CAL27 sejtek - A fej- és nyaki rák fókuszált vizsgálata a CAL27 sejtek segítségével
ACAL27 az egyik leggyakrabban használt szájüregi laphámsejtes karcinóma sejtvonal az orvosbiológiai kutatásban. Értékes eszköz a laphámsejtes daganatok, köztük a tumor növekedésének, fejlődésének, valamint a mögöttes sejtes és molekuláris mechanizmusok tanulmányozására. Emellett megkönnyíti a rákellenes gyógyszerek szűrését és tesztelését is.
Ez a cikk értékes betekintést nyújt Önnek a CAL27 sejtvonalról, és a következő témákkal foglalkozik:
- A CAL27 sejtek eredete és általános jellemzői
- A CAL27 sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
- CAL27 sejtvonal: Előnyök és hátrányok
- A CAL27 sejtek alkalmazása a kutatásban
- A CAL27 sejtvonalat tartalmazó publikációk
- A CAL27 sejtvonal forrásai: Jegyzőkönyvek, videók, és még sok más
1. A CAL27 sejtek eredete és általános jellemzői
Az első dolog, amit egy sejtvonalról tudnia kell, az az eredete és általános jellemzői, amelyek megkülönböztetik más sejtvonalaktól. A cikk ezen szakasza a CAL27 sejtekkel kapcsolatos elsődleges információkat foglalja magában. Megtudhatja: Mi a CAL27 sejtmodell? Mi a CAL27 HPV? Mi a CAL27 HER2 státusza? Mi a CAL27 sejtvonal eredete? Milyen a CAL27 sejtek morfológiája? Mi a CAL27 sejtek mérete?
- A szájüregi laphámsejtes rákos sejtvonalat, a CAL27-et egy 56 éves fehér férfi nyelvi laphámsejtes karcinóma betegséggel jelentkező nyelvszövetéből fejlesztették ki. A sejtvonalat 1982-ben Gioanni és munkatársai hozták létre [1].
- A CAL27 rákos sejtek epithelszerű morfológiát mutatnak.
- Ezek a sejtek aneuploid kariotípussal rendelkeznek. Modális kromoszómaszámuk 43.
2.a CAL27 sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
A sejtvonal egyszerű és megvalósítható fenntartásához ismernie kell a sejtvonal legfontosabb sejttenyésztési követelményeit. Ez a szakasz a CAL27 sejtvonallal kapcsolatos fontos sejttenyésztési fogalmakkal foglalkozik. Tudnia kell: Mennyi a CAL27 sejtvonal megduplázódási ideje? Milyen a CAL27 sejtmédia? Mi a CAL27 sejtvonal szubkultiválási aránya? Melyek a CAL27 tenyésztési feltételei? Hogyan kell a CAL27 sejteket tenyészteni?
A CAL27 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A CAL27 sejtek mérsékelt növekedési sebességet mutatnak, a populáció megduplázódási ideje körülbelül 45 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
Ezek a sokszögletű CAL27 sejtek a tenyésztőedény felszínéhez tapadnak és monoréteggé nőnek. |
|
Osztott arány: |
A CAL27 sejteket 1:2 és 1:4 közötti osztott arányban szubkultiválják. A szubkultiváláshoz a tapadó sejteket magnézium- és kalciummentes foszfátpuffer sóoldattal (1x) mossuk. Ezt követően a sejteket Accutase-zal (passaging oldat) inkubáljuk szobahőmérsékleten 8-10 percig. A levált sejteket friss tápfolyadékkal adjuk hozzá és centrifugáljuk. Az összegyűjtött pelletet ezután óvatosan reszuszpendáltuk, és a növekedési tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba öntöttük. |
|
Növesztőközeg: |
