Tovább a honlapra
Bevásárlókosár 0,00 EUR*
Minden kategória megjelenítése HepG2 sejtvonal - Májrákkutatási erőforrás Vissza

HepG2 sejtek – a májrák kutatásának forrása

A Hep-G2 egy humán májrákos sejtvonal, amely egy 15 éves, hepatocelluláris karcinómában szenvedő kaukázusi férfi májszövetéből származik. Ezeket a sejteket gyakran használják gyógyszer-metabolizmus és hepatotoxicitás vizsgálatokban. Bár a HepG2 sejtek szaporodási aránya magas és megjelenésük hámsejtszerű, nem tumorigenikusak és különböző differenciált májfunkciókat látnak el. 1975-ben a kutatók hepatocelluláris karcinómából nyerték ki a HepG2 sejteket, így ez lett az első májsejtvonal, amely a hepatociták kritikus jellemzőit mutatta. A korábban létrehozott SK-Hep1 sejtvonal ellentétben, amelyből hiányoznak az alapvető májsejt-markerek, a HepG2 sejtek különböző plazmafehérjéket képesek kiválasztani, és értékes modellt nyújtanak az emberi hepatociták sejtfelszíni doménjeinek intracelluláris dinamikájának tanulmányozásához. Ezek a sejtek epitheliális jellegű morfológiát mutatnak, kromoszómaszámuk általában 55, és emberi növekedési hormonnal stimulálhatók.

📋 HepG2 sejtvonal — Gyors tények
Növekedési tápközeg
Lásd a termékoldalt
Duplázódási idő
Lásd a termékoldalt
Növekedési típus
Adherens
Biológiai biztonsági szint
BSL-1

Egy férfi májában található rosszindulatú daganatról készült 3D-s orvosi animáció.

A HepG2 sejtek jellemzői

Az elsődleges hepatociták jellegzetes alakja kocka alakú, és általában két sejtmagot tartalmaznak. Ezzel szemben a HepG2 sejtek epitheliális jellegű morfológiával rendelkeznek, egyetlen sejtmaggal és sejtenként 48–54 kromoszómával. Bár a HepG2 sejtek a teljes sejtfehérje akár 25%-át is kitehetik, méretük nagyobb, mint a normál hepatocitáké, és a sejt teljes fehérjéjének körülbelül 10%-át teszik ki. A sejtfehérjék kritikus szerepet játszanak a sejten belül, végrehajtva a gének által meghatározott funkciókat.

A tumorsejtek, beleértve a rendellenes kromoszómaszámúakat is, gyakran mutatnak megnövekedett sejtmagszámot, akár hét sejtmagot is elérve sejtenként. In vitro magas differenciáltságuknak köszönhetően a HepG2 sejtek ideális modellt nyújtanak az emberi hepatocitákban az epevezetékek, a szinuszos membránfehérjék és a lipidek intracelluláris transzportjának és dinamikájának tanulmányozásához.

A HepG2 sejtek átlagos átmérője körülbelül 10–20 µm, ami kisebb, mint a 15 µm átmérőjű hepatocitáké, de hasonló a 10–20 µm közötti átmérőjű hepatoblastoma (HB) tumorsejtekéhez.

A HepG2 genetikája

A Hep-G2 sejtvonal számos transzlokációt mutat, beleértve a 1. és 21. kromoszóma rövid karjai közötti transzlokációkat, a 2., 16. és 17. kromoszóma triszómiáit, valamint a 20. kromoszóma tetraszómiáját. Megfigyelhető a 4q3 kromoszómarégió elvesztése is, amely a hepatoblastomában (HB) gyakran előforduló t(1;4) transzlokációval és más kromoszómaabnormitásokkal, például a 2. és 20. kromoszóma triszómiájával társul. A HepG2 sejtek kromoszómaszáma 50 és 60 között mozog, ami hiperdiploid kariotípust jelez, míg egyes esetekben több mint 100 kromoszóma figyelhető meg, és ezeket tetraploid megnagyobbodás jellemzi. A HepG2 sejtek körülbelül 7,5 pg DNS-t tartalmaznak, ami 15%-kal több, mint egy átlagos szomatikus sejtben. Ehhez képest az elsődleges hepatociták sejtjei kocka alakúak és jellemzően két sejtmagot tartalmaznak [1].

