. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A P19 sejtvonalhoz 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumi beállítások szükségesek. |
P19 sejtvonal: Hátrányok és előnyök
Ez a szakasz a P19 sejtvonal előnyeit és hátrányait tárgyalja.
Előnyök
- Differenciálódási potenciál: A P19 sejtek képesek különböző sejttípusokká differenciálódni, beleértve a kardiomiocitákat, neuronokat és mikroglia sejteket. A differenciáláshoz nem mérgező gyógyszerekre, például retinsavra és dimetil-szulfoxidra (DMSO) van szükségük. A retinsav neuronok, mikroglia és asztroglia fejlődését indukálja, míg a DMSO a dobogó kardiomiociták és simaizomsejtek fejlődését indítja el. Így a P19 sejtek hasznosak a sejtdifferenciálódás és a fejlődési folyamatok tanulmányozására
- Modellrendszer: A P19 pluripotens embrionális karcinóma sejtvonal értékes modell a korai embrionális fejlődés tanulmányozására. A kutatók a P19 sejteket a sejtek jelátviteli útvonalainak, valamint az e folyamatokban szerepet játszó sejtes és molekuláris mechanizmusoknak a feltárására használják
Hátrányok
- Egér eredetű: A P19 egy egér embrionális karcinóma sejtvonal. Következésképpen az e sejtekkel végzett vizsgálatok eredményei nem feltétlenül ültethetők át teljes mértékben a humán biológiára és folyamatokra
A P19 sejtek kutatási alkalmazásai
A P19 sejtek differenciálódási képességüknek és a fejlődésbiológiai és őssejtkutatásban betöltött szerepüknek köszönhetően számos kutatási alkalmazással rendelkeznek. A P19 embrionális karcinóma sejtek néhány fontos kutatási alkalmazása a következő:
- Sejtdifferenciálódási vizsgálatok: Mint tudjuk, a P19 sejtek képesek idegsejtekké, mikrogliasejtekké, simaizomsejtekké és kardiomiocitákká differenciálódni; így széles körben használják a sejtdifferenciálódási folyamatok tanulmányozására. Ezenkívül segít a kutatásban az idegi és a szívfejlődés és a mögöttes mechanizmusok vizsgálatában. Egy 2018-ban végzett vizsgálat megállapította, hogy a reaktív oxigénfajok (ROS) irányítják a P19 sejtek differenciálódását bizonyos sejttípusokká, és megakadályozzák mások indukcióját [3]. Egy másik tanulmány a retinsav által közvetített neurális differenciálódási folyamatot vizsgálta, és a PI3K/Akt/GSK3β jelátviteli útvonal részvételét állapította meg [4].
- Fejlődésbiológia: A P19 sejtek felbecsülhetetlen értékű modell a korai embrionális fejlődés tanulmányozására. Segítenek a kutatóknak megérteni az összetett biológiai folyamatokat, például az embriófejlődés során zajló szövetképződést. A kutatásban P19 sejteket használtak, és a kamrai szeptumdefektus (VSD) kialakulásához hozzájáruló molekuláris tényezőket vizsgálták. Az eredmények azt mutatták, hogy egy hosszú, nem kódoló RNS, az SNHG6 hozzájárul a VSD kialakulásához a miRNS-101 negatív szabályozásával és a Wnt/β-katenin útvonal aktiválásával [5].
- Gyógyszeres vizsgálat: A P19 egér embrionális karcinóma sejtvonalat potenciális gyógyszerjelöltek szűrésére is használják. Egy tanulmányban differenciált P19 sejtneuronokat használtak, és vizsgálták a szintetikus L-Dopa és a Mucuna pruriens mag vizes kivonatának neuroprotektív acetilkolinészteráz gátló hatását. Az eredmények azt mutatták, hogy a növényi kivonat ígéretes eredményeket mutatott az L-Dopához képest [6].
Vásárolja meg P19 sejtvonalát ma
P19 sejtek: P1919: kutatási publikációk
Ez a cikkrész a P19 sejteket bemutató néhány érdekes kutatási publikációval foglalkozik.
Ez a cikk az Oncology Reports című szaklapban jelent meg 2017-ben. A tanulmány azt javasolta, hogy az agyalapi mirigy nemi hormonok irányítják a teratokarcinóma sejtvonalak adhézióját, proliferációját és migrációját, beleértve a P19 sejteket is.
Az Experimental & Molecular Medicine folyóiratban (2018) megjelent publikáció P19 sejteket használt, és a hosszú nem kódoló RNS uc.4 működését vizsgálta. Az eredményekből kiderült, hogy az uc.4 a TGF-béta jelátviteli útvonal modulálásán keresztül befolyásolja a sejtdifferenciálódást.
Ez a kutatási cikk 2018-ban jelent meg a Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine című folyóiratban. A tanulmány megállapította, hogy a természetes agyszövet-kivonat és a 3D-s sejtkultúra felgyorsíthatja a P19 embrionális karcinóma őssejtek neurális sejtekké történő differenciálódását.
Ezt a tanulmányt a Journal of Ethnopharmacology 2020-ban jelentette meg. A tanulmány azt javasolta, hogy a Cichorium intybus L. levélkivonat képes indukálni a P19 embrionális karcinóma őssejtek differenciálódását inzulintermelő hasnyálmirigy β-sejtekké.
Ez a kutatás a Molecules című folyóiratban jelent meg (2022). Ez a tanulmány a Mucuna pruriens magkivonat neuroprotektív és acetilkolin-észteráz gátló hatását vizsgálta a P19 sejtek neuronjaira.
Források a P19 sejtvonalhoz: Protokollok, videók és még sok más
Az alábbiakban néhány forrás található a P19 sejtekkel kapcsolatban.
- P19 sejtek neuronális differenciálódási protokollja: Ez a cikk a P19 sejtek neuronális differenciálódási protokollját és egyéb hasznos információkat tartalmaz a P19 sejtek differenciálódásáról.
- P19 sejtek transzfekciója: Ez a link segít megismerni a P19 sejtek transzfekciós protokollját.
A következő link a P19 sejttenyésztési protokollt tartalmazza.
- P19 sejtek: Ez a weboldal tartalmaz minden hasznos információt a P19 sejtvonalról, beleértve a tenyésztési körülményeket, a P19 sejtmédiát, a sejtosztást és még sok más hasznos információt.
A P19 sejtvonal felfedezése: P1919: Gyakran Ismételt Kérdések
Hivatkozások
- McBurney, M.W., P19 embrionális karcinóma sejtek. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al., P19 embrionális karcinóma sejtvonal: A Model To Study Gene-Environment Interactions. Cell Culture Techniques, 2011: p. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey, and G. Rödel, Mitochondrial ROS direct the differentiation of murine pluripotent P19 cells. Stem Cell Research, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F., et al., All-trans-retinoid sav indukálja a P19 sejtek differenciálódását neuronokká, amelyek részt vesznek a PI3K/Akt/GSK3β jelátviteli útvonalban. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., A hosszú nem kódoló RNS SNHG6 hozzájárul a kamrai szeptumdefektus kialakulásához a miR-101 negatív szabályozásán és a Wnt/β-katenin útvonal aktiválásán keresztül. Die Pharmazie-An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., Mucuna pruriens mag vizes kivonata javította a neuroprotektív és acetilkolinészteráz gátló hatást a szintetikus L-dopához képest. Molecules, 2022. 27(10): p. 3131.