BEWO sejtvonal

ABeWo egy humán koriokarcinómából származó, az orvosbiológiai kutatásokban széles körben használt sejtvonal. Értékes in vitro modellként szolgál a placenta fejlődésének bonyolult folyamatának és a humán trofoblasztok szinkronizációjának feltárására. A kutatók ezeket a sejteket a trofoblaszt sejtek viselkedésének, a hormontermelésnek és a placentán keresztüli anyagszállításnak a tanulmányozására is használják. Emellett a BeWo sejtek a toxikológia, a fertőzések és a betegségek átvitelének vizsgálatában is alkalmazhatók.

Ez a cikk alapvető ismereteket tartalmaz a BeWo sejtekről, amelyek segíthetnek Önnek abban, hogy kutatásai során foglalkozzon velük. A cikk tartalmazza többek között a következőket:

  1. A BeWo sejtek általános jellemzői és eredete
  2. BeWo sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk
  3. A BeWo sejtvonal előnyei és hátrányai
  4. A BeWo sejtek kutatási alkalmazásai
  5. BeWo sejteket tartalmazó kutatási publikációk
  6. Források a BeWo sejtvonalhoz: Protokollok, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb

1. A BeWo sejtek általános jellemzői és eredete

Egy sejtvonal eredetének és általános jellemzőinek előzetes ismerete döntő fontosságú a kutatásban való felhasználás szempontjából. A cikk ezen része a BeWo sejtvonal eredetét, jellemző tulajdonságait és még sok mást vizsgál. Itt megtudhatja: Mi a BeWo choriocarcinoma sejtvonal? Mi az a BeWo szinkronizáció? Honnan származnak a BeWo sejtek? Milyen a BeWo sejtmorfológia? Milyen a BeWo ploidia?

  • A BeWo placenta sejtvonal egy férfi magzati placenta rosszindulatú terhességi koriokarcinómájából származik 1968-ban [1]. Így felbecsülhetetlen értékű modellként szolgál a placentakutatásban.
  • A BeWo sejtek epithelszerű morfológiát mutatnak.
  • A BeWo sejtek viszonylag kicsik, 20-30 µm közöttiek [2].
  • A BeWo sejtek stabil kariotípust mutatnak. Ősvonalszámuk hipo-tetraploid. A BeWo sejtek modális kromoszómaszáma 86. Ez 71 és 178 között változhat.
  • A BeWo sejtek több hormont termelnek, azaz humán korionos szomatomammotropint, humán korionos gonadotropint (hCG) és szteroid hormonokat.
  • A BeWo sejtek molekuláris markereket expresszálnak, többek között a CK 7-et, az E-kadherint és a VE-kadherint.

B30 alvonal

A B30 a BeWo sejtek alvonala. A tápanyagok felvételének és szállításának vizsgálatára használják. Ez annak tulajdonítható, hogy erőteljes növekedésük porózus membránokon történik.

BeWo és JEG-3

A BeWo JEG-3 sejtvonalak choriocarcinomából származnak, és a placentakutatásban használják őket. A BeWo sejtek alacsonyabb szinten termelnek hormonokat, mint a JEG-3, például humán koriongonadotropint (hCG) és ösztradiolt.

Az emberi petesejt termékenységének time-lapse vizualizációja, amely a blasztociszta kialakulásának szakaszait szemlélteti, mikroszkóp alatt megfigyelve.

2. BeWo sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk

Egy sejtkultúra fenntartása trükkös lehet, ha nem ismeri a legfontosabb részleteket. Ilyenek például: Mi a BeWo megduplázódási ideje? Milyen a BeWo sejtmédia? Hogyan kell a BeWo sejtvonalat tenyészteni, és hogyan kell a BeWo sejteket lefagyasztani?

A BeWo sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai

Megduplázódási idő:

A BeWo sejtek populációduplázódási ideje körülbelül 30 óra.

Adhezív vagy szuszpenzióban:

A BeWo egy adherens sejtvonal.

Sejtbeültetési sűrűség:

A BeWo sejtek ajánlott vetési sűrűsége 1 x104 sejt/cm2. A beültetéshez a régi médiumot eltávolítjuk a sejtekről, és a sejteket 1 x PBS-szel öblítjük. Ezután Accutase-t (passzázsoldat) adunk hozzá, és a sejteket 8-10 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk. Ezután a leválasztott sejtekhez tápfolyadékot adunk és centrifugáljuk. A leszedett sejteket ezután reszuszpendáljuk és új lombikba öntjük.