A HepG2 sejtek mutációs profilja

A HepG2 sejtvonal hordozza a TERT promóter régió C228T mutációját, amely a hepatocelluláris karcinómában (HCC) és a hepatoblastómában (HB) is jelen van. Ez a mutáció hozzájárul az immortalisációhoz azáltal, hogy védi a ráksejtek telomereit. Ezenkívül a HepG2 sejtek vad típusú TP53-at mutatnak, amely kritikus gén az emberi rák szuppressziójában, mivel szerepet játszik a sejtciklus leállásában, az apoptózisban és az öregedésben. E gén mutációi elősegíthetik a sejtek proliferációját.

A HepG2 sejtek számos útvonalban részt vesznek, beleértve a sejtnövekedés szabályozási zavarait, a túlélési útvonalakat, mint például a magzati és embrionális HB, valamint a Wnt/β-katenin útvonalat. Ezenkívül a sejtvonalban jellegzetes a CTNNB1 gén harmadik exonjának deléciója, amely megegyezik az epiteliális típusú HB-ben megfigyeltel [2,3].

HepG2 cells at high and low confluence

HepG2 sejtek szigetekben történő növekedése 20-szoros és 10-szoros nagyításban.

A HepG2 májsejtes karcinóma sejtek áttekintése a májkutatásban

Az emberi hepatómából származó HepG2 sejtek felbecsülhetetlen értékű eszközzé váltak a májfunkciók és -betegségek, köztük a hepatocelluláris karcinóma kutatásában. Ezek a májsejtvonalak betekintést nyújtanak az emberi májsejtek sejtválaszaiba különböző kísérleti körülmények között. A luciferáz riporter plazmidok használata HepG2 sejtekben különösen hatékonynak bizonyult a génexpresszió és a sejttranszfekciók nyomon követésében, amelyek alapvető fontosságúak az anyagcsere-kutatásban, például az etanol májsejtekre gyakorolt hatásainak vizsgálatában.

Vírusfertőzések és májbetegségek vizsgálata HepG2 sejtek felhasználásával

Az olyan halhatatlanná tett májdaganat-sejtvonalak, mint a HepG2 és a Huh7, elengedhetetlenek a vírusfertőzések tanulmányozásában, mivel bizonyítják a hepatitis D (HDV) teljes sejtciklus-replikációját és a hepatitis B (HBV) expresszióját [5,6]. Ezzel párhuzamosan a HepaRG sejtvonalak kritikus szerepet játszanak a HBV behatolási mechanizmusainak tisztázásában [7]. A HepG2 sejteket számos emberi májbetegség vizsgálatára is alkalmazzák, a progresszív familiáris intrahepatikus cholestasis (PFIC) és a Dubin-Johnson-szindróma genetikai állapotaitól kezdve a citotoxikus és genotoxikus anyagokkal kapcsolatos környezeti és táplálkozási vizsgálatokig, valamint a gyógyszercélzás és a hepatokarcinogenezis kutatásában [8,9]. Használatuk kiterjed a bio-mesterséges máj eszközökkel végzett kísérletekre is.

A HepG2 sejtek és a biológiai anyagok kölcsönhatása a szövetmérnökségben

A HepG2 sejtek és a különböző biológiai anyagok közötti kölcsönhatás kulcsfontosságú a szövetmérnökségben. Az olyan technikák, mint a kolloid szondás technika, segítenek megérteni ezeket a kölcsönhatásokat a sejtadhéziós tulajdonságok mérésével, amelyek elengedhetetlenek a sejtek életképességének meghatározásához a vázszerkezetek és a pontos májszövet-modellek fejlesztése érdekében.

