AGS sejtek – A gyomoradenokarcinóma AGS sejtjeinek vizsgálata a rákkutatásban
Az AGS sejtek egy emberi gyomoradenokarcinóma sejtvonalat alkotnak, amelyet széles körben használnak az orvostudományi kutatásokban. Különösen a gyomorrák biológiájának tanulmányozására alkalmazzák, beleértve a tumor növekedését, fejlődését, progresszióját és a terápiás beavatkozásokat. Ezenkívül a gazda-kórokozó kölcsönhatások vizsgálatára is használják.
- Növekedési táptalaj
- Az AGS sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 4 mM L-glutamint, 4,5 g/l glükózt, 1,5 g/l NaHCO3-t és 1,0 mM nátrium-piruvátot tartalmazó DMEM táptalajt használnak. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- Az AGS sejtek duplázódási ideje 24 és 48 óra között mozog.
- Növekedési típus
- Az AGS sejtek adhezívek. Monorétegekké növekednek.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-2
- Kapható
- Cytion — AGS megrendelése
- Az AGS sejtek általános jellemzői és eredete
- Az AGS sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- AGS sejtvonal: Előnyök és korlátozások
- Az AGS sejtek alkalmazási területei
- 5. Kutatási publikációk az AGS sejtvonalról
- Források az AGS sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok
- Gyakran ismételt kérdések
Az AGS sejtek általános jellemzői és eredete
Mielőtt elkezdené a munkát egy sejtvonalon, ismernie kell annak eredetét és általános jellemzőit. Ez a szakasz a következőket tárgyalja: Mik az AGS sejtek? Mi az AGS sejt eredete? Mi az AGS rákos sejtvonal morfológiája?
- Az AGS sejtvonalat egy 54 éves, gyomoradenokarcinómában szenvedő kaukázusi nő gyomorszövetéből nyerték. 1979-ben izolálták [1].
- Az AGS sejtek morfológiája hámsejtekhez hasonló.
- A gyomorhámból származó AGS sejtek hiperdiploidok. Az AGS sejtek modális kromoszómaszáma 49, ami a sejtek közel 60%-ában fordul elő. Poliploidia is előfordul a sejtek körülbelül 3,6%-ában.
Az AGS sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
A sejtvonal megfelelő kezeléséhez és gondozásához ismernie kell annak alapvető tenyésztési fogalmait. Különösen a következőket kell megtanulnia: Mi az AGS sejtek duplázódási ideje? Mi az AGS sejtek táptalaja? Hogyan kell az AGS sejteket áttenyészteni? Milyen fagyasztó táptalajt használnak a gyomorhám AGS sejtekhez?
Az AGS sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
Az AGS sejtek duplázódási ideje 24 és 48 óra között mozog.
Adherens vagy szuszpenziós:
Az AGS sejtek adhezívek. Monorétegekké növekednek.
Beültetési sűrűség:
Az AGS sejteket 1 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel vetjük be. Ezen a sűrűségen a sejtek 3–5 nap alatt konfluens monoréteget képeznek. A régi táptalaj eltávolítása után a sejteket 1 x PBS-sel öblítjük, majd Accutase disszociációs oldattal inkubáljuk. A levált sejteket tenyészközegben reszuszpendálták és centrifugálták. A sejtpelletet ismét reszuszpendálták, és az AGS sejtek számlálása után az új lombikba adagolták őket növekedés céljából.
Növekedési tápközeg:
Az AGS sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 4 mM L-glutamint, 4,5 g/l glükózt, 1,5 g/l NaHCO3-t és 1,0 mM nátrium-piruvátot tartalmazó DMEM táptalajt használnak. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
Az AGS sejteket párásított inkubátorban (37 °C hőmérsékleten) tartják, 5% CO2-ellátással.
Tárolás:
A fagyasztott AGS sejteket -150 °C alatti hőmérsékletű elektromos fagyasztókban vagy hosszabb ideig folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják.
