Hep3B sejtek: Hepatocelluláris karcinóma kutatás és felfedezés
AHEP3B egy immortalizált, humán eredetű hepatocita karcinóma sejtvonal. Széles körben használják a hepatotoxicitás és a gyógyszer-metabolizmus kutatásában. A HEP3B transzfekciós hatékonysága jelentős, ezért ezeket a sejteket gyakran alkalmazzák a májrák kialakulásának, progressziójának és terápiás beavatkozásainak tanulmányozására. Ez a cikk a HEP3B sejtvonallal kapcsolatos összes szükséges információt tartalmazza, hogy segítse a vele való munkát. Elsősorban a következőket tartalmazza:
- A HEP3B sejtek általános jellemzői és eredete
- A HEP3B sejtvonallal kapcsolatos tenyésztési információk
- HEP3B sejtvonal: HEPB3 H3PHB: Előnyök és korlátok
- A HEP3B sejtek alkalmazása a kutatásban
- A HEP3B sejtvonallal kapcsolatos publikációk
- A HEP3B sejtvonal forrásai: Protokollok, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb
1.a HEP3B sejtek általános jellemzői és eredete
Egy sejtvonalról az elsődleges információ, amelyre szüksége van, az eredete és általános jellemzői. Ez segíthet eldönteni, hogy a kutatásban való felhasználását, és segíthet a kezelésében. Ez a szócikkrész a HEP3B eredetével és jellemzőivel kapcsolatos összes lényeges információt tartalmazza. Itt megtudhatja: Mi az a Hep 3B sejtvonal? Mi a Hep3B sejtek eredete? Milyen a HEP3B sejtek morfológiája?
- A HEP3B egy folyamatos humán hepatóma sejtvonal, amely egy 8 éves afrikai fiú májszövetéből származik, aki hepatocelluláris karcinómában (HCC) szenvedett. Aden és munkatársai 1979-ben hozták létre Barbara B. Knowles laboratóriumában, a philadelphiai Wistar Intézetben (Philadelphia, USA) [1].
- A HEP3B sejtek kromoszómájába a hepatitis B vírus (HBV) genomja integrálódott.
- Ezek a hepatocita karcinóma sejtek epithelialis morfológiát mutatnak.
- A HEP3B sejtek modális kromoszómaszáma 60. A HepG2-vel ellentétben nem rendelkeznek átrendezett 1-es kromoszómával.
Mi a különbség a HepG2 és a Hep3B között?
A HepG2 és a HEP3B a sejtenkénti kromoszómák számában különbözik. A HEP3B 60 kromoszómát tartalmaz, míg a HepG2 sejtek átlagosan 55 kromoszómával rendelkeznek. Ezenkívül a HepG2 nem tumorigén és hepatitis B negatív, míg a HEP3B tumorigén és HBV pozitív.
2.a HEP3B sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
Egy sejtvonal tenyésztési információinak ismerete megkönnyítheti a dolgát. Ez a szakasz a HEP3B HBV sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos összes kulcsfontosságú pontot tartalmazza, többek között: Mennyi a Hep3B sejtek megduplázódási ideje? Milyenek a HEP3B tenyésztési feltételek? Hogyan kell a HEP3B HCC sejteket tenyészteni?
A HEP3B sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A HEP3B sejtek megduplázódási ideje körülbelül 36 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
Ez a hepatóma sejtvonal adherens. |
|
Osztott arány: |
A HEP3B sejteket 1:2 és 1:4 arányban szubkultiválják. Az adherens HEP3B sejteket 1 x PBS-szel öblítjük, majd az Accutase disszociációs oldattal inkubáljuk. 8-10 perc elteltével friss médiumot adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk. A leszedett sejteket ezután óvatosan reszuszpendáljuk, és az ajánlott osztási arányban tenyésztőközeget tartalmazó lombikokba öntjük. |
|
Növesztőközeg: |
A HEP3B sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 2,2 g/L NaHCO3-t, 2 mM L-Glutamint és Earle kiegyensúlyozott sóoldatát (EBSS) tartalmazó EMEM táptalajt használunk. |
|
Növekedési feltételek: |
A HEP3B sejteket 37 °C-os, párásított inkubátorban, folyamatos 5%-os CO2-ellátás mellett tenyésztjük. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott HEP3B sejteket -150°C alatti hőmérsékleten, elektromos fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tároljuk. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A HEP3B sejtekhez ajánlott fagyasztási közeg a CM-1 vagy a CM-ACF. A sejteket lassú fagyasztási eljárással fagyasztják le, amely a sejtek életképességének védelme érdekében percenként csak 1°C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott sejteket 37 °C-ra előzetesen beállított vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk fel. Később ezeket a sejteket friss táptalajhoz adjuk, és centrifugálással eltávolítjuk a fagyasztási táptalaj elemeit. Az összegyűjtött sejteket újra szuszpendáljuk és új lombikokba adagoljuk a növekedéshez. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A HEP3B sejttenyésztéshez 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges. |
3.hEP3B sejtvonal: HEPBHP: Előnyök és korlátok
A HEP3B egy széles körben használt hepatocelluláris karcinóma sejtvonal. Ez a szakasz e hepatóma sejtek néhány kulcsfontosságú előnyére és korlátaira összpontosít.
