BxPC-3 sejtvonal
ABxPC-3 egy humán eredetű hasnyálmirigyrák sejtvonal. Széles körben alkalmazzák a rákkutatásban. A kutatók elsősorban a hasnyálmirigyrák biológiájának tanulmányozására, terápiás célpontok azonosítására és rákellenes gyógyszerek kifejlesztésére használják ezeket a sejteket.
Ez a cikk a BxPC-3 sejtvonallal kapcsolatos kulcsfontosságú információkat tartalmaz, amelyek jelentősen segíthetik a vele való munkát. Elsősorban a következőket tárgyalja:
- Általános információk és a BxPC-3 sejtvonal eredete
- A BxPC-3 sejtek tenyésztése
- BxPC-3 sejtvonal: BPCx Bxxx Bxxx-3: Előnyök és korlátozások: Előnyök és korlátozások
- A BxPC-3 sejtek alkalmazása a kutatásban
- A BxPC-3 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
- A BxPC-3 sejtvonal forrásai: Protokollok, videók és még sok más
1. általános információk és a BxPC-3 sejtvonal eredete
Egy sejtvonal eredetének ismerete kritikus fontosságú annak kutatási alkalmazhatósága szempontjából. Jellemzőinek, többek között morfológiájának, sejtméretének és ploidiájának ismerete egyszerűbbé és kényelmesebbé teszi a használatát. Az alábbiakban megismerheti a BxPC-3 sejtek eredetét és általános jellemzőit: Mik azok a BxPC-3 sejtek? Mi a BxPC-3 sejtvonal? Mi a BxPC-3 sejtvonal eredete? Milyen a BxPC-3 morfológiája?
- A BxPC-3, humán hasnyálmirigy-karcinóma sejtek egy 61 éves európai nőből származnak, akinek 1986-ban hasnyálmirigy adenokarcinómája volt. Ezek a sejtek még azután is tumorigénnek bizonyultak, hogy a beteg több sugár- és kemoterápiás kezelésen esett át. Így a létrehozott sejtvonal felbecsülhetetlen értékű modell a rák kialakulásának és progressziójának tanulmányozására.
- A BxPC-3 sejtek epithelsejt-szerű morfológiával rendelkeznek.
- A BxPC-3 modális kromoszómaszáma 59. Ezek a sejtek homozigóta delécióval rendelkeznek a 18q kromoszómán, amely a SMAD4/DPC4 fehérjét kódolja. Emellett a sejtvonalból hiányzik a hasnyálmirigy-tumoroknál gyakori BxPC-3 kras mutáció. A BxPC-3 braf deléció szintén megtalálható ezekben a hasnyálmirigyrákos sejtekben.
Mi a különbség a BxPC3 és a PANC-1 között?
A BxPC-3 PADC (pancreas ductalis adenokarcinóma) és a PANC-1 sejtek elsődleges hasnyálmirigyrák sejtvonalak, amelyek epiteliális morfológiával rendelkeznek. Itt az előbbi sejtek inkább epithelszerű tulajdonságokkal rendelkeznek, míg a későbbiek inkább mesenchymális tulajdonságokat mutatnak [1].
2. bxPC-3 sejtek tenyésztése
A BxPC-3 sejtvonalat széles körben használják a rákkutató laboratóriumokban. Ennek a hasnyálmirigyrákos sejtvonalnak a hatékony tenyésztéséhez ismernie kell a következő kulcsfontosságú pontokat. Megtanulhatja: Mennyi a bxpc3 megduplázódási ideje? Hogyan kell a BxPC-3 sejtvonalat tenyészteni?
