KG-1 sejtvonal
AKG-1 sejtek egy humán eredetű leukémiás sejtvonalat alkotnak, amelyet széles körben használnak az orvosbiológiai kutatásokban. Az immunológiai, rák- és toxikológiai kutatásokban sokféleképpen alkalmazhatók. A kutatók ezeket a sejteket a betegség mechanizmusainak tanulmányozására és a potenciális terápiák tesztelésére használják. Ez a cikk átfogó információkat nyújt a KG-1 sejtvonalról, amelyek segíthetik munkáját. Különösen a következőket tárgyalja:
- A KG-1 sejtvonal általános jellemzői és eredete
- A KG-1 sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
- KG-1 sejtvonal: KG-1 celluláris sejtek: Előnyök és korlátozások: Előnyök és korlátozások
- A KG-1 sejtek alkalmazása a kutatásban
- A KG-1 sejtekkel kapcsolatos publikációk
- A KG-1 sejtvonal forrásai: Jegyzőkönyvek, videók, és még sok más
1. A KG-1 sejtvonal általános jellemzői és eredete
Egy sejtvonal eredete és általános jellemzői segítik a kutatót abban, hogy eldöntse, milyen célra használja fel a munkájában. Ezeket az információkat a munka megkezdése előtt megvizsgálhatja. Ez a cikkrész a KG-1 makrofágok eredetéről és jellemzőiről szól. Itt megtudhatod: Mik azok a KG-1 sejtek? Mi az a KG-1a sejtvonal? Mi a KG-1 sejtvonal eredete? Mi a KG-1 morfológiája?
- A KG-1 egy lymphoblast-szerű sejtvonal, amely egy akut myelogén leukémiában szenvedő kaukázusi férfi (59 éves) csontvelőaspirátumából származik. Koeffler és Golde 1978-ban hozta létre. Ezek a sejtek főként a promilocita vagy myeloblaszt érési stádiumban vannak [1].
- A KG-1 sejtek limfoblaszt-szerű morfológiával rendelkeznek.
- A KG-1 sejtvonal kariotípusa pszeudodiploid modális kromoszómaszámot mutat.
KG-1 és KG-1a
A KG-1a a KG-1 szülői sejtek egy alvonala. A KG1 sejtvonal 35 passzázsát követően alakult ki. A KG-1 sejtvonalhoz képest kevésbé differenciált. Továbbá ez az alvonal citokémiailag, morfológiailag és funkcionálisan kevésbé érett a szülői sejtvonalhoz (KG-1) képest.
2. A KG-1 sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
A cikknek ez a része a KG-1 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos minden olyan elengedhetetlen információval foglalkozik, amely megkönnyítheti az Ön munkáját. Itt megtudhatja: Mi a KG 1 sejtvonal megduplázódási ideje? Melyek a KG-1 makrofágok tenyésztési feltételei? Hogyan kell a KG-1 sejteket tenyészteni?
A KG-1 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A KG-1 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 45 óra. Ez azonban a tenyésztési körülményektől függően változhat. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A KG-1 sejtek szuszpenzióban növekednek. |
|
Sejtsűrűség: |
A KG1 sejtvonal optimális sejtsűrűsége 1 és 3 x105 sejt/ml között van. A szubkultúrához a sejtszuszpenziót steril csőbe kell átvinni és centrifugálni. A leszedett sejtekhez friss tápfolyadékot adunk, majd óvatosan reszuszpendáljuk. Ezt követően a sejteket új lombikokba adagoljuk, és optimális sejtsűrűséggel tenyésztjük. A sejtek akkor oszthatók szét, amikor elérik az 1-2 x106 sejt/ml maximális sejtsűrűséget. |
|
Növesztőközeg: |
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium), amely 10% FBS-t, 4,5 g/L glükózt, 4 mM L-Glutamint, 1,0 mM nátrium-piruvátot és 3,0 g/L NaHCO3-t tartalmaz a KG-1 sejtek tenyésztéséhez. A tápfolyadékot három nap után ki kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A KG1 AML sejtvonalat 37 °C-os hőmérsékleten, 5%-os CO2-ellátás mellett, párásított inkubátorban tenyésztjük. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott sejteket folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150 °C alatti hőmérsékleten, elektromos ultraalacsony hőmérsékletű fagyasztóban tartjuk a sejtek életképességének védelme érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