Sejtviselkedés és innovációk a HepG2-alapú modellekben

A HepG2-alapú modellekben a sejtek viselkedésének tanulmányozása elengedhetetlen a májbetegségek kutatásához. A háromdimenziós szferoid sejtkultúrák terén elért fejlődés a HepG2 sejt szferoidok létrehozásához vezetett, amelyek egy fiziológiailag relevánsabb modellt kínálnak, amely szorosan tükrözi a normális hepatocitákat. Ezek a megnövekedett metabolikus aktivitású 3D-modellek arra utalnak, hogy a HepG2-sejtek alkalmasak lehetnek hepatoblastoma modellként, és jelentős szerepet játszanak a rákkezelés kutatásában, különösen a májdaganatok szimulálásában és új terápiás megközelítések tesztelésében [10-12].

A HepG2 összehasonlítása és jellemzői más tumorsejtvonalakkal

A HepG2 az egyik legszélesebb körben használt májdaganatos sejtvonal, amelyet a mintegy 40 rendelkezésre álló májdaganatos sejtvonal közül választottak ki széles körű tudományos kutatási alkalmazásai miatt [13]. Annak ellenére, hogy bizonyos citokróm P450 enzimek expressziója gyenge vagy hiányzik a normál hepatocitákhoz képest, a HepG2 metabolikus profilja ösztönözte a sejtvonal módosítására irányuló erőfeszítéseket a gyógyszer-metabolizmus jobb tanulmányozása érdekében [13]. Az MCF7, PC3, 143B és HEK293 tumorsejtvonalakhoz képest a HepG2 sejtek egyedülálló aminosav-tartalmi profilokat mutatnak, amelyek jelentősen befolyásolják a fehérjeszintézist és a szekréciót, kiemelve egyedi metabolikus útjaikat [14].

A májbetegségek kutatásának feltárása a HepG2 segítségével

430,00 EUR*

Tartalom: 1.5 milliliter

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial
Termékszám: 300198

HepG2 sejtek átültetése

Az alábbiakban bemutatjuk az Accutase segítségével a tapadó sejtek sejtkultúra-lombikokból történő eltávolításának öt lépését:

  1. Távolítsa el a táptalajt a sejtkultúra-lombikból, és öblítse le az adhezív sejteket kalcium- és magnéziummentes PBS-sel. Használjon 3–5 ml PBS-t a T25-ös lombikokhoz és 5–10 ml-t a T75-ös lombikokhoz.
  2. Adjon Accutase-t a sejtkultúra-lombikba, 1–2 ml-t T25-ös és 2,5 ml-t T75-ös lombikokhoz. Győződjön meg arról, hogy az Accutase az egész sejtréteget befedi.
  3. Inkubálja a lombikot szobahőmérsékleten 8–10 percig.
  4. Óvatosan szuszpendálja újra a sejteket 10 ml friss táptalajjal.
  5. Centrifugálja az újra szuszpendált sejteket 5 percig 300xg-en, szuszpendálja őket friss táptalajban, majd adagolja őket friss táptalajt tartalmazó új lombikokba.

A HepG2 sejtek jövőbeli kilátásai

A HepG2 sejtvonal teljes potenciáljának feltárására irányuló kutatások folytatódnak, és áttörő eredményeket értek el a citokrómok expressziójának növelésében. A kutatók emellett a háromdimenziós szferoid sejtkultúrák lehetőségét is vizsgálják, amelyek fiziológiailag relevánsabb rendszert kínálnak. A citokrómokat is magában foglaló metabolikus aktivitás a 3D-s szferoid HepG2-modellekben jelentősen magasabb, mint a 2D-s sejtekben, ami közelebb visz minket egy olyan modell létrehozásához, amely tükrözi a normális hepatocitákat. Ezenkívül a sejtfelszíni fehérjék helytelen eloszlásának hátterében álló dinamikus folyamatok feltárása elősegítheti a májbetegségek jobb megértését.

