Neuro-2a sejtvonal
A Neuro-2a egy egérből származó idegsejt-vonal, amelyet széles körben használnak az idegtudományi kutatásokban. Ezeket a sejteket elsősorban az idegrendszer fejlődésének, differenciálódásának, a neurotoxicitásnak, a sejtjelátviteli útvonalaknak és az axonok növekedésének tanulmányozására alkalmazzák. Emellett gyógyszerfejlesztési és szűrési célokra is felhasználják őket.
Ez a cikk a Neuro-2a neuroblasztóma sejtek fontos jellemzőire összpontosít, amelyek segíthetnek Önnek a velük való munka megkezdése előtt. Főként a következőket tárgyalja:
- A Neuro-2a sejtek általános jellemzői és eredete
- A Neuro-2a sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- A Neuro-2a sejtvonal előnyei és hátrányai
- A Neuro-2a sejtvonal kutatási alkalmazásai
- A Neuro-2a sejteket bemutató kutatási publikációk
- Források a Neuro-2a sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok
A Neuro-2a sejtek általános jellemzői és eredete
A cikk ezen része a Neuro-2a sejtvonal háttérinformációit és alapvető jellemzőit tárgyalja, amelyek ismerete elengedhetetlen a vele való munka megkezdése előtt. Itt megtudhatja: Mi a Neuro-2a sejtvonal? Mi a Neuro-2a sejtvonal eredete? Mi a Neuro-2a sejtek differenciálódása? Mekkora egy Neuro-2a sejt? Milyen a Neuro-2a sejtek morfológiája?
- A Neuro-2a sejtek egy albínó egér (A törzs) spontán daganatából (neuroblasztóma) származnak. A sejtvonalat R.J. Klebe és F.H. Ruddle hozta létre.
- A Neuro-2a neuroblasztóma-sejtek neuronális és amőboid őssejt-morfológiát mutatnak.
- A Neuro-2a sejtek magassága 12 mikrométer [1].
- A Neuro-2a sejtek kromoszómaszáma 59 és 193 között változhat, a modális érték 95. Ezen neuroblastoma sejtek kariotípusa 94 és 98 kromoszóma közötti tartományban instabil.
A Neuro-2a sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
A Neuro-2a sejteket széles körben használják az idegtudományi kutató laboratóriumokban. Mielőtt ezekkel a sejtekkel dolgozna, ismernie kell az alábbiakban felsorolt, elengedhetetlen sejtkultúra-információkat. Ez segíthet abban, hogy könnyebben boldoguljon a feladattal. Megtudhatja: Mi az a Neuro-2a sejtkultúra-táptalaj? Hogyan tenyésztik a Neuro-2a sejteket? Mennyi a Neuro-2a sejtek duplázódási ideje? Mekkora a Neuro-2a beültetési sűrűsége? Mi a Neuro-2a sejtkultúra-protokoll? Mi a Neuro-2a sejtkultúra-táptalaj?
A Neuro-2a sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A Neuro-2a sejtek duplázódási ideje körülbelül 70 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
A Neuro-2a egy adhezív sejtvonal.
Beültetési sűrűség:
A Neuro-2a sejtvonal optimális beültetési sűrűsége 1 x 104 sejt/cm2. A beültetéshez a sejteket magnézium- és kalciummentes foszfátpuffer-sóoldattal (1x) mossuk át. Ezt követően passzázsoló oldatot (Accutase) adnak hozzá, és a sejteket 8–10 percig szobahőmérsékleten inkubálják. A sejtek disszociációja után friss táptalajt adnak hozzá, majd a sejteket centrifugálják. A learatott sejtpelletet óvatosan újra szuszpendálják, majd a sejteket tenyésztés céljából egy tenyésztőedénybe öntik.
Növekedési tápközeg:
A Neuro-2a sejtek tenyésztéséhez EMEM-et használnak. Ez 10% FBS-t, 2 mM L-glutamint, 1,5 g/L NaHCO3-t, EBSS-t, 1 mM nátrium-piruvátot és NEAA-t tartalmaz az ideális sejtnövekedés érdekében. A táptalajt hetente 1–2 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
A Neuro-2a tenyészeteket 37 °C-os, párásított inkubátorban tartják, amely 5%-os CO₂-ellátáshoz van csatlakoztatva.
