SH-SY5Y-solut - Neuroblastoomatutkimus ja SH-SY5Y-solujen neurotieteellinen merkitys
Ihmisen neuroblastoomasta peräisin olevaa SH-SY5Y-solulinjaa hyödynnetään laajasti lääketieteellisessä tutkimuksessa neurodegeneratiivisten sairauksien tutkimisessa ja lääkkeiden kehittämisessä. Tutkijat käyttävät näitä soluja alkuperäisessä erilaistumattomassa muodossaan tai erilaistavat ne hermosoluja muistuttaviksi soluiksi.
SH-SY5Y-solulinjan yleistiedot ja alkuperä
Tässä jaksossa käsitellään SH-SY5Y-solulinjan perustietoja, mukaan lukien sen alkuperä, määritelmä ja solurakenne. Käsittelemme muun muassa sen morfologiaa ja solujen alkuperää koskevia kysymyksiä.
- SH-SY5Y on ihmisestä peräisin oleva solulinja, joka sai alkunsa SK-N-SH-neuroblastoomasolulinjan subkloonauksesta vuonna 1970.
- Kanta-solulinja SK-N-SH kehitettiin nelivuotiaan naispuolisen neuroblastoomapotilaan luuydinbiopsiasta.
- SH-SY5Y-solut ovat fenotyyppisesti adrenergisiä ja ilmentävät dopaminergisiä merkkiaineita, mikä tekee niistä hyödyllisen in vitro -mallin neurodegeneratiivisten sairauksien, neurogeneesin ja aivosolujen ominaisuuksien tutkimiseen [1].
- SH-SY5Y-solut kasvavat elinkelpoisten neuroblastisten solujen rykelminä, joissa on neuriitteja, ja ne ovat löyhästi kiinnittyneitä.
- SH-SY5Y-solujen solukoko on 12 μm.
- SH-SY5Y-solujen modaalinen kromosomiluku on 47, ja niillä on harvinainen kromosomiluvun 1 merkkiaine, 1q:n trisomia, joka aiheutuu 1q-segmentin ylimääräisen kopion insertoitumisesta kromosomin 1 pitkään haaraan.
SH-SY5Y-solujen viljely
Neurobiologian tutkimuslaboratorioissa SH-SY5Y-solut ovat eniten viljeltyjä neuroblastoomasoluja. Näiden solujen kanssa työskentelyssä on tärkeää ymmärtää, minkälainen kasvualusta soveltuu niiden viljelyyn, niiden kasvuominaisuudet, optimaalinen kylvötiheys ja oikea menetelmä niiden jäädyttämiseen. Tässä jaksossa annetaan SH-SY5Y-solujen viljelyä koskevia olennaisia tietoja, jotka auttavat sinua näissä asioissa.
SH-SY5Y-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Populaation kaksinkertaistumisaika: SH-SY5Y-solujen keskimääräinen populaation kaksinkertaistumisaika on noin 3-4 päivää. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: SH-SY5Y on löyhästi kiinnittyviä soluja. Ne kasvavat rykelminä, kun ne kylvetään suurella tiheydellä. |
|
Kylvötiheys: SH-SY5Y:n optimaalinen kylvötiheys on 1 x 104 solua/cm2. SH-SY5Y-viljelmät koostuvat sekä tarttuvista että kelluvista soluista. |
|
Kasvualusta: DMEM:Ham's F12 -media, jota on täydennetty 3,1 g/l glukoosilla, 10 % FBS:llä ja 1,6 mM L-glutamiinilla, on ihanteellinen SH-SY5Y-solulinjan kasvattamiseen. |
|
Kasvuolosuhteet (lämpötila, CO2): SH-SY5Y-soluja kasvatetaan 37 °C:n lämpötilassa kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 % CO2-syöttö. |
|
Varastointi: SH-SY5Y-solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi ne säilytetään nestemäisen typen höyryfaasissa alle -150 °C:n lämpötilassa. |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: SH-SY5Y-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Tämän neuroblastoomasolulinjan jäädyttämiseen valitaan hidas jäädytysmenetelmä, jossa lämpötila laskee asteittain 1 °C:lla. |
|
Sulatusprosessi: SH-SY5Y-soluja sisältävät pakastetut injektiopullot asetetaan 37 °C:n vesihauteeseen. Injektiopulloa sekoitetaan nopeasti, kunnes solut sulavat ja jäljelle jää vain pieni jäämöhkäle. |
|
Bioturvallisuustaso: SH-SY5Y-soluja voidaan viljellä bioturvallisuustason 1 laboratoriossa. |
SH-SY5Y-solut: SYYY:n solut: Edut ja rajoitukset: Edut ja rajoitukset
Edut
- Erilaistuminen neuroneiksi: SH-SY5Y-solut voidaan erilaistaa toiminnallisiksi neuroneiksi käyttämällä erityisiä yhdisteitä, mikä tarjoaa kätevämmän vaihtoehdon primaareille neuroneille ja välttää niiden käyttöön liittyvät eettiset ongelmat [2].