HepG2 sejtek: szerepük és jellemzőik az orvostudományi kutatásban – GYIK

Igen, a HepG2 egy hepatocelluláris karcinómából (HCC) származó rákos sejtvonal. Általában a kutatásban használják a májrák, a májműködés, valamint a gyógyszerek és toxinok anyagcseréjének tanulmányozására
A HepG2 és a Hep3B egyaránt hepatocelluláris karcinóma sejtvonal, de különböző egyénekből származnak, és eltérő genetikai háttérrel rendelkeznek. A Hep3B sejtek arról nevezetesek, hogy hepatitis B pozitívak és nem rendelkeznek funkcionális p53 génnel, míg a HepG2 sejtek intakt p53 génnel rendelkeznek, így hasznosak a p53 által közvetített sejtválaszok tanulmányozására
A HepG2 sejtek emberi májrákból származnak, és elsősorban a májműködéssel és májbetegségekkel kapcsolatos vizsgálatokhoz használják őket. A HEK293 sejtek viszont emberi embrionális vesesejtekből származnak, és nagyfokú transzfecálhatóságuk miatt gyakran használják őket különböző biológiai vizsgálatokban, többek között a génexpresszió és a vírusszaporodás kutatásában
A HepG2 sejtek immortalizált rákos sejtek, amelyek korlátlan növekedési potenciállal rendelkeznek, így könnyen tenyészthetők és fenntarthatók a laboratóriumban. Az elsődleges hepatociták közvetlenül a májszövetből izolált, nem rákos májsejtek, amelyek élettartama véges, és funkcionalitás és génexpresszió szempontjából jobban hasonlítanak az in vivo májkörnyezethez. A primer hepatociták azonban tenyésztés közben gyorsan elveszíthetik májspecifikus funkcióikat
A HepG2 sejtek képesek a gyógyszerek metabolizálására, de általában alacsonyabb szinten, mint az elsődleges hepatociták. Ennek oka, hogy a HepG2 sejtekben a kulcsfontosságú gyógyszer-metabolizáló enzimek, például a citokróm P450 enzimek alacsonyabb és változó mértékben expresszálódnak
Igen, a HepG2 sejteket széles körben használják a rákkutatásban, különösen a hepatocelluláris karcinómára összpontosító vizsgálatokban. Modellként szolgálnak a rákbiológia, a gyógyszerrezisztencia és a potenciális rákellenes vegyületek hatékonyságának vizsgálatához
A HepG2 sejtek fogékonyak bizonyos hepatitis vírusok fertőzésére, így hasznos eszköznek bizonyulnak a vírus életciklusának, a vírus-gazda kölcsönhatásoknak és a vírusellenes gyógyszerek tesztelésének tanulmányozására, különösen a hepatitis B és D vírusokkal összefüggésben
A HepG2 sejteket gyakran használják toxikológiai vizsgálatokban a különböző anyagok citotoxicitásának és genotoxicitásának értékelésére. A toxikus anyagokra adott válaszuk betekintést nyújthat a hepatotoxicitásba és a májkárosodás hátterében álló mechanizmusokba
Bár a HepG2 sejtek számos alkalmazás szempontjából értékesek, vannak korlátaik, például a primer hepatocitákban megtalálható májspecifikus funkciók és enzimaktivitások hiánya. Ráadásul rákos sejtvonalként nem biztos, hogy teljes mértékben reprodukálják a normális májsejtek fiziológiáját
Igen, a HepG2 sejtek tenyészthetők háromdimenziós (3D) szferoidok kialakítására. Ezek a 3D kultúrák jobban utánozzák az in vivo tumorkörnyezetet, így fiziológiailag relevánsabb modellt kínálnak a sejtek viselkedésének, a gyógyszerek hatékonyságának és a rák progressziójának tanulmányozásához