A CAL27 sejtvonal tenyésztéséhez 10% FBS-szel, 4,5 g/L glükózzal, 4 mM L-Glutaminnal, 1,5 g/L NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal kiegészített DMEM táptalajt használunk. A tápfolyadékot hetente 2-3 alkalommal kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A CAL27 sejttenyészeteket 37°C-on, 5%-os CO2-ellátással párásított inkubátorban tartjuk. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott CAL27 sejteket vagy folyékony nitrogén gőzfázisában, vagy -150°C alatti hőmérsékleten, ultra alacsony hőmérsékletű fagyasztóban tartják hosszabb ideig. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A CAL27 sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközeg ajánlott. Ehhez lassú fagyasztási folyamat ajánlott, amely a sejtek életképességének védelme érdekében percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé. |
|
Kiolvasztási folyamat: |
A fagyasztott sejtek üvegeit 40-60 másodpercre 37 °C-ra előzetesen beállított vízfürdőbe helyezzük, amíg egy kis jégcsomó nem marad. A sejtekhez friss tápfolyadékot adunk és centrifugáljuk. Ezt követően a fagyasztó médiumot eltávolítjuk, a sejtpelletet friss tápfolyadékkal adjuk hozzá, és óvatosan reszuszpendáljuk. A sejteket ezután új lombikokba adagoljuk a növekedéshez. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A CAL27 sejtkultúrák kezeléséhez és fenntartásához 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumi beállítások szükségesek. |
3.cAL27 sejtvonal: Előnyök és hátrányok
A CAL27 egy széles körben használt orális laphámsejtes karcinóma sejtvonal. Ez a szakasz kiemel néhány jelentős előnyt és hátrányt ezekkel a rákos sejtekkel kapcsolatban.
Előnyök
A CAL27 sejtvonal fő előnyei a következők:
|
Tumorigenitás |
A CAL27 sejtvonal tumorigén potenciállal rendelkezik. Ezek a sejtek nude vagy immunkompromittált egerekbe történő befecskendezéskor tumorokat képesek kifejleszteni. Ez segíthet a kutatóknak a tumorbiológia és a mikrokörnyezet mélyebb megértésében. |
|
Genetikai mutációk |
A CAL27 sejtek specifikus genomiális elváltozásokat hordoznak, mint például a CAL27 P53, amely gyakran előfordul a szájüregi laphámsejtes karcinómában. Így a CAL27 használata előnyös lehet az ilyen mutációknak a rák növekedésére, fejlődésére és progressziójára gyakorolt hatását vizsgáló kutatók számára. |
|
Könnyen tenyészthető |
A CAL27 szájüregi laphámsejtvonalnak nincsenek kényes sejttenyésztési követelményei. Így könnyen tenyészthető és karbantartható a kutatólaboratóriumokban. |
Hátrányok
A CAL27 sejtvonalhoz kapcsolódó hátrányok a következők:
|
In vitro modell |
A CAL27 sejtek a szájüregi laphámsejtes karcinóma in vitro modelljeként szolgálnak. Fontos azonban megjegyezni, hogy ezek nem feltétlenül tükrözik pontosan az eredeti laphámsejtes daganatok jellemzőit és összetettségét. |
4.a CAL27 sejtek alkalmazása a kutatásban
A CAL27 sejtvonal széleskörűen alkalmazható az orvosbiológiai kutatásban. Néhány fontos kutatási felhasználási módot itt sorolunk fel.
- Rákbiológia: A CAL27 sejteket széles körben használják a szájüregi laphámsejtes karcinóma (OSCC) kialakulásának és progressziójának hátterében álló molekuláris és sejtes mechanizmusok feltárására. A kutatók genetikai mutációkat, jelátviteli útvonalakat és a laphámsejtes daganatokkal kapcsolatos fontos biomarkereket is vizsgálnak. Egy 2021-ben végzett tanulmányban CAL27 sejteket használtak, és a CD147 szerepét vizsgálták a szájüregi laphámsejtes rák kialakulásában. A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a CD147 kiütése a CAL27 sejtek proliferációjának, migrációjának és inváziójának gátlását okozta. Emellett a downregulációja a rákos sejtek gyógyszerrezisztenciájának kialakulását is akadályozza [2].