Fagyasztási folyamat és táptalaj:
Az AGS sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF táptalajt használnak. A sejtek fagyasztása lassú fagyasztási eljárással történik, amely percenként csak 1 °C hőmérsékletcsökkenést enged meg, és megóvja a sejtek életképességét.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott gyomorhámsejteket 37 °C-os vízfürdőben 40–60 másodpercig gyorsan keverik. A felolvasztott sejteket friss tenyészközegben reszuszpendálják, majd új lombikokba öntik a szaporodáshoz. 24 órás inkubáció után a táptalajt kicserélik, hogy eltávolítsák a fagyasztó táptalaj összetevőit. Ezzel ellentétben a felolvasztott sejteket centrifugálják, és eltávolítják a fagyasztó táptalaj elemeit. Ezután a learatott sejteket újra szuszpendálják, és a tenyésztőtáptalajt tartalmazó lombikba öntik.
Biológiai biztonsági szint:
Az AGS sejtek tenyésztéséhez elengedhetetlen a 2. biológiai biztonsági szintű laboratóriumi környezet.
AGS sejtvonal: Előnyök és korlátok
Ez a cikk az AGS sejtekkel kapcsolatos legfontosabb előnyöket és korlátokat mutatja be.
Előnyök
A gyomorhám AGS sejtek fő előnyei a következők:
Könnyen tenyészthető
Az AGS gyomorrákos sejtvonal könnyen fenntartható sejtkultúra-laboratóriumokban. Nincs bonyolult és szigorú sejtkultúra-követelménye. Ezenkívül jó növekedési jellemzőkkel rendelkezik, ami ideális választássá teszi a gyomorrák biológiájának tanulmányozásához.
Kapcsolat a gyomorrákkal
Az AGS sejtek emberi gyomoradenokarcinómából származnak, ezért széles körben használják őket a gyomorrák biológiájának és a terápiás beavatkozásoknak a tanulmányozására.
Korlátozások
Az AGS sejtvonalhoz kapcsolódó korlátozás:
In vitro sejtmodell
Az AGS sejteket biomedicinális kutató laboratóriumokban, mesterséges körülmények között tenyésztik. Ezért előfordulhat, hogy nem tükrözik teljes mértékben az in vivo gyomorrák mikrokörnyezetét és egyéb sejt- és molekuláris kölcsönhatásokat.
Az AGS sejtek alkalmazásai
Az AGS sejteket kifejezetten a gyomorrák biológiájának tanulmányozására használják. Számos más ígéretes alkalmazási területük is van az orvostudományi területen. Az AGS sejtek néhány érdekes kutatási alkalmazása:
- Gyomorrák-kutatás: Az AGS-sejtek kiváló kutatási eszközök a gyomorrák növekedésének, metasztázisának és inváziójának alapjául szolgáló sejt- és molekuláris mechanizmusok vizsgálatához. A kutatók gyomorhámsejteket is alkalmaznak a gyomorrák kialakulásában szerepet játszó különböző sejtes folyamatok, genetikai mutációk és jelátviteli útvonalak tanulmányozására. Az Oncology Reports (2019) egyik tanulmánya megállapította, hogy a mikroRNS-183-5p.1 gátolja a Bcl 2/P53 jelátviteli kaszkádot, ezzel elősegítve a tumorsejtek szaporodását, vándorlását és invázióját. Ezenkívül a TPM1 gént is leregulálja, hogy ezeket a hatásokat kifejtse. Így mind a mikroRNS, mind a TPM1 hatékony molekuláris célpontként javasolt a célzott gyomorrák-terápiák fejlesztéséhez [2].
- Gyógyszerszűrés: Az AGS sejteket széles körben használják új és hatékony gyomorrák elleni gyógyszerek szűrésére. A kutatók az AGS sejtvonalat felhasználva értékelik a potenciális gyógyszerek citotoxicitását és hatékonyságát. Tanulmányokat végeztek új molekuláris célpontok azonosítására és újszerű célzott terápiák kifejlesztésére is a gyomorrák leküzdése érdekében. A 2021-ben végzett kutatás AGS gyomorráksejteket használt, és a paklitaxel gyógyszer terápiás hatását tanulmányozta. Az eredmények kimutatták, hogy a paklitaxel mitotikus katasztrófát indukál, amely az AGS sejtekben az apoptózis vagy sejthalál szerves mechanizmusa. Ezenkívül elősegítette az autofágiát a gyomorráksejtekben [3].
