Hep3B sejtek: májsejtes karcinóma kutatása és felfedezése
A HEP3B egy halhatatlanná tett, emberi eredetű hepatocelluláris karcinóma sejtvonal. Széles körben használják a hepatotoxicitás és a gyógyszer-metabolizmus kutatásában. A HEP3B transzfekciós hatékonysága jelentős, ezért ezeket a sejteket gyakran alkalmazzák a májrák kialakulásának, progressziójának és terápiás beavatkozásoknak a tanulmányozására. Ez a cikk a HEP3B sejtvonalról szóló összes szükséges információt tartalmazza, hogy segítsen Önnek a vele való munkában. Főként a következőket tartalmazza:
- Növekedési tápközeg
- A HEP3B sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 2,2 g/l NaHCO3-t, 2 mM L-glutamint és Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) oldatot tartalmazó EMEM táptalajt használnak.
- Duplázódási idő
- A HEP3B sejtek duplázódási ideje körülbelül 36 óra.
- Növekedési típus
- Ez a hepatoma sejtvonal adhezív.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — HEP3B megrendelése
- A HEP3B sejtek általános jellemzői és eredete
- A HEP3B sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- HEP3B sejtvonal: Előnyök és korlátozások
- A HEP3B sejtek alkalmazása a kutatásban
- Kiadványok a HEP3B sejtvonalról
- Források a HEP3B sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- A HEP3B sejtek általános jellemzői és eredete
- A HEP3B sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- HEP3B sejtvonal: Előnyök és korlátozások
- A HEP3B sejtek alkalmazása a kutatásban
- 5. A HEP3B sejtvonalról szóló publikációk
- Források a HEP3B sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- Gyakran ismételt kérdések
A HEP3B sejtek általános jellemzői és eredete
A sejtvonalról szükséges legfontosabb információk az eredete és általános jellemzői. Ezek segítenek eldönteni, hogyan használja fel kutatásában, és segítenek a kezelésében. Ez a cikk a HEP3B eredetéről és jellemzőiről tartalmazza az összes lényeges információt. Itt megtudhatja: Mi az a Hep 3B sejtvonal? Mi a Hep3B sejtek eredete? Mi a HEP3B sejtek morfológiája?
- A HEP3B, egy folyamatos emberi hepatoma sejtvonal, egy 8 éves afrikai fiú májszövetéből származik, aki hepatocelluláris karcinómában (HCC) szenvedett. Aden és munkatársai hozták létre 1979-ben Barbara B. Knowles laboratóriumában, a Wistar Intézetben, Philadelphiában, az USA-ban [1].
- A HEP3B sejtek kromoszómájába integrálódott a hepatitis B vírus (HBV) genomja.
- Ezek a hepatocita karcinóma sejtek epiteliális morfológiát mutatnak.
- A HEP3B sejtek kromoszómaszáma általában 60. A HepG2-vel ellentétben nem rendelkeznek átrendeződött 1. kromoszómával.
Mi a különbség a HepG2 és a Hep3B között?
A HepG2 és a HEP3B sejtek kromoszómaszámában különböznek egymástól. A HEP3B sejtek 60 kromoszómát tartalmaznak, míg a HepG2 sejtek átlagosan 55 kromoszómával rendelkeznek. Ezenkívül a HepG2 sejtek nem tumorigenikusak és hepatitis B-negatívak, míg a HEP3B sejtek tumorigenikusak és HBV-pozitívak.
A HEP3B sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
A sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos ismeretek megkönnyíthetik a munkát. Ez a szakasz a HEP3B HBV sejtvonal tenyésztésének minden fontos szempontját tárgyalja, beleértve: Mennyi a Hep3B sejtek duplázódási ideje? Melyek a HEP3B tenyésztési feltételei? Hogyan tenyésztik a HEP3B HCC sejteket?
A HEP3B sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A HEP3B sejtek duplázódási ideje körülbelül 36 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
Ez a hepatoma sejtvonal adhezív.
Osztási arány:
A HEP3B sejteket 1:2–1:4 arányban szubkultiválják. Az adhezív HEP3B sejteket 1x PBS-sel öblítik, majd Accutase diszociációs oldattal inkubálják. 8–10 perc elteltével friss táptalajt adnak hozzá, és a sejteket centrifugálják. A learatott sejteket ezután óvatosan reszuszpendálják, és az ajánlott osztási arányban tenyésztőtáptalajt tartalmazó lombikokba öntik.
Növekedési tápközeg:
A HEP3B sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 2,2 g/l NaHCO3-t, 2 mM L-glutamint és Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) oldatot tartalmazó EMEM táptalajt használnak.