CM-1 vagy CM-ACF alkalmas KG-1 sejtek fagyasztására. A sejteket lassú fagyasztási eljárással fagyasztjuk le, hogy megvédjük őket a sokktól. Ez a módszer lehetővé teszi a hőmérséklet fokozatos, percenkénti 1 °C-os csökkenését. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A sejteket 37 °C-os, előmelegített vízfürdőben olvasztjuk fel, amíg egy kis jégcsomó nem marad. A felolvasztott sejteket a friss tápfolyadékhoz adjuk, és centrifugáljuk a fagyasztóközeg összetevőinek eltávolítása érdekében. A sejtpelletet óvatosan reszuszpendáljuk, és a növekedési tápfolyadékot tartalmazó új lombikba öntjük. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
Az 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium elengedhetetlen a KG-1 sejtkultúrák fenntartásához. |
3. KG-1 sejtvonal: Előnyök és korlátok
Más sejtvonalakhoz hasonlóan a KG-1 myeloid leukaemia sejtvonal is számos előnnyel és korlátozással jár. Ebben a szakaszban megismerkedünk néhány figyelemre méltóval, amelyek döntő fontosságúak lehetnek a kutatásban való felhasználásáról való döntés során.
Előnyök
A KG-1 sejtek fő előnyei a következők:
-
Könnyű tenyésztés
A KG-1 sejtek könnyen tenyészthetők a kutatólaboratóriumokban, és bonyolult sejttenyésztési követelményekkel büszkélkedhetnek. Könnyű karbantartásuk és növekedési feltételeik az alapvető sejttenyésztő létesítményekkel rendelkező kutatók széles köre számára teszik elérhetővé.
-
Akut mieloid leukémia (AML) modell
Az akut myeloid leukémiában (AML) szenvedő férfi betegtől származó KG-1 AML sejtvonal értékes eszközként szolgál az AML biológiájának vizsgálatához és a potenciális terápiák kutatásához, betekintést nyújtva a betegség mögöttes mechanizmusaiba és a kezelési stratégiákba.
korlátozások
A KG1 sejtvonalhoz kapcsolódó korlátok a következők:
-
In vitro modell
A KG-1 sejtek értékes in vitro modellt jelentenek az AML kutatásához; fontos azonban megjegyezni, hogy nem feltétlenül reprodukálják teljes mértékben a betegség komplexitását in vivo, mivel egyszerűsített sejtmodellként szolgálnak, amely nem feltétlenül foglalja magában az AML biológiájának minden aspektusát.
4. A KG-1 sejtek alkalmazása a kutatásban
A KG-1 számos ígéretes alkalmazást kínál az orvosbiológiai kutatásban. A KG1 makrofágok néhány fontos kutatási felhasználása a következő:
- Rákkutatás: A KG-1 sejtek egy akut myeloid leukémiás betegből származnak, ezért értékes kutatási eszköznek tekinthetők az AML biológiájának vizsgálatához. A kutatók ezeket a sejteket az AML kialakulását, növekedését és gyógyszerrezisztenciáját irányító sejtes és molekuláris mechanizmusok tanulmányozására használják. Ez magában foglalja az AML-hez kapcsolódó új biomarkerek, genetikai mutációk és jelátviteli útvonalak azonosítását és felfedezését is. Például egy 2019-ben végzett tanulmány azt vizsgálta, hogy a hosszú nem kódoló RNS linc00239 elősegíti a doxorubicin-rezisztenciát és a rosszindulatú viselkedést az akut myeloid leukémiás sejtekben, a KG-1-ben. További vizsgálat kimutatta, hogy a lncRNS aktiválja a PI3K/Akt/mTOR jelátvitelt, hogy kifejtse ezeket a hatásokat az AML sejtekben [2].