Előnyök
A HEP3B sejtek fő előnyei a következők:
|
Könnyen tenyészthető |
A HEP3B sejteknek nincsenek kényes sejttenyésztési követelményei, így könnyen kezelhetők és karbantarthatók a kutatólaboratóriumban. Ez leegyszerűsíti a kísérleti eljárásokat. |
|
Magas transzfekciós hatékonyság |
A HEP3B sejtek figyelemre méltó transzfekciós hatékonysággal rendelkeznek, így széles körben használják őket a genetikai manipuláció és a génexpresszióval kapcsolatos vizsgálatok során. |
|
Tumorigenitás |
A HEP3B egy tumorigén hepatocelluláris karcinóma sejtvonal, amely képes tumorok kialakítására, ha immunhiányos egérbe injektálják. Ez segíti a rák progressziójának és fejlődésének tanulmányozását a HEP3B xenograft modellek segítségével. |
|
HEP3B P53 státusz |
A HEP3B sejtek a hepatocelluláris karcinómához (HCC) és más rákos megbetegedésekhez hasonló P53 génmutációval rendelkeznek, így fontosak a P53 mutációnak a rák növekedésére, fejlődésére és progressziójára gyakorolt hatásának tanulmányozásához. |
Korlátozások
A HEP3B sejtvonallal kapcsolatos korlátozás a következő:
|
In vitro sejtmodell |
A HEP3B sejtvonal a hepatocelluláris karcinóma (HCC) sejtek in vitro modelljeként szolgál. Ez azonban nem feltétlenül reprezentálja teljes mértékben a HCC élő szervezetekben megtalálható komplexitását. Következésképpen az in vitro kísérleti eredmények eltérhetnek az in vivo megfigyelt eredményektől. |
4.a HEP3B sejtek alkalmazása a kutatásban
A HEP3B sejtvonal számos kutatási alkalmazást kínál az orvosbiológiai kutatásban. A HEP3B sejtek néhány kulcsfontosságú kutatási alkalmazása a következő:
- Rákbiológia: A HEP3B egy humán hepatocelluláris karcinóma sejtvonal. Felbecsülhetetlen értékű sejtmodell a HCC kialakulásának és progressziójának hátterében álló sejt- és molekuláris mechanizmusok vizsgálatához. A kutatók ezeket a sejteket a genetikai mutációk, a sejtfolyamatok és a májrákkal összefüggő sejtszignál-útvonalak tanulmányozására használják. Egy tanulmány például a HEP3B sejteket használta, és megállapította, hogy a mikroRNS-223-3p szabályozza az NLRP3 inflammaszóma komponenseit, gátolja a proliferációt, és fokozza a HEP3B hepatokarcinóma sejtek apoptózisát [2].
- Gyógyszer-szűrés és fejlesztés: A HEP3B sejtvonalat májkarcinóma elleni új terápiás szerek tesztelésére, szűrésére és fejlesztésére is használják. Ezenkívül a különböző rákellenes gyógyszerek és kezelések toxicitásának és hatékonyságának értékelésére is használják. A kutatók ezeket a hepatomasejteket a gyógyszer-metabolizmus tanulmányozására is felhasználták. A kutatók HEP3B sejteket használtak, és felmérték a Cotinus coggygria növényi kivonat citotoxikus potenciálját a HEP3B hepatocita karcinóma sejteken [3].