Növekedési feltételek:
A HEP3B sejteket 37 °C-os, párásított inkubátorban, folyamatos 5% CO2-ellátással tenyésztik.
Tárolás:
A fagyasztott HEP3B sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten tárolják elektromos fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
A HEP3B sejtekhez ajánlott fagyasztó tápközeg a CM-1 vagy a CM-ACF. A sejteket lassú fagyasztási eljárással fagyasztják, amely a sejtek életképességének megőrzése érdekében percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést engedélyez.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott sejteket 37 °C-ra előre beállított vízfürdőben 40–60 másodpercig felolvasztják. Ezután a sejteket friss tenyészközegbe helyezik, és centrifugálják, hogy eltávolítsák a fagyasztó közeg elemeit. Az összegyűjtött sejteket újra szuszpendálják, és új lombikokba helyezik tenyésztés céljából.
Biológiai biztonsági szint:
A HEP3B sejtek tenyésztéséhez 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges.
HEP3B sejtvonal: Előnyök és korlátok
A HEP3B egy széles körben használt hepatocelluláris karcinóma sejtvonal. Ez a szakasz a hepatoma sejtek néhány fő előnyére és korlátozására összpontosít.
Előnyök
A HEP3B sejtek fő előnyei a következők:
Könnyen tenyészthető
A HEP3B sejtek tenyésztése nem igényel különleges feltételeket, ezért könnyen kezelhetők és fenntarthatók a kutató laboratóriumokban. Ez egyszerűsíti a kísérleti eljárásokat.
Magas transzfekciós hatékonyság
A HEP3B sejtek kiemelkedő transzfekciós hatékonysággal rendelkeznek, ezért széles körben használják őket genetikai manipulációban és génkifejeződéssel kapcsolatos kutatásokban.
Tumorképző képesség
A HEP3B egy tumorigenikus hepatocelluláris karcinóma sejtvonal, amely immunhiányos egerekbe injekciózva képes tumorokat képezni. Ez elősegíti a rák progressziójának és fejlődésének tanulmányozását HEP3B xenotranszplantációs modellek segítségével.
HEP3B P53 státusz
A HEP3B sejtek a hepatocelluláris karcinómához (HCC) és más rákos megbetegedésekhez hasonló P53 génmutációval rendelkeznek, ami alkalmassá teszi őket a P53 mutáció rákos növekedésre, fejlődésre és progresszióra gyakorolt hatásainak tanulmányozására.
Korlátozások
A HEP3B sejtvonalhoz kapcsolódó korlátozás:
In vitro sejtmodell
A HEP3B sejtvonal a hepatocelluláris karcinóma (HCC) sejtjeinek in vitro modelljeként szolgál. Ugyanakkor előfordulhat, hogy nem tükrözi teljes mértékben a HCC élő szervezetekben megfigyelhető komplexitását. Következésképpen az in vitro kísérleti eredmények eltérhetnek az in vivo megfigyelésektől.
A HEP3B sejtek alkalmazása a kutatásban
A HEP3B sejtvonal számos alkalmazási lehetőséget kínál az orvostudományi kutatásban. A HEP3B sejtek legfontosabb kutatási alkalmazásai között szerepelnek a következők:
- Rákbiológia: A HEP3B egy humán hepatocelluláris karcinóma sejtvonal. Felbecsülhetetlen értékű sejtmodell a HCC kialakulásának és progressziójának alapjául szolgáló sejt- és molekuláris mechanizmusok vizsgálatához. A kutatók ezeket a sejteket használják a májrákkal kapcsolatos genetikai mutációk, sejtes folyamatok és sejtjelátviteli útvonalak tanulmányozására. Egy tanulmány például HEP3B sejteket használt, és megállapította, hogy a mikroRNS-223-3p szabályozza az NLRP3 inflammaszóm komponenseit, gátolja a proliferációt és fokozza a HEP3B hepatocarcinoma sejtek apoptózisát [2].
- Gyógyszerszűrés és -fejlesztés: A HEP3B sejtvonalat májkarcinóma elleni új terápiák tesztelésére, szűrésére és fejlesztésére is használják. Ezenkívül különböző rákellenes gyógyszerek és kezelések toxicitásának és hatékonyságának értékelésére is alkalmazzák. A kutatók ezeket a hepatoma sejteket a gyógyszer-metabolizmus tanulmányozására is használták. A kutatók HEP3B sejteket használtak, és értékelték a Cotinus coggygria növényi kivonat citotoxikus potenciálját HEP3B hepatocita karcinóma sejteken [3].