A BxPC-3 sejtek tenyésztésének kulcsfontosságú pontjai
|
A populáció megduplázódási ideje: |
A BxPC-3 sejtek megduplázódási ideje 48 és 60 óra között mozog. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A BxPC-3 adherens sejtvonal. |
|
Osztott arány: |
A BxPC-3 sejteket 1:2 és 1:4 arányban szubkultiválják. A sejteket 1 x PBS-szel mossuk, és az accutase nevű passzázsoldattal inkubáljuk. A sejtekhez 8-10 perc elteltével friss médiumot adunk, és a sejteket centrifugáljuk. A pelletet ismét reszuszpendáljuk a médiumban, és a sejteket egy új tenyésztőedénybe öntjük a növekedéshez. |
|
Növesztőközeg: |
A BxPC-3 sejtvonal tenyésztéséhez RPMI 1640 médiumot használunk. Az ideális sejtnövekedés elérése érdekében 10% magzati szarvasmarha szérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal és 2,0 g/L NaHCO3-mal egészítik ki. A médiumot hetente 2-3 alkalommal kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A BxPC-3 sejtkultúrákat 37 °C-os, párásított inkubátorban tartjuk, amely 5%-os CO2-ellátáshoz van csatlakoztatva. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott sejteket általában -150 °C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tároljuk a sejtek életképességének védelme érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A BxPC-3 sejtkultúrák lefagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF használható. Lassú fagyasztási folyamatot követünk, amely csak 1 °C-os hőmérséklet-csökkenést tesz lehetővé, hogy a sejtek ne szenvedjenek sokkot. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott BxPC-3 sejteket előre beállított 37 °C-os vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk fel. Miután egy kis jégcsomó maradt, a sejtekhez friss tápfolyadékot adunk, és centrifugálással eltávolítjuk a fagyasztási tápfolyadék elemeit. Ezután a sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a sejteket a lombikba adagoljuk a növekedéshez. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A BxPC-3 sejtkultúrákat 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumokban tartják fenn. |
3. bxPC-3 sejtvonal: Előnyök és korlátok
A BxPC-3 egy jól ismert hasnyálmirigy adenokarcinóma sejtvonal, amelyhez számos előny és korlátozás társul. A sejtvonal legfontosabb előnyeit és hátrányait itt soroljuk fel.
Előnyök
A BxPC-3 sejtek fő előnyei a következők:
-
A hasnyálmirigyrák in vitro modellje
A hasnyálmirigy adenokarcinómás betegekből származó BxPC-3 sejtek releváns tulajdonságokkal rendelkeznek, így alkalmas modellnek bizonyulnak a hasnyálmirigyrák in vitro viselkedésének tanulmányozására.
-
Tumorogén sejtvonal
A BxPC-3 sejtek tumorigén tulajdonságokkal rendelkeznek, és nude vagy immunhiányos egerekbe injektálva tumorokat képesek kialakítani. Ezek a tumorok nagyon hasonlítanak a primer hasnyálmirigy adenokarcinóma tumorokhoz, így a BxPC-3 xenograft modell ideális a rák növekedésének és progressziójának tanulmányozására.
Korlátozások
A BxPC-3 sejtvonalhoz kapcsolódó korlátok a következők:
-
Keresztszennyeződés
A BxPC-3 sejtvonal, mint minden más sejtvonal, magában hordozza a keresztkontamináció kockázatát. A kutatóknak óvatosnak kell lenniük, és szigorú kontaminációmegelőzési protokollokat kell betartaniuk, amikor ezeket a sejteket kezelik.
-
Lassú növekedési ütem
A BxPC-3 sejtek viszonylag lassan szaporodnak, a megduplázódási idő 48 és 60 óra között van. Ez a tulajdonság hosszabb inkubációs időt igényelhet bizonyos kísérletekhez, ami késleltetheti a kutatás előrehaladását.
4. a BxPC-3 sejtek alkalmazása a kutatásban
A BxPC-3 sejtek számos alkalmazást kínálnak a rákkutatásban. A leggyakoribb alkalmazások a következők:
- Hasnyálmirigyrák-kutatás: A BxPC-3 sejtek a hasnyálmirigy adenokarcinómát imitálják, és így a daganatok kialakulásának és növekedésének hátterében álló genetikai és molekuláris mechanizmusok feltárására szolgálnak. Emellett a kutatók új biomarkereket és terápiás célpontokat fedeznek fel e sejtek segítségével. A BxPC-3 sejtek továbbá jelentős mértékben expresszálnak angiogén faktorokat, azaz interleukin-8 (IL-8), prosztaglandin E2 (PGE2) és vaszkuláris endotél növekedési faktort (VEGF), ami alkalmassá teszi őket az angiogenezis tanulmányozására. Az angiogenezis a rák növekedésével és áttétképződésével kapcsolatos kulcsfontosságú folyamat. Egy 2022-ben publikált tanulmány azt vizsgálta, hogy a laminin-5 gamma-2 (LAMC2) overexpressziója a BxPC3 PDAC (hasnyálmirigy ductus adenokarcinóma) BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR jelátviteli útvonal szabályozásán keresztül fokozza a tumorigenezisét [2].