- Gyógyszerfejlesztés: A CAL27 sejtvonal értékes eszközként szolgál a daganatellenes gyógyszerek szűrésére és tesztelésére. A kutatók ezeket a sejteket használják a különböző kemoterápiás szerek, célzott terápiák és kísérleti gyógyszerek hatékonyságának tesztelésére a szájüregi rákos sejtek proliferációjának, növekedésének és életképességének gátlásában. Ezen túlmenően a potenciális rákellenes szerek moduláló hatását is értékelték a rákos sejtek diszregulált jelátviteli útvonalaira. Ez segíthet a betegség elleni hatékony és személyre szabott kezelések kifejlesztésében. Egy tanulmány a cink-oxid nanorészecskék daganatellenes potenciálját vizsgálta CAL27 sejtek felhasználásával. A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a cink-oxid nanorészecskék citotoxikus hatást fejtettek ki, és a PINK1/Parkin útvonal által közvetített mitofágiát is indukálták a CAL27 nyelvráksejtekben [3]. Hasonlóképpen, a kutatók megfigyelték a doxorubicin és annak nano-formulált formája (Doxil) rákellenes potenciálját a CAL27 szájüregi laphámsejtes rákon [4].
5.cAL27 sejtvonalat tartalmazó publikációk
Ez a rész a CAL27 rákos sejtekkel kapcsolatos néhány érdekes és legtöbbet idézett publikációval foglalkozik:
Ez a kutatás a Frontiers in Oncology (2020) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány a vismodegib vagy az itrakonazol szájüregi laphámrák elleni hatását vizsgálta CAL27 sejtek segítségével.
A Frontiers in Genetics (2021) című szaklapban megjelent cikk azt javasolta, hogy a plazminogén-aktivátor, az urokináz (PLAU) fehérje elősegíti a CAL27 sejtek proliferációját, migrációját és epiteliális-mesenchymális átmenetét (EMT).
Az Experimental and Therapeutic Medicine (2021) című szaklapban megjelent cikk szerint a miRNS-145-5p súlyosbítja a CAL27 sejtek oxidatív stresszét és halálát, valamint elnyomja a PI3K/AKT jelátviteli útvonalat.
A morin növényi kivonat tumorellenes aktivitása nyelv laphámsejtes karcinóma sejtekben
Az Oncology Reports (2018) című szaklapban megjelent tanulmány egy morin nevű bioflavonoid rákellenes hatását vizsgálta a CAL27 sejtek felhasználásával.
A Journal of Ethnopharmacology (2023) című folyóiratban megjelent cikk a Rosmarinus officinalis L. és a Taraxacum officinale kivonatok terápiás potenciálját vizsgálta a CAL27 sejteken.
6.források a CAL27 sejtvonalhoz: Jegyzőkönyvek, videók, és még sok más
A CAL27 sejtvonallal kapcsolatban korlátozott számú forrás áll rendelkezésre. Ebben a részben néhány általános protokollt soroltunk fel, amelyek a CAL27 sejtekkel való foglalkozásban is segíthetnek:
- CAL27 sejtek transzfekciója: Ez a videó segít elsajátítani egy általános protokollt a plazmid DNS transzfekcióhoz.
- Adherens sejtek szubkultiválása: Ez a videó átfogóan eligazítja Önt az adherens sejtvonalak szubkultiválásáról.
Az alábbi link tartalmazza a CAL27 sejttenyésztési protokollt.
- CAL27 sejtvonal: Ez a weboldal információkat tartalmaz a CAL27 táptalajról, a vetési sűrűségről, a megduplázódási időről stb. Emellett tartalmaz egy protokollt a szubkultúrázásra és a proliferáló és kriokonzervált tenyészetek kezelésére.
Hivatkozások
- Liu, X., et al., A LINC00472 elnyomja a szájüregi laphámsejtes karcinóma növekedését a miR-455-3p/ELF3 tengely megcélzásával. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., A CD147 kiütése gátolja a humán szájüregi rákos CAL27 sejtek proliferációját, invázióját és gyógyszerrezisztenciáját in Vitro és in Vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al., Cink-oxid nanorészecskék toxicitást indukálnak a CAL 27 szájüregi rákos sejtvonalakban a PINK1/Parkin által közvetített mitofágia aktiválásával. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen és A.M.S. Eldeen, Liposzómával bevont nano doxorubicin apoptózist indukál a szájüregi laphámsejtes karcinóma CAL-27 sejteken. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.