- In vitro -malli neurodegeneratiivisille sairauksille: Molekulaaristen merkkiaineiden, mukaan lukien dopaminergisten hermomerkkiaineiden, ilmentyminen tekee SH-SY5Y-soluista sopivia neurodegeneratiivisten sairauksien, kuten Parkinsonin taudin, tutkimiseen.
Rajoitukset
- Epäsynkronoitu solusykli: SH-SY5Y-soluviljelmillä on epäsynkronoitu solusykli erilaistumattomassa tilassa [3].
- Määrittelemätön erilaistumistila: SH-SY5Y-soluilla on määrittelemätön erilaistumistila, joka vaihtelee tumorigeenisestä neuroblastooma-tilasta postmitoottisiin neuroneihin tai neuraalisiin esisoluihin. Ne eivät ilmentä molekyylimarkkereita, joita kypsät hermosolut ilmentävät [4].
SH-SY5Y-solut in vitro -neurofarmakologiaa ja lääkkeiden löytämistä varten
SH-SY5Y-solujen sovellukset
Neurodegeneratiivisten sairauksien tutkimus: SH-SY5Y-soluja käytetään neurodegeneratiivisten sairauksien, kuten Alzheimerin ja Parkinsonin taudin, tutkimiseen. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa SH-SY5Y-soluja käsiteltiin amyloidi β -peptidillä 1-42 Alzheimerin taudin in vitro -mallin luomiseksi. Kehitettyyn solulinjaan transfektoitiin sitten pcDNA-17A ja 17A shRNA, jotta voitiin tutkia pitkän ei-koodaavan RNA 17A:n vaikutusta Alzheimerin taudin kaltaisiin soluihin. Tutkimus osoitti, että LncRNA-17A säätelee SH-SY5Y-solujen apoptoosia ja autofagiaa, mikä jäljittelee Alzheimerin tautia [5].
Lääkekehitys: SH-SY5Y-soluja käytetään seulomaan ja validoimaan lääkkeitä niiden terapeuttisen vaikutuksen varalta neurodegeneratiivisia sairauksia vastaan. Esimerkiksi vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa SH-SY5Y-soluissa indusoitiin parkinsonismia rikkakasvien torjunta-aineella (parakvatti) ja käytettiin sitten näitä soluja flavonoidin, naringeniinin, terapeuttisten mahdollisuuksien tutkimiseen. Yhdiste osoitti suojaavaa vaikutusta Parkinsonin taudin välittämää neurodegeneraatiota ja neurotoksisuutta vastaan solumalleissa, mikä osoittaa sen potentiaalia Parkinsonin taudin hoitojen kehittämisessä [6].
Tutkimusjulkaisut, joissa on SH-SY5Y-soluja
SH-SY5Y-soluista on tehty runsaasti tutkimuksia. Tässä jaksossa käsitellään muutamia merkittäviä esimerkkejä.
- LncRNA17A säätelee SH-SY5Y-solulinjan autofagiaa ja apoptoosia Alzheimerin taudin in vitro -mallina: Tässä julkaisussa ehdotettiin, että LncRNA17A välittää Alzheimerin taudin malliksi kokeellisesti muunnettujen SH-SY5Y-solujen apoptoosia ja autofagiaa.
- Naringeniini lievittää parakvatin aiheuttamaa dopaminergisten hermosolujen menetystä SH-SY5Y-soluissa ja Parkinsonin taudin rotan mallissa: Tässä tutkimuksessa ehdotettiin naringeniiniyhdisteitä neuroprotektiivisena aineena kokeellisesti kehitettyä Parkisonin taudin solu- ja eläinmallia vastaan.