Tárolás:
A sejteket hosszú távon -150 °C alatti hőmérsékleten, ultralow-temperatúrájú elektromos fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában kell tárolni.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
A Neuro-2a sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF táptalajt használnak. A sejteket lassú fagyasztási eljárással fagyasztják le, amely percenként csupán 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé. Ez megóvja a sejteket a hőmérséklet-sokktól és megőrzi életképességüket.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott tenyészetek felolvasztásához az üvegcsét 40–60 másodpercre 37 °C-os vízfürdőbe helyezzük, amíg csak egy kis jégdarab marad benne. Ezután tenyésztőközeget adnak hozzá, és a sejteket centrifugálják. Ez a lépés segít eltávolítani a fagyasztóközeg összetevőit. A sejtpelletet ezután újra szuszpendálják, és a sejteket átviszik egy tenyésztőközeggel töltött új lombikba. Ezt követően a sejteket legalább 24 órára 37 °C-os inkubátorba helyezik.
Biológiai biztonsági szint:
A Neuro-2a tenyészetek kezeléséhez és fenntartásához 1. szintű biológiai biztonsági laboratóriumi körülmények szükségesek.
- A Neuro-2a sejtvonal előnyei és hátrányai
- A Neuro-2a sejtvonal kutatási alkalmazásai
- A Neuro-2a sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- A Neuro-2a sejtek általános jellemzői és eredete
- 5. A Neuro-2a sejteket bemutató kutatási publikációk
- Források a Neuro-2a sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok
- Gyakran feltett kérdések
A Neuro-2a sejtvonal előnyei és hátrányai
A Neuro-2a sejteknek vannak olyan előnyeik és hátrányaik, amelyek megkülönböztetik őket más idegsejt-vonalaktól. Ezen sejtek néhány figyelemre méltó előnyét és hátrányát itt soroljuk fel.
Előnyök
A Neuro-2a egér neuroblasztóma sejtvonal előnyei a következők:
-
Könnyű tenyésztés:
A Neuro-2a sejtvonal nem jár bonyolult vagy összetett sejtkultúra-eljárásokkal. Könnyen tenyészthetők és tarthatók kutató laboratóriumokban.
-
In vitro idegsejt-modell:
A Neuro-2a egy kényelmes idegsejt-modell, amelyet a kutatók széles körben használnak az idegsejtek fejlődésével és differenciálódásával kapcsolatos tanulmányokban.
Hátrányok
A Neuro-2a sejtek hátrányai a következők:
-
Egér eredet:
A Neuro-2a egér eredetű, ezért a kutatóknak óvatosan kell eljárniuk, amikor az egér alapú vizsgálatok eredményeit az emberi egészségre és betegségekre vonatkoztatják, mivel az egér és az ember biológiája jelentősen eltérhet egymástól.
A Neuro-2a sejtvonal kutatási alkalmazásai
A Neuro-2a sejtek számos alkalmazási lehetőséget kínálnak az idegtudományi kutatások területén. Az alábbiakban néhány ígéretes felhasználási lehetőséget ismertetünk:
- Idegsejt-fejlődés: A Neuro-2a egy in vitro idegsejt-modell, amelyet széles körben használnak az idegsejt-fejlődés és a kapcsolódó folyamatok – például a differenciálódás, az axonok növekedése és a szinapszisok kialakulása – tanulmányozására. Egy 2020-ban végzett tanulmányban Neuro-2a sejteket használtak a mikroRNS-124 szerepének feltárására a retinsav által indukált idegsejt-differenciálódásban [2]. Egy másik tanulmány a Neuro-2a retinsav-receptor gamma (RARG) és a miRNA-124 expresszióját vizsgálta a neuroblasztóma sejtvonalban (N2A). Ez a tanulmány azt a hipotézist vetette fel, hogy a miR-124 a RARG-ot célozza meg, és gátolja a neuritok növekedését [3].
- Neurotoxicitás: A Neuro-2a-t gyógyszerek, vegyi anyagok vagy környezeti tényezők idegsejtekre gyakorolt toxikus hatásainak értékelésére is használják. Például egy, Zhihong Yin és munkatársai által végzett tanulmány a Neuro-2a sejteket felhasználva vizsgálta a biszfenol-A (BPA) – egy környezeti vegyi anyag – neurotoxicitását. Megállapították, hogy a BPA gátolja az idegsejtek differenciálódását és szaporodását azáltal, hogy megzavarja azok sejt- és szinaptikus integritását [4].