Hivatkozások

  1. Vyas, R.C., Darroudi, F., Natarajan, A.T. Sugárzás által kiváltott kromoszómális törés és újraegyesülés emberi limfociták interfázis-metafázis kromoszómáiban, Mutat Res, 1991; 249(1):29-35.
  2. Woodfield, S.E., Shi, Y., Patel, R.H., Chen, Z., Shah, A.P., Srivastava, R.K., Whitlock, R.S., Ibarra, A.M., Larson, S.R., Sarabia, S.F., et al. MDM4 gátlás: egy új terápiás stratégia a P53 reaktiválására hepatoblastómában. Sci. Rep. 2021, 11, 2967.
  3. Hussain, S.P., Schwank, J., Staib, F., Wang, X.W., Harris, C.C. TP53 mutációk és hepatocelluláris karcinóma: betekintés a májrák etiológiájába és patogenezisébe. Oncogene 2004.
  4. Schicht, G., Seidemann, L., Haensel, R., Seehofer, D., Damm, G. A HepG2 és Huh7 hepatoma sejtvonalak használhatóságának kritikai vizsgálata a reszekálható hepatocelluláris karcinóma metabolikus reprezentációjának modelljeként. Cancers 2022, 14(17), 4227.
  5. Verrier, E.R., Colpitts, C.C., Schuster, C., Zeisel, M.B., Baumert, T.F. Sejtkultúra-modellek a hepatitis B és D vírusfertőzés vizsgálatához. Viruses 2016, 8, 261.
  6. Verrier, E.R., Colpitts, C.C., Bach, C., Heydmann, L., Weiss, A., Renaud, M., Durand, S.C., Habersetzer, F., Durantel, D., AbouJaoudé, G., et al. A célzott funkcionális RNS-interferencia szűrés feltárja, hogy a glikopán 5 a hepatitis B és D vírusok behatolási tényezője. Hepatology 2016, 63, 35–48.
  7. Gripon, P., Rumin, S., Urban, S., Le Seyec, J., Glaise, D., Cannie, I., Guyomard, C., Lucas, J., Trepo, C., Guguen-Guillouzo, C. Emberi hepatoma sejtvonal fertőzése hepatitis B vírussal. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2002, 99, 15655–15660.
  8. Mersch-Sundermann, V., Knasmüller, S., Wu, X.J., Darroudi, F., Kassie, F. Emberi eredetű májsejtvonal alkalmazása citoprotektív, antigénotoxikus és kogenotoxikus szerek kimutatására. Toxicology. 2004; 198(1–3): 329–340.
  9. Fanelli, A. HepG2 (májhepatocelluláris karcinóma): sejtkultúra. HepG2. Letöltve: 2017. december 3.
  10. Xuan, J., Chen, S., Ning, B., Tolleson, W.H., Guo, L. A citokróm P450-eket expresszáló, HepG2-ből származó sejtek kifejlesztése az anyagcserével összefüggő, gyógyszer által kiváltott májtoxicitás értékelésére. Physiol. Behav. 2017, 176, 139–148.
  11. Ooka, M., Lynch, C., Xia, M. Az in vitro metabolizmusaktiválás alkalmazása nagy áteresztőképességű szűrésben. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 8182.
  12. Huang, L., Coughtrie, M.W.H., Hsu, H. A dehidroepiandroszteron-szulfotranszferáz gén leregulációja humán hepatocelluláris karcinómában. Mol. Cell. Endocrinol.
  13. Zhu, Z., Hao, X., Yan, M., et al. A rákos őssejtek/elősejtek nagy arányban vannak jelen a CD133 + CD44 + populációban a hepatocelluláris karcinómában. Int J Cancer. 2010; 126:2067-2078.
  14. Arbus, C., Benyamina, A., Llorca, P.-M., Baylé, F., Bromet, N., Massiere, F., Garay, R.P., Hameg, A. A ciamemazin metabolizmusában részt vevő humán citokróm P450 enzimek jellemzése. Eur J Pharm Sci. 2007 dec.; 32(4-5):357-66.

Ez a weboldal cookie-kat használ, hogy a legjobb élményt nyújtsa a weboldalon... További információ.
- Imprint

Azt észleltük, hogy Ön egy másik országban él, vagy a jelenleg kiválasztottól eltérő böngészőnyelvet használ. Szeretné elfogadni a javasolt beállításokat?

Zárja be a