- Gyógyszerkutatás és fejlesztés: A BxPC-3 sejtvonal felbecsülhetetlen értékű rákellenes gyógyszer-tesztelési modellként szolgál. A kutatók vizsgálják a potenciális gyógyszerek citotoxikus, anti-metasztatikus és apoptotikus hatását a BxPC3 PDAC-ra. Alexandria Turner és munkatársai 2020-ban végzett tanulmánya az Elaeocarpus reticulatus gyümölcskivonatok apoptotikus tulajdonságait vizsgálta BxPC-3 hasnyálmirigyrák sejtekben [3]. Hasonlóképpen 2020-ban végeztek olyan kutatást, amely az Oxialis obtriangulata nevű növény metanolos kivonatának rákellenes potenciálját határozta meg BxPC-3 sejtekben. Emellett a kutatók azt is vizsgálták, hogy a növényi kivonat milyen sejtmechanikai úton keresztül fejtette ki terápiás hatását [4].
5.bxPC-3 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
Ez a szakasz a BxPC-3 sejtvonalat tartalmazó, legtöbbet idézett és legérdekesebb publikációkat sorolja fel.
A Licocoumarone a DYRK1A gátlásával indukálja a BxPC-3 hasnyálmirigy adenokarcinóma sejtek halálát
A Chemico-Biological Interactions (2020) című folyóiratban megjelent publikáció egy természetes termék, a licokumaron apoptotikus hatását vizsgálta a BxPC-3 hasnyálmirigyrák sejtekre.
Ez a kutatási cikk az Anticancer Research (2022) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt javasolta, hogy a hidroxiklorokvin a BCL-XL gén gátlásával okozza a BxPC3 sejtek halálát.
Ez a kutatás 2020-ban jelent meg a Journal of Cellular Biochemistry című folyóiratban. A tanulmány szerint egy természetes vegyület, a szalidrozid, a HIF-1α (hipoxia-indukálható faktor) és a LOXL2 jelátviteli kaszkád szabályozásán keresztül mutat rákellenes hatást a BxPC-3 sejtekben.
A Biomedicine & Pharmacotherapy című szaklapban megjelent cikk szerint az ibrutinib nagyszerű sugárérzékenységet fokozó szerként alkalmazható hasnyálmirigyrákos betegeknél. A BxPC-3 sejteken végzett in vitro vizsgálat azt mutatja, hogy csökkenti a BxPC3 EGFR foszforilációját és a pAKT expresszióját, valamint a sugárterápia által felszabályozott downstream géneket.
Az Integrative Cancer Therapies című szaklapban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy egy természetes termék, a kelidonin apoptotikus hatást fejt ki a humán BxPC-3 hasnyálmirigysejtekben a BxPC3 p53 és GADD45a jelátvitel szabályozásán keresztül.
6. a BxPC-3 sejtvonal forrásai: Bxxxxx Bxxxxx: Protokollok, videók és még sok más
A BxPC-3 sejtvonal számos olyan magával ragadó előnnyel rendelkezik, amelyek alkalmassá teszik a kutatási felhasználásra. A BxPC-3 sejtvonallal kapcsolatos számos online forrás megemlíti kezelését, karbantartását és transzfekciós protokolljáts.
- BxPC3 transzfekció: Ez a videó lépésről lépésre mutatja be a BxPC-3 sejtek transzfekciós protokolljának megtanulását.
A cikknek ez a része tartalmaz néhány linket, amelyek a BxPC3 sejttenyésztési protokollokat magyarázzák.
- BxPC3 sejttenyésztés: Ez a weboldal segít a kriokonzervált és proliferatív BxPC-3 kultúrák szubkultúrájának és kezelésének protokolljainak elsajátításában.
Hivatkozások
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductus adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., A laminin-5 gamma-2 overexpressziója elősegíti a hasnyálmirigy ductus adenokarcinóma tumorigenezisét az EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR kaszkádon keresztül. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus gyümölcskivonatok csökkentik az életképességet és apoptózist indukálnak hasnyálmirigyrák sejtekben in vitro. Molekuláris biológiai jelentések, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Az Oxialis obtriangulata rákellenes potenciálja hasnyálmirigyráksejtekben az ERK/Src/STAT3-mediált útvonal szabályozásán keresztül. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.