- Vírusfertőzések: A HEP3B egy hepatitis B vírussal fertőzött sejtvonal; ezért alkalmazzák olyan vírusfertőzések tanulmányozására, amelyek májrák kialakulásához vezethetnek, azaz a HBV és a HCV esetében. Ez segíthet a vírusfertőzések jobb megértésében és potenciális antivirális kezelések kifejlesztésében. Például egy tanulmányban HEP3B hepatocita ráksejteket használtak, és vizsgálták az ubikvitináció fontosságát a hepatitis C vírus terjedésében. Az eredmények arra utaltak, hogy az ubiquitin-specifikus proteáz 15 (USP15) részt vesz a HCV terjedésében a hepatocita-specifikus funkciók szabályozása révén, beleértve a lipidcseppek képződését és a HCV RNS transzlációját [4].
5. A HEP3B sejtvonalról szóló publikációk
A cikk ezen része néhány érdekes, a HEP3B sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációt ismertet.
Az apoptózis és az autofágia szabályozása luteolin hatására emberi májsejtes rákos Hep3B sejtekben
A Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) folyóiratban megjelent publikáció szerint a luteolin vegyület által kiváltott endoplazmatikus retikulum stressz P53-tól független módon gyakorolhat tumorellenes hatást a P53-hiányos HEP3B sejtekben.
Az Avicennia marinából izolált lupeol potenciális célzása a Hep3B májrákos sejtekre
Az Archiv der Pharmazie (2021) folyóiratban megjelent tanulmány egy pentacyclikus triterpenoidot, a lupeolt javasolta potenciális rákellenes szerként a HEP3B sejtek ellen.
Ez a cikk a Molecular Medicine Reports (2017) folyóiratban jelent meg. A tanulmány eredményei szerint a Cnidium monnieri (L.) Cusson etanolos kivonata a p53 és az Akt/GSK-3β jelátviteli út szabályozása révén sejthalált (apoptózist) és sejtciklus-leállást indukál a HepG2 és HEP3B hepatocarcinoma sejtekben.
A Biomolecules and Therapeutics (2020) folyóiratban megjelent kutatás szerint az auranofin szinergikus hatást fejt ki, és a PI3K/AKT útvonal aktiválása révén elősegíti a szulforafán által kiváltott apoptózist a HEP3B sejtekben.
A Circular RNA-0072309 a mikroRNS-665-öt célba véve tumorellenes hatást fejt ki a Hep3B sejtvonalban
A BioFactors (2023) folyóiratban megjelent kutatási cikk szerint a Circular RNA-0072309 a miRNA-665-re hatva fejt ki daganatellenes hatást a HEP3B hepatocelluláris karcinóma sejtekben.
Források a HEP3B sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
Az alábbiakban néhány, a HEP3B sejtekkel kapcsolatos forrás található:
- HEP3B transzfekció: Ez a videó bemutatja a HEP3B sejtek transzfekciós protokollját.
- HEP3B transzfekciós hatékonyság: Ez a link segít megismerni a HEP3B DMEM táptalaj összetételét, a sejtek átültetését és a HEP3B sejtek transzfekciós protokollját. Ezenkívül információkat nyújt a HEP3B lipofectamine 3000 reagens transzfekciós protokollban történő optimalizálásához.
Az alábbi link a HEP3B sejtkultúra protokollját tartalmazza:
- HEP3B tenyésztési feltételek: Ez a link segít megismerni a Huh7 és HEP3B tenyészetek kezelésének és fenntartásának protokollját.
- HEP3B sejtek: Ez a weboldal rengeteg információt tartalmaz a HEP3B sejtekről, beleértve a HEP3B táptalajokat, a sejtek osztásának, felolvasztásának, valamint a proliferatív és kriokonzervált tenyészetek kezelésének protokollját.
Hivatkozások
- Puttahanumantharayappa, L.D. és munkatársai, A hepatocelluláris karcinóma sejtvonalak eredete és tulajdonságai. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): 1040. o.
- Wan, L. és munkatársai, A miRNA-223-3p szabályozza az NLRP3-at, elősegítve az apoptózist és gátolva a HEP3B sejtek szaporodását. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): 2429–2435. o.
- Danjolli-Hashani, D. és S. Selen-Isbilir, A Cotinus coggygria kivonat citotoxikus hatása a Hep3B rákos sejtvonalra. Natural Product Research, 2022: 1-4. o.
- Kusakabe, S. és társai, Az USP15 a vírus RNS-transzlációjának és a lipidcseppek képződésének szabályozásán keresztül részt vesz a hepatitis C vírus terjedésében. Journal of Virology, 2019. 93(6): 10.1128/jvi. 01708-18.