- Biokemiallinen luonnehdinta proliferatiivisesta ja erilaistuneesta SH-SY5Y-solulinjasta Parkinsonin taudin mallina: Erilaistuneita SH-SY5Y-soluja käytettiin useiden Parkinsonin taudissa usein tutkittujen biokemiallisten prosessien karakterisointiin ja arviointiin.
- Asitretiinin in vitro -vaikutukset ihmisen neuronaalisiin SH-SY5Y-soluihin: SH-SY5Y-soluja käytettiin hermosolujen erilaistumisen tutkimiseen. Tutkijat tutkivat, että asetretiini edistää neuronien erilaistumista ja hoitaa neurodegeneratiivisia ja neurologisia kehityshäiriöitä sekä aivokasvaimia.
- SH-SY5Y-solulinjan muuntuminen neuronin kaltaisiksi soluiksi: Sähköfysiologisten ja biomekaanisten muutosten tutkiminen: Tässä tutkimuksessa SH-SY5Y-neuraaliblastoomasolut muunnettiin neuroneiksi käsittelemällä niitä retinohapolla ja aivoista peräisin olevan neurotrofisen tekijän (BDNF) molekyyleillä ja tutkittiin biokemiallisia ja elektrofysiologisia muutoksia.
SH-SY5Y-soluja koskevat resurssit: SY5Y5Y: protokollat, videot ja muuta
Tästä kuuluisasta neuroblastooma-solulinjasta on saatavilla useita online-resursseja. Näistä resursseista saat tietoa SH-SY5Y-viljelmien käsittelystä ja ylläpidosta.
Soluviljelyprotokollat
Seuraavien verkkosivustojen artikkeleista voit oppia menetelmiä SH-SY5Y-solujen viljelyyn, pakastamiseen ja sulattamiseen.
- SH-SY5Y-solujen viljely: PerustietoaSH-SY5Y-soluista, mukaan lukien solujen sulattaminen, pakastaminen ja subkultivointi.
- SH-SY5Y-solujen subkultivointi: Näyttää tiedot käytetyistä kasvualustoista ja SH-SY5Y-solujen subkulturointivaiheista.
- SH-SY5Y-solujen transfektointi: Tässä asiakirjassa kuvataan SH-SY5Y-solulinjan transientti transfektioprotokolla.
- Erilaistamisprotokolla: Tässä videossa selitetään SH-SY5Y-solujen erilaistamisprotokolla.
Odotamme, että tämä artikkeli antaa hyödyllistä tietoa SH-SY5Y-solujen käsittelystä, viljelystä ja käytöstä tutkimuksissa; jos haluat työskennellä tällä neuroblastooma-solulinjalla, harkitse tilaamista meiltä.
SH-SY5Y-solulinja: YYY: Usein kysytyt kysymykset: Usein kysytyt kysymykset
Viitteet
- Carvajal-Oliveros, A., et al., BE (2)-M17-solulinjalla on parempi dopaminerginen fenotyyppi kuin Parkinson-tutkimuksessa perinteisesti käytetyllä SH-SY5Y-solulinjalla, joka on enimmäkseen serotonerginen. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
- Kovalevich, J. ja D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Neuronal cell culture: methods and protocols, 2013: s. 9-21.
- Martin, E.-R., J. Gandawijaya ja A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: s. 4042.
- Feles, S., et al., Neuroblastooman solulinjan SH-SY5Y viljelyolosuhteiden virtaviivaistaminen: edellytys toiminnallisille tutkimuksille. Methods and Protocols, 2022. 5(4): p. 58.
- Wang, X., M. Zhang ja H. Liu, LncRNA17A säätelee autofagiaa ja apoptoosia SH-SY5Y-solulinjassa Alzheimerin taudin in vitro -mallina. Biotiede, biotekniikka ja biokemia, 2019. 83(4): p. 609-621.
- Ahmad, M.H., et al., Naringeniini lievittää parakvatin aiheuttamaa dopaminergisten hermosolujen häviämistä SH-SY5Y-soluissa ja Parkinsonin taudin rotan mallissa. Neurofarmakologia, 2021. 201: p. 108831.