- Toxikológia: A KG1 sejtvonalat széles körben használják a toxikológiai kutatásokban. A kutatók a potenciális terápiás szerek toxicitását és hatékonyságát, beleértve a kemoterápiás szereket és a célzott terápiákat a KG1 myeloid leukémiasejteken tesztelik, hogy a jövőbeni preklinikai és klinikai vizsgálatokhoz ígéretes gyógyszerjelölteket azonosítsanak. A 2018-ban végzett kutatás a doxorubicin-tartalmú nano-nioszómák toxicitását elemezte a KG1 AML-sejtvonalon. A tanulmány azt javasolta, hogy a nano-nioszóma megfelelő hordozó a hatóanyag-szállításhoz, mivel fokozza a kezelés hatékonyságát [3]. Egy másik vizsgálatban a kutatók az Urtica dioica növény leveleiből készített csalántea terápiás hatásait vizsgálták. A vizsgálat kimutatta, hogy a növény e vizes levélkivonata tumorellenes hatást fejt ki akut myeloid leukémiás sejtekben, a KG-1 és U937 sejtekben [4].
5. A KG-1 sejtekkel kapcsolatos publikációk
A cikknek ez a része néhány érdekes kutatási publikációt sorol fel a KG-1 sejtekkel kapcsolatban.
Ez a cikk a Journal of Cellular Physiology című folyóiratban jelent meg (2019). A tanulmány azt javasolta, hogy a kvercetin vegyület érzékenyíti a KG1 AML sejtvonalat a TNF-hez kapcsolódó apoptózist indukáló liganddal (TRAIL) szemben, és felerősítheti a sejtekben a TRAIL-indukált citotoxicitás hatását.
A Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) című folyóiratban megjelent cikk azt javasolta, hogy a krüppel-szerű transzkripciós faktor 8 downregulációja elnyomja az AML-sejtek proliferációját és glikolízisét, és az AKT/mTOR jelátviteli útvonal szabályozásán keresztül ösztönzi az apoptózist.
A sorafenib és az arzéntrioxid hatása az U937 és KG-1 sejtvonalakra: Apoptosis or Autophagy?
A Cell Journal (Yakhteh) (2020) című folyóiratban megjelent tanulmány az arzén-trioxid és a sorafenib lehetséges hatásait vizsgálta az U937 és KG-1 sejtekre.
A Medical Oncology (2020) című szaklapban megjelent tanulmány az OXPHOS-t és a glikolízist mint terápiás célpontokat értékelte az AML-sejtvonalban, a KG-1-ben.
Ez a Drug Design, Development, and Therapy (2020) című kiadvány azt javasolta, hogy a kurkumin és a talidomid vegyületek szinergikusan apoptotikus hatást fejtenek ki a KG-1 sejtekben a STAT3 és a Bcl-xL expressziójának csökkentésén keresztül.
6. A KG-1 sejtvonal forrásai: Jegyzőkönyvek, videók, és még sok más: protokollok, videók
Az alábbiakban néhány, a KG-1 sejtekkel kapcsolatban elérhető online forrás található.
- Szuszpenziós sejtek szubkultiválása: Ez a videó a KG-1-hez hasonló szuszpenziós sejtkultúrák szubkultiválásának protokollját ismerteti.
A következő link tartalmazza a KG-1 sejtkultúra protokollját:
- KG-1 sejtvonal: Ez a weboldal tele van a KG-1 sejtvonalra vonatkozó alapvető sejttenyésztési információkkal. Tartalmazza a sejtvonal médiumairól szóló információkat, valamint a kriokonzervált és proliferatív kultúrák szubkultiválására és kezelésére vonatkozó protokollokat.
Hivatkozások
- Pelliccia, F., V. Ubertini, and N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis before to use cell lines in research: A KG-1a leukémiás sejtvonal esete. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., A hosszúnem kódoló RNS linc00239 elősegíti a rosszindulatú viselkedést és a doxorubicinnel szembeni kemorezisztenciát részben a PI3K/Akt/mTOR útvonal aktiválásán keresztül akut myeloid leukémiás sejtekben. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Doxorubicint tartalmazó nano-nioszómák előállítása és vizsgálata, valamint toxicitásának értékelése akut myeloblasztos leukémiás KG-1 sejtvonalon. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., A csalántea gátolja az akut myeloid leukémiás sejtek növekedését in vitro az apoptózis elősegítésével. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.