Növesztőközeg:

A BeWo sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 2,0 mM L-Glutamint, 2,0 mM nátrium-piruvátot és 2,5 g/L NaHCO3-t tartalmazó Ham's F12K táptalajt használunk. A BeWo sejtek táptalaját hetente 2-3 alkalommal kell cserélni.

Növekedési feltételek:

A BeWo sejteket 37 Celsius-fokos hőmérsékleten, 5%-os CO2-ellátás mellett párásított inkubátorban tartjuk.

Tárolás:

A fagyasztott BeWo sejteket -150 °C alatt, elektromos ultraalacsony hőmérsékletű fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják.

Fagyasztási folyamat és közeg:

A BeWo sejteket CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközegben ajánlott fagyasztani. A sejteket lassú fagyasztási módszerrel fagyasztják le. Ez a módszer percenként csak 1 fokos hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, így a sejtek nem szenvednek sokkot, és a sejtek életképessége is megmarad.

Felolvasztási folyamat:

A fagyasztott sejteket úgy olvasztjuk fel, hogy 40-60 másodpercre előre beállított 37 °C-os vízfürdőbe merítjük őket, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Ezután friss táptalajt adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk, hogy eltávolítsuk a fagyasztási táptalaj összetevőit. Az összegyűjtött sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a növekedéshez tenyésztőlombikba adagoljuk.

Biológiai biztonsági szint:

A BeWo sejtkultúrák kezeléséhez és fenntartásához 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges.

A BEWO nevű humán choriocarcinoma sejtvonal epithelialis, poligonális morfológiájának és szigetszerű növekedésének megörökítése 10x és 20x nagyítással a mikroszkóp alatt.

3. A BeWo sejtvonal előnyei és hátrányai

A BeWo sejtek egyedi tulajdonságokkal rendelkeznek, és sajátos előnyökkel és hátrányokkal járnak. Ebben a szakaszban néhány figyelemre méltó közülük kerül megvizsgálásra.

Előnyök

A BeWo choriocarcinoma sejtvonal fő előnyei a következők:

  • In vitro placenta sejtmodell

    A BeWo sejtek in vitro modellt biztosítanak a trofoblaszt sejtek viselkedésének és a placenta szincionalizációjának tanulmányozására, megismételve az in vivo megfigyelni kihívást jelentő folyamatokat.

  • Hormontermelés

    A BeWo sejtek hormonokat, például hCG-t és placenta laktogént választanak ki, így értékesnek bizonyulnak a hormonális szabályozás tanulmányozásához és a reproduktív biológia kutatásához.

Hátrányok

A BeWo trofoblaszt sejtek hátrányai a következők:

  • Rákos sejtvonal

    A BeWo sejtek choriocarcinomából származnak, ami egy placenta tumor. Ez a származás nem biztos, hogy teljes mértékben reprezentálja a normális placentasejtek működését.

4. A BeWo sejtek kutatási alkalmazásai

A BeWo sejtvonalat széles körben használják a placentakutatásban. A következőkben e sejtvonal néhány meghatározott alkalmazását említjük meg:

  • Placenta és terhességgel kapcsolatos kutatások: A BeWo sejtek kulcsfontosságúak a placenta és a terhességgel kapcsolatos kutatásokban. A kutatók például arra használják ezeket a sejteket, hogy tanulmányozzák az anyagok, köztük a gyógyszerek, tápanyagok és toxinok placentáris gáton keresztüli szállítását. Emellett a hormonok, köztük a humán koriongonadotropin (hCG), a placenta laktogén és a szteroid hormonok termelését és szabályozását is vizsgálják. Ez fontos a terhesség alatti hormonális változások megértéséhez. A 2018-ban végzett kutatás a brómozott égésgátlók (BFR) hatását vizsgálta a szulfotranszferáz aktivitására a humán trofoblasztos sejtvonalban (BeWo). Ez az enzim részt vesz a pajzsmirigyhormon intracelluláris szintjének szabályozásában [3].
  • Fertőzés és betegségkutatás: A BeWo sejteket a kórokozók és a placentasejtek közötti kölcsönhatás vizsgálatára is alkalmazzák. Ez a kutatás értékes az anyáról a magzatra átvihető betegségek megértéséhez és a magzati egészség védelmét szolgáló stratégiák kidolgozásához. Ezenkívül ez a sejtvonal segít a kutatóknak a terhesség során fellépő komplikációk, például a preeklampszia vizsgálatában. Michalina Bralewska 2023-ban végzett tanulmánya például a BeWo trofoblaszt sejtmodellt használta, és megállapította, hogy mind a kromogranin A (CgA), mind a belőle származó peptid, a katestatin (CST) szerepet játszhat a preeklampszia (PE) patogenezisének bonyolult folyamatában [4]. Továbblépve, egy másik tanulmány a BeWo choriocarcinoma sejtvonal felhasználásával vizsgálta a trichosantin rákellenes potenciálját. A kutatás külön erőfeszítést tett a biomarkerek felfedezésére is, összehasonlító proteomikai elemzést végeztek a kísérlet előtt és után [5].