- Gazda-kórokozó kölcsönhatások: Az AGS rákos sejtvonalat a gazda-kórokozó kölcsönhatások vizsgálatára is használják. Ez segít a kutatóknak megérteni a fertőzéssel kapcsolatos sejtes mechanizmusokat és reakciókat. Például egy 2020-ban végzett tanulmány megfigyelte, hogy a Helicobacter pylori külső membránvezikuláiban jelen lévő kis nem kódoló RNS-ek csökkentik az interleukin 8 szekrécióját az emberi AGS sejtekben [4].
5. Az AGS sejtvonalról szóló kutatási publikációk
A cikk ezen része néhány érdekes és leggyakrabban hivatkozott, az AGS sejteket bemutató kutatási publikációt ismertet.
A Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) folyóiratban megjelent tanulmány szerint a salidrosid, egy természetes vegyület, a PI3K/AKT/mTOR jelátviteli útvonal modulálása révén védő autofágiát és sejthalált indukál a gyomorhám AGS sejtjeiben.
Ez a tanulmány a Biomedicine & Pharmacotherapy (2018) folyóiratban jelent meg. Az astragalus-poliszacharid és az apatinib gyógyszer szinergikus rákellenes hatásait vizsgálta AGS-sejtekben. A tanulmány eredményei kimutatták, hogy az astragalus az AKT jelátvitel gátlásán keresztül fokozza az apatinib tumorellenes hatását.
A Journal of Ethnopharmacology (2018) folyóiratban megjelent kutatás szerint a Curcuma zedoaria Roscoe növényből származó természetes vegyület, a kurkuzedoalid hozzájárul az AGS sejtek elleni citotoxicitási potenciáljához.
A FOXA1 túltermelése gátolja az emberi gyomorrákos AGS sejtek szaporodását és EMT-jét
A Gene (2018) folyóiratban megjelent publikáció szerint a FOXA1 felregulációja gátolja az AGS gyomoradenokarcinóma sejtek szaporodását, valamint az epiteliális-mesenchimális átalakulást (EMT) és az inváziót.
Ez a kutatási cikk 2020-ban jelent meg az International Journal of Medical Microbiology folyóiratban. Ebben a tanulmányban AGS sejteket használtak a gazda-kórokozó kölcsönhatások vizsgálatához. Az eredmények kimutatták, hogy a Helicobacter pylori külső membrán vezikuláiban olyan nem kódoló RNS-ek találhatók, amelyek befolyásolják az IL-8 szintjét az AGS sejtekben.
Források az AGS sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
Az alábbiakban néhány, az AGS-sejteket bemutató forrás található.
- AGS sejtek transzfekciós protokollja: Ez a videó lépésről lépésre bemutatja a gyomorhám AGS sejtek transzfekciós protokollját.
Az alábbi link az AGS sejtkultúra protokollját tartalmazza.
- AGS sejtkultúra protokoll: Ez a weboldal hasznos információkat tartalmaz az AGS sejtkultúra táptalajairól és a sejtkultúra protokollokról. Röviden összefoglalva, protokollt nyújt a gyomorhám AGS sejtek szubkultiválásához, valamint a proliferáló és kriokonzervált AGS kultúrák kezeléséhez.
- AGS-sejtek szubkultiválása: Ez az oldal részletesen elmagyarázza az AGS-sejtek szubkultiválásának eljárását.
Hivatkozások
- Phuc, B.H. és munkatársai, Két vietnami Helicobacter pylori törzs, a nem kardia gyomorrákos betegtől származó CHC155 és a duodenális fekélyes betegtől származó VN1291 összehasonlító genomikája. Scientific Reports, 2023. 13(1): 8869. o.
- Lin, J. és munkatársai, A miRNA‑183‑5p. 1 elősegíti a gyomorrákos AGS-sejtek migrációját és invázióját a TPM1 célzásával. Helyesbítés: in/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): 2371–2381. o.
- Khing, T.M. és munkatársai, A paklitaxel hatása az apoptózisra, az autofágiára és a mitotikus katasztrófára az AGS sejtekben. Scientific Reports, 2021. 11(1): 23490. o.
- Zhang, H. és munkatársai, A Helicobacter pylori külső membrán vezikulák által csomagolt sncRNA-k csökkentik az IL-8 szekrécióját emberi sejtekben. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): 151356. o.