- Gyógyszerszűrés: A Neuro-2a sejteket számos gyógyszer, vegyület és természetes termék terápiás hatásainak értékelésére is alkalmazzák. Például egy tanulmányban Neuro-2a sejteket használtak a Gingko biloba növényi kivonat antioxidáns hatásának vizsgálatára. Ezen felül a kutatás arra a következtetésre jutott, hogy a kivonat csökkenti az Aβ-aggregációt, és potenciális kezelési lehetőséget jelenthet az Alzheimer-kór ellen [5].
5. A Neuro-2a sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
Íme néhány érdekes kutatási cikk, amely a Neuro-2a sejtvonalat tárgyalja.
A Journal of Natural Medicines 2018-as számában megjelent tanulmány a fehér borsból (P. nigrum) izolált alkamidok terápiás hatásait vizsgálta a Neuro-2a idegsejtekre.
Az Nkx2.1 gátlása szerepet játszik a túlzott retinsav által kiváltott agyi rendellenességekben
Az Acta Biochimica et Biophysica Sinica folyóiratban 2020-ban megjelent kutatás szerint az Nkx2.1 gén a Shh jelátviteli kaszkád szabályozásán keresztül fontos szerepet játszik az egér agy fejlődésében.
Ez a cikk a Toxicology and Industrial Health (2023) folyóiratban jelent meg, és azt állítja, hogy a biszfenol-A nevű környezeti vegyi anyag neurotoxicitást vált ki a neuro-2a sejtekben, és megzavarja azok szinaptikus és citoszkeletális működését.
A Pharmaceuticals (2021) folyóiratban megjelent tanulmány azt állítja, hogy a hexarelin nevű gyógyszer modulálja a PI3K/AKT és a MAPK kaszkádokat a neuroblasztóma sejtekben (Neuro-2a), és gátolja a hidrogén-peroxid által kiváltott Neuro-2a sejtek apoptózisát.
Az Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) folyóiratban megjelent kutatási cikk szerint az Emblica officinalis gyümölcs kivonata gátolja a neuroinflammációt a Neuro-2a sejtekben, és így jótékony hatással lehet a neuroinflammációs betegségekre.
Források a Neuro-2a sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok
Az alábbiakban felsoroljuk a Neuro-2a sejtekkel kapcsolatban elérhető online forrásokat. Ezek között megtalálható a Neuro-2a sejtkultúra és a transzfekciós protokoll is.
- Neuro-2a transzfekciós protokoll: A Neuro-2a alkalmas transzfekciós gazdasejt. Ez a link útmutatást nyújt a sejtvonal transzfekciós protokolljához. A Neuro-2a transzfekciós hatékonysága reagensenként változik.
Az alábbi link a Neuro-2a sejtkultúra-protokollt tartalmazza.
- Neuro-2a sejtkultúra-protokoll: Ez a link segít megismerni a Neuro-2a sejtek szubkultiválási protokollját.
- Neuro-2a sejtek: A weboldal átfogó ismereteket tartalmaz a Neuro-2a sejtkultúra-táptalajokról, a beültetési sűrűségről, valamint az alkultiválás és a kriokonzervált és proliferatív kultúrák kezelésének protokolljairól.
Hivatkozások
- Lulevich, V. és munkatársai: Az egysejtes mechanika érzékeny és kvantitatív módszert nyújt az amiloid-béta peptid és az idegsejtek közötti kölcsönhatások vizsgálatához. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): 13872–7. o.
- You, Q. és munkatársai: A miR-124 szerepe a retinsav által indukált Neuro-2A sejtek differenciálódásának szabályozásában. Neural Regen Res, 2020. 15(6): 1133–1139. o.
- Su, X. és munkatársai: A mikroRNS-124 a retinsav-receptor gamma-t célozza meg, és gátolja a neuritok növekedését. Neuropharmacology, 2020. 163: 107657. o.
- Yin, Z. és munkatársai: A biszfenol-A-expozíció által kiváltott neurotoxicitás összefüggésbe hozható a Neuro-2A sejtek szinapszisaival és citoszkeletonjával. Toxicology in Vitro, 2020. 67: 104911. o.
- Chen, L. és munkatársai: A Ginkgo biloba kivonat (EGb) gátolja az oxidatív stresszt az APPsw-t túltermelő Neuro-2A sejtekben. BioMed Research International, 2019. 2019.