INS-1 sejtvonal
AzINS-1 egy jól jellemzett, a cukorbetegség kutatásában széles körben használt patkány inzulinóma sejtvonal. Az INS-1 sejtek glükózstimuláció hatására inzulint választanak ki, ezért alkalmazzák őket a glükózanyagcsere, a béta-sejtek fiziológiájának és az inzulinszekréció szabályozásának tanulmányozására. Továbbá, ezeket a sejteket a diabetes mellitus elleni potenciális terápiás szerek szűrésére, tesztelésére és fejlesztésére is használják.
Ez a cikk minden szükséges információt megad az INS-1 béta-sejtekről, amit tudnia kell, mielőtt felhasználja őket a kutatásaiban. Elsősorban a következőket fogja megtudni:
- Az INS-1 sejtek általános jellemzői és eredete
- INS-1 sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk
- Az INS-1 sejtvonal előnyei és hátrányai
- Az INS-1 patkány inzulinóma sejtek kutatási alkalmazásai
- INS-1 béta sejteket tartalmazó kutatási publikációk
- Az INS-1 sejtvonal forrásai: Jegyzőkönyvek, videók és még sok más
1. Az INS-1 sejtek általános jellemzői és eredete
Egy sejtvonal általános jellemzőinek és eredetének ismerete nagyban segítheti a hatékony és eredményes felhasználását a kutatásban. Ez a cikkrész az INS-1 eredetéről és általános jellemzőiről tájékoztatja Önt. Tudni fogja: Mi az INS-1 patkány inzulinóma sejtvonal? Melyek az INS-1 általános jellemzői? Milyen az INS-1 832/3 sejtvonal? Mi az INS-1E?
- Az INS-1 sejteket eredetileg egy 666 napos patkányból izolálták, amelynek röntgensugárral kiváltott transzplantálható inzulinómája volt.
- Az INS-1 sejtek bi-hormonálisak. Egyidejűleg expresszálják az inzulin és a proglukagon fehérjéket. Ezek a sejtek éretlennek tekinthetők, mivel az Nkx6.1 transzkripciós faktor alacsony expressziós szintjét mutatják, és hiányoznak belőlük az alfa-sejt markerek [1].
- Az INS-1 sejteknek két szubklónja létezik, az INS-1E és az INS-1 832/3.
- Az INS-1E az INS-1 szülő sejtvonaltól a glükózra és az inzulintartalomra adott titkársági válaszok tekintetében különbözik.
- Az INS-1 832/3 vagy INS-1 832/13 szintén az INS-1 sejtvonal szubklónja. Felbecsülhetetlen értékű modell a hasnyálmirigy szigetbéta-sejtek működésének és az inzulinszekréció szabályozásának tanulmányozására. A glükóz-stimulált inzulinszekréció (GSIS) tekintetében is különbözik a szülő INS-1 sejtektől.
2. INS-1 sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk
A sejtvonal hatékony kezeléséhez és fenntartásához ismernie kell a következő tenyésztési információkat. A cikk ezen szakasza az INS-1 sejtek tenyésztésével kapcsolatos összes kulcsfontosságú pontot tárgyalja. megtudhatja: Hogyan kell az INS-1 béta sejteket tenyészteni? Mi az INS-1 sejttenyésztési protokoll? Mennyi az INS-1 sejtek megduplázódási ideje? Milyen az INS-1 patkány inzulinóma sejtmédia?