5. Kutatási publikációk a BeWo Cells közreműködésével

Íme néhány jelentős kutatási publikáció, amelyekben a BeWo trofoblaszt sejtek szerepelnek.

Az AMPK jelátvitel szabályozza a mitofágiát és a mitokondriális ATP-termelést a BeWo humán trofoblaszt sejtvonalban

A Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) című folyóiratban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy az AMPK jelátvitel aktiválja a mitofágiát a BeWo trofoblaszt sejtekben a FUNDC1 és a PRKN által elősegített mitofágia útvonalakon keresztül. Ennek eredményeképpen a mitofágia segít fenntartani az ATP-termelést és a mitokondriális membránpotenciált.

Az etilparabén apoptotikus sejthalált indukál a humán placenta BeWo sejtekben a kaszpáz-3 útvonalon keresztül

Ez a cikk az Animal Cells and Systems (2020) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt javasolta, hogy az etilparaben a kaszpáz-3 útvonal szabályozásán keresztül közvetíti a BeWo sejtek apoptózisát.

Humán placenta szövet- és sejtvonalak (BeWo, JEG-3, JAR és HTR-8/SVneo) xenobiotikus és szteroid diszpozíciós potenciáljának jellemzése kvantitatív proteomikai módszerekkel

A Drug Metabolism and Disposition (2023) című folyóiratban megjelent tanulmány a placenta sejtvonalakat, köztük a BeWo, JAR, JEG-3 és HTR-8/SVneo sejteket használta fel a xenobiotikumok és szteroidok sejtekben történő lerakódásának vizsgálatára.

Apelin és apelin receptor a humán placentában: JEG-3 és BeWo trofoblaszt sejtek proliferációjának és sejtciklusának expressziója, jelátviteli útvonala és szabályozása

Az International Journal of Molecular Medicine (2020) című folyóiratban megjelent kutatási cikk azt javasolta, hogy az APJ receptor ligandja, az apelin az APJ és az ERK1/2, stat3 és AMPK jelátvitel révén elősegíti a BeWo sejtek proliferációját. Így ez egy lényeges adipokin lehet, amely szabályozza a méhlepény fejlődését.

Görcsoldó gyógyszerek és magzati tápanyagok: hatások a kolin transzporterekre egy humán placenta sejtvonalban

Az Epilepsia (2021) című folyóiratban megjelent tanulmány a magzati tápanyagok és a rohamellenes szerek kolin-transzporterekre gyakorolt hatását vizsgálta a BeWo humán trofoblasztikus sejtvonalban.

6. Források a BeWo sejtvonalhoz: BeoWo: protokollok, videók és egyéb

Az alábbiakban néhány online forrás áll rendelkezésre a BeWo sejtekkel kapcsolatban:

  • In vitro transzfekció: Ez a videó segít elsajátítani az in vitro plazmid DNS transzfekciós protokollt adherens sejtekhez.

Az alábbi link a BeWo sejtekre vonatkozó sejttenyésztési információkat tartalmazza:

  • BeWo sejtek: Ez a weboldal a BeWo sejtvonalra vonatkozó alapvető sejttenyésztési információkat tartalmaz. Ez magában foglalja a sejtmédiumokra és a tenyésztési körülményekre vonatkozó információkat. A szubkultúrázásra és a kriokonzervált és proliferatív kultúrák kezelésére vonatkozó protokollokat is tartalmaz.

Hivatkozások

  1. Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., A trofoblasztok jellemzői hosszú távú tenyésztésben. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt és H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
  5. Hu, Y., et al., Összehasonlító proteomikai elemzés a BeWo sejtvonalhoz adott trichosanthin hatóanyag hozzáadásáról. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.

Azt észleltük, hogy Ön egy másik országban él, vagy a jelenleg kiválasztottól eltérő böngészőnyelvet használ. Szeretné elfogadni a javasolt beállításokat?

Zárja be a