- Vírusfertőzések: A HEP3B egy hepatitis B vírus pozitív sejtvonal, ezért olyan vírusfertőzések, azaz a HBV és a HCV tanulmányozására használják, amelyek májrák kialakulásához vezethetnek. Ez segíthet a vírusfertőzések jobb megértésében és a potenciális vírusellenes kezelések kifejlesztésében. Egy tanulmány például HEP3B hepatocita rákos sejteket használt, és az ubikvitináció jelentőségét vizsgálta a hepatitis c vírus terjedésében. Az eredmények azt sugallták, hogy az ubikvitin-specifikus 15-ös proteáz (USP15) részt vesz a HCV terjedésében a hepatocita-specifikus funkciók szabályozásán keresztül, beleértve a lipidcseppképződést és a HCV RNS-transzlációt [4].
5.a HEP3B sejtvonallal kapcsolatos publikációk
A cikknek ez a része a HEP3B sejtekkel kapcsolatos néhány érdekes kutatási publikációval foglalkozik.
A Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) című szaklapban megjelent publikáció azt javasolta, hogy a luteolin vegyület által kiváltott endoplazmatikus retikulum stressz P53-null HEP3B sejtekben P53-független módon fejthet ki tumorellenes hatást.
A Hep3B májráksejtek potenciális célzott kezelése az Avicennia marina-ból izolált lupeol által
Az Archiv der Pharmazie (2021) című folyóiratban megjelent tanulmány egy pentaciklusos triterpenoidot, a lupeolt, mint potenciális rákellenes hatóanyagot javasolta a HEP3B sejtek ellen.
Ez a cikk a Molecular Medicine Reports (2017) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány eredményei szerint a Cnidium monnieri (L.) Cusson etanolos kivonata a p53 és az Akt/GSK-3β jelátviteli útvonal szabályozásán keresztül sejtpusztulást (apoptózist) és sejtciklus-megállást indukál a HepG2 és HEP3B hepatocarcinoma sejtekben.
A Biomolecules and Therapeutics (2020) című szaklapban megjelent kutatás azt javasolta, hogy az auranofin szinergista hatást mutat, és a PI3K/AKT jelátviteli útvonal aktiválásán keresztül elősegíti a HEP3B sejtek szulforafán által közvetített apoptózisát.
A BioFactors (2023) című szaklapban megjelent kutatási cikk azt javasolta, hogy a cirkuláris RNS-0072309 tumorellenes hatást fejt ki a HEP3B hepatocelluláris karcinóma sejtekben a miRNS-665 megcélzásán keresztül.
6.források a HEP3B sejtvonalhoz: HEP3B3 H3P3: Protokollok, videók és egyéb: Protokollok, videók és egyéb
Az alábbiakban néhány, a HEP3B sejtekkel kapcsolatban rendelkezésre álló forrás található:
- HEP3B transzfekció: Ez a videó elmagyarázza a HEP3B sejtek transzfekciós protokollját.
- HEP3B transzfekciós hatékonyság: Ez a link segít megismerni a HEP3B DMEM médium összetételét, a sejtek passzázsát és a HEP3B sejtek transzfekciós protokollját. Ezenkívül információt nyújt a HEP3B lipofectamine 3000 reagens optimalizálásához a transzfekciós protokollban.
Az alábbi link tartalmazza a HEP3B sejttenyésztési protokollt:
- HEP3B tenyésztési feltételek: Ez a link segít megismerni a Huh7 és HEP3B tenyészetek kezelésére és fenntartására vonatkozó protokollt.
- HEP3B sejtek: Ez a weboldal rengeteg információt tartalmaz a HEP3B sejtekről, beleértve a HEP3B médiumokat, a sejtek felosztásának protokollját, a felolvasztást, valamint a proliferatív és kriokonzervált kultúrák kezelését.
Hivatkozások
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al., MiRNS-223-3p szabályozza az NLRP3-at, hogy elősegítse az apoptózist és gátolja a hep3B sejtek proliferációját. Kísérleti és terápiás orvostudomány, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. és S. Selen-Isbilir, A Cotinus coggygria kivonat citotoxikus hatása a Hep3B rákos sejtvonalon. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., Az USP15 részt vesz a hepatitis C vírus terjedésében a vírus RNS transzlációjának és a lipidcseppképződés szabályozásán keresztül. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.