Az INS-1 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
Az INS-1 sejtek populációjának megduplázódási ideje körülbelül 44 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
Az INS-1 sejtek szuszpenzióban és adherens formában is növekednek. |
|
Szubkultivációs arány: |
Az INS-1 sejteket 1:3 arányban szubkultúráztatjuk. Röviden, a szuszpendált sejteket összegyűjtjük. Az adherens sejteket PBS-szel öblítjük és Accutase oldattal inkubáljuk. Leválasztás után a sejteket friss tápfolyadékkal adjuk hozzá. Ezt követően mind a szuszpendált, mind a tapadó sejteket centrifugáljuk és összegyűjtjük. A sejteket óvatosan reszuszpendáljuk és a növekedéshez új lombikokba adagoljuk. |
|
Növesztőközeg: |
Az INS-1rat inzulinóma sejtvonal tenyésztéséhez RPM1 1640-et használunk. A táptalajt 10% hővel inaktivált magzati szarvasmarha szérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal, 10 mM HEPES-szel, 2,0 g/L NaHCO3-mal és 1 mM nátrium-piruváttal egészítjük ki. |
|
Növekedési feltételek: |
Az INS-1 sejteket 37 °C-os hőmérsékleten, folyamatos 5%-os CO2-ellátás mellett párásított inkubátorban tartjuk. |
|
Tárolás: |
Az INS-1 béta sejtek hosszú távon tárolhatók folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150°C alatti hőmérsékleten elektromos fagyasztóban. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
CM-1 vagy CM-ACF táptalajokat használnak az INS-1 sejtek lassú fagyasztási folyamaton keresztül történő lefagyasztásához. Ez percenként csak 1°C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé a sejtek életképességének védelme érdekében. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A lefagyasztott INS-1 sejteket 37 Celsius-fokos hőmérsékletre előzetesen beállított vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk fel. A felolvasztás után a sejtekhez friss tápfolyadékot adunk, és közvetlenül egy új lombikba öntjük a növekedéshez. 24 óra elteltével a tápfolyadékot kicseréljük a fagyasztási tápfolyadék összetevőinek eltávolítása érdekében. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
Az INS-1 patkány inzulinóma sejtek tenyésztéséhez 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges. |
3. az INS-1 sejtvonal előnyei és hátrányai
Más sejtvonalakhoz hasonlóan az INS-1 is rendelkezik néhány sajátos tulajdonsággal, amelyek bizonyos előnyökkel és hátrányokkal járnak. Az alábbiakban néhány jelentőset említünk meg.
Előnyök
Az INS-1 sejtvonal fő előnyei a következők:
-
Jól jellemzett
Az INS-1 egy jól megalapozott és jól jellemzett sejtvonal. Számos kutatásban használták már. Hosszabb időn keresztül megőrzi fenotípusos jellemzőit és inzulinszekréciós képességét, így megbízható és konzisztens kísérleti eredményeket biztosít.
-
Béta-sejt modell
Az INS-1 sejteket a hasnyálmirigy szigetbéta-sejtek működésének tanulmányozására használják, mivel inzulint választanak ki és reagálnak a glükózszint ingadozására.
hátrányok
Az INS-1 sejtek hátrányai a következők:
-
Nem emberi eredetűek
Az INS-1 béta-sejtek nem emberi eredetűek. Patkány inzulinomából származnak. Ez fajspecifikus különbségeket okozhat, és korlátozhatja a kísérleti eredmények közvetlen átültetését a humán fiziológiára.
4. Az INS-1 patkány inzulinóma sejtek kutatási alkalmazásai
Az INS-1 béta-sejteket széles körben használják a cukorbetegség kutatásában. Ennek a sejtvonalnak néhány ígéretes alkalmazását említjük itt.
- Inzulinszekréciós vizsgálatok: Az INS-1 sejtek inzulinszekréciós képességgel rendelkeznek, ezért széles körben alkalmazzák őket az inzulinszekréció mögöttes sejtmechanizmusainak tanulmányozására. A kutatók vizsgálják az inzulin felszabadulásában szerepet játszó alapvető tényezőket, beleértve a glükóz anyagcserét, a jelátviteli utakat, a hormonokat és a farmakológiai szereket. Egy tanulmány szerint egy K + ATP ioncsatorna-függő útvonal szabályozza az INS-1 béta-sejtek inzulinszekrécióját [2]. Emellett vizsgálatok azt is kimutatták, hogy a GLP-1R és az AKT/PDX1 útvonalak is részt vesznek az INS-1 patkány inzulinóma sejtek inzulinszekréciójában [3].
- Béta sejtfunkciós vizsgálatok: Az INS-1 sejtek hasnyálmirigy-szigetbéta-sejt-szerű tulajdonságokkal rendelkeznek, mint például a glükóz-anyagcserére való érzékenység és az inzulinszekréció. Ezért a béta-sejtek fiziológiai folyamatainak és funkcióinak tanulmányozására használják őket. Egy 2022-ben végzett vizsgálatban INS-1 sejteket használtak, és H2O2 segítségével béta-sejt diszfunkciós modellt fejlesztettek ki. Tanulmányozták a sejtek életképességét, az inzulinszekréciót és az oxidatív stresszel kapcsolatos markereket ezekben a sejtekben természetes vegyületkezelés hatására [4].
- Gyógyszerkutatás és fejlesztés: Az INS-1 patkány inzulinóma sejteket széles körben használják antidiabetikus vegyületek vagy gyógyszerek szűrésére és tesztelésére. Alkalmazhatók a terápiás szerek inzulinszekrécióra és más releváns paraméterekre gyakorolt potenciális hatásainak vizsgálatára. Egy vizsgálat megállapította, hogy a loganin, egy kínai növényi formula összetevője védte az INS-1 sejtek inzulinszekréciós funkcióját, és potenciális antidiabetikus hatást fejtett ki. Az összetevő ezeket a kedvező hatásokat a FOXO1 gén nukleáris transzlokációjának gátlásával közvetítette a PI3K/AKT útvonalon keresztül [5].
5. INS-1 béta-sejteket tartalmazó kutatási kiadványok
Az alábbiakban néhány jelentős kutatási publikáció található, amelyekben az INS-1 patkány inzulinóma sejtvonal szerepel.
Ez a tanulmány az Internation Journal of Molecular Sciences című folyóiratban jelent meg 2018-ban. A tanulmány azt javasolta, hogy egy sárga kristályos természetes vegyület, az alfa-mangosztin elősegíti az INS-1 béta-sejtek inzulinszekrécióját és megvédi őket a béta-sejtek toxinja, a streptozotocin által kiváltott károsodástól.
Ez a kutatás az acta pharmacologica sinica című folyóiratban jelent meg 2018-ban. A tanulmány eredménye azt mutatta, hogy az epikatekin vegyület a CaMKII útvonal aktiválásán keresztül elősegíti a glükóz-stimulált inzulinszekréciót a telített zsírsavakkal károsodott INS-1 béta-sejtekben.
A Molecules (2019) című folyóiratban megjelent cikk azt javasolta, hogy egy új természetes vegyület, a feniletanoid glikozid befolyásolja az inzulinszekréciót INS-1 patkány inzulinóma sejtekben, és így antidiabetikus potenciállal rendelkezik.
A Loureirin B elősegíti az inzulinszekréciót a GLP-1R és az AKT/PDX1 útvonalakon keresztül
Ez a kutatás a European Journal of Pharmacology (2022) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt javasolta, hogy a Loureirin B, egy természetes termék az AKT/PDX1 és a GLP-1R útvonalak modulációján keresztül fokozza az INS-1 hasnyálmirigy-szigetbéta sejtek inzulinszekrécióját.
Ez az Integrative Medicine Research (2018) cikk a Withania coagulans kivonat rákellenes potenciálját értékelte INS-1 rákos sejtek felhasználásával.
6. Az INS-1 sejtvonalra vonatkozó források: Jegyzőkönyvek, videók és még sok más
Íme néhány online erőforrás, amelyekben az INS-1 sejtek szerepelnek:
- Szuszpenziós sejtek szubkultiválása: Ez a videó átfogó útmutató a szuszpenziós kultúrákban növő sejtek szubkultúrázásához.
- Adhéziós sejtek szubkultiválása: Ez a videó segít elsajátítani az adherens sejtek passziválásának általános protokollját.
Az alábbi link tartalmazza az INS-1 sejttenyésztési protokollt:
- INS-1 sejtvonal: Ez a weboldal tartalmazza az INS-1 sejttenyésztéssel kapcsolatos összes információt. Tartalmazza az INS-1 sejtkultúrával és a fagyasztási közeggel kapcsolatos információkat, a szubkultúrázásra vonatkozó protokollokat, valamint a kriokonzervált és proliferatív INS-1 kultúrák kezelését.
Hivatkozások
- Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
- Park, J.E. és J.S. Han, A Portulaca oleracea L. kivonat elősegíti az inzulinszekréciót egy K+ ATP csatorna függő útvonalon keresztül az INS-1 hasnyálmirigy β-sejtekben. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
- Fang, H., et al., Loureirin B elősegíti az inzulinszekréciót a GLP-1R és AKT/PDX1 útvonalakon keresztül. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
- Duan, J., et al., A Swietenia macrophylla királyból származó szvitenin és szvitenolid javítja az inzulinszekréciót és mérsékli az apoptózist H2O2 indukált INS-1 sejtekben. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
- Mo, F.-F., et al., A loganin diabéteszellenes hatása a FOXO1 nukleáris transzlokációjának gátlásával a PI3K/Akt jelátviteli útvonalon keresztül INS-1 sejtekben. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.