Línea celular RAW 264.7 en la investigación de macrófagos e inmunología

La línea celular RAW 264.7 constituye un sólido modelo in vitro de macrófagos murinos, fundamental en el ámbito de la investigación inmunológica. Procedentes de un ratón macho BALB/c, estas células fueron transformadas por el virus de la leucemia murina de Abelson, dando lugar a una línea celular similar a la de los macrófagos. Debido a su estabilidad funcional y a su capacidad inherente para realizar tanto fagocitosis como pinocitosis, las células RAW 264.7 son esenciales para el estudio de las interacciones huésped-patógeno, lo que las convierte en una piedra angular de la investigación inmunológica [1,2].

Características morfológicas y comportamiento de crecimiento

Al examinarlas, las células RAW 264.7 muestran un crecimiento semiadherente con propensión a formar tanto células adherentes fusiformes como células viables esféricas flotantes, con un diámetro celular que oscila entre 10 y 20 µm. Esta naturaleza polimórfica y la adaptabilidad en las condiciones de cultivo hacen de las células RAW 264.7 una herramienta versátil para la manipulación y observación experimental.

Función inmunológica y presentación de antígenos

Como células presentadoras de antígenos, las células RAW 264.7 desempeñan un papel fundamental en el sistema inmunitario. Su función va más allá del simple reconocimiento de patógenos, ya que procesan y presentan antígenos a los linfocitos T, orquestando así una respuesta inmunitaria completa. Esta dinámica facilita una comprensión más profunda de cómo el sistema inmunitario identifica y neutraliza entidades extrañas.

Polarización de los macrófagos: El paradigma M0, M1 y M2

Las células RAW 264.7, en su estado basal como macrófagos M0, poseen la notable capacidad de polarizarse en el fenotipo proinflamatorio M1 o antiinflamatorio M2. Esta capacidad de polarización proporciona a los investigadores un modelo para estudiar las influencias y los efectos de diversas citocinas y factores ambientales sobre la función de los macrófagos y las respuestas inmunitarias [3,4].

Osteoclastogénesis y remodelación ósea

Aunque no son osteoclastos propiamente dichos, las células RAW 264.7 han sido fundamentales para estudiar la osteoclastogénesis, el proceso de formación de osteoclastos. Estas células facilitan la exploración de la expresión génica osteoclástica y su capacidad de respuesta a la activación de receptores. Esta investigación tiene profundas implicaciones para comprender la fisiopatología de enfermedades como la osteoporosis, que se caracteriza por una remodelación ósea desregulada.

Ventajas e inconvenientes de las células RAW 264.7

Ventajas

• Cultivo sencillo: La línea celular RAW 264.7 es fácil de cultivar y mantener en el laboratorio sin ningún requisito complicado.
• Bien caracterizada: RAW 264.7 es una línea celular bien caracterizada, lo que significa que tiene características fenotípicas y funcionales estables.
• Modelo in vitro de macrófagos: Como las células RAW 264.7 son macrófagos, presentan funciones esenciales similares a las de los macrófagos, como la fagocitosis y la pinocitosis. Por ello, se utilizan a menudo como modelo in vitro de macrófagos.
• Diferenciación a osteoclastos: Las células RAW 264.7 pueden diferenciarse en osteoclastos utilizando factores moleculares específicos. Estas células diferenciadas son capaces de realizar remodelación ósea, de forma similar a los osteoclastos.

Desventajas

• Escasa representación de los macrófagos primarios: Como línea celular transformada, RAW 264.7 puede no representar con exactitud las características de los macrófagos primarios y presentar algunas diferencias en la expresión génica, el fenotipo y la función.
• Limitaciones en el cribado de fármacos: Las células RAW 264.7 pueden no ser adecuadas para todos los tipos de ensayos de cribado de fármacos, y sus respuestas a algunos fármacos pueden diferir de las de los macrófagos primarios.
• Fuerteadhesión celular: Las células RAW 264.7 se adhieren fuertemente a la superficie del matraz de cultivo y a veces puede ser difícil desprenderlas.

Aplicaciones de las células RAW 264.7 en estudios inmunológicos y de imitación de macrófagos

Modelado de respuestas inmunológicas celulares

La línea celular RAW 264.7, que refleja las funcionalidades de los macrófagos auténticos, es un modelo clave para la investigación de las respuestas celulares a patógenos y estímulos inmunológicos. Un estudio que destaca este aspecto evaluó los efectos inmunomoduladores y antioxidantes de bacterias lácticas muertas por calor en estas células, aportando hallazgos significativos en la regulación del sistema inmunitario[5]

Como complemento, una investigación realizada en 2019 dilucidó el impacto inmunológico de la exposición de RAW 264.7 a polisacáridos de la planta Polygonatum sibiricum. El estudio concluyó que estos compuestos desencadenan una respuesta inmunitaria mediante la activación de las vías de señalización NF-κB/MAPK, ofreciendo una comprensión molecular profunda[6]

Exploración de la osteoclastogénesis

Las células RAW 264.7, que funcionan como sustitutas de los estudios de diferenciación de osteoclastos, contribuyen a dilucidar el comportamiento y las vías de diferenciación de los osteoclastos. Estas investigaciones amplían nuestros conocimientos sobre los mecanismos de resorción ósea y la patogénesis de la osteoporosis. A menudo se utilizan técnicas de imagen avanzadas para monitorizar los cambios intracelulares y analizar el metabolismo del hemo en estas células

Conocimiento molecular de la osteoclastogénesis

A pesar de su función principal como modelo de macrófago, las células RAW 264.7 también se emplean para la investigación de la osteoclastogénesis in vitro. Al inducir características similares a las de los osteoclastos en estas células, los investigadores obtienen información sobre el proceso de diferenciación y el comportamiento preosteoclástico, aunque en estos estudios es crucial tener en cuenta las características inherentes y el origen de la línea celular

Cribado de la bioactividad de productos naturales

Otra aplicación en la que destacan las células RAW 264.7 es el cribado de la bioactividad de productos naturales. Por ejemplo, su uso en un estudio coreano que investigaba las propiedades inmunoestimuladoras de una mezcla de hierbas demostró la eficacia de la línea celular para identificar compuestos bioactivos en sustancias naturales[7]

Pioneer investiga con nuestras células RAW 264.7

Publicaciones de investigación con células RAW 264.7

Existen numerosas publicaciones de investigación sobre la línea celular de macrófagos de ratón RAW 264.7:

• Los polisacáridosde Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducen una respuesta inmunitaria en la línea celular RAW264. 7 a través de unavíaNF-κB/MAPK: Este estudio propone que los polisacáridos obtenidos de la planta Polygonatum s ibiricum pueden desencadenar una respuesta inmunitaria en la línea celular de macrófagos de ratón RAW 264.7 a través de la regulación de la cascada de señalización NF-κB/MAPK.
• Efectos inmunomoduladores del extracto de Tinospora crispa y sus principales compuestos sobre las funciones inmunitarias de los macrófagos RAW 264.7: Este artículo publicado en la revista International Immunopharmacology describe que el extracto de la planta Tinosporacrispa y sus principales componentes tienen un efecto inmunomodulador e inmunoestimulador en la línea celular de macrófagos RAW 264.7.
• Lasbacterias lácticas muertas por calor inhiben la producción de óxido nítrico a través de la óxido nítrico sintasa inducible y la ciclooxigenasa-2 en las células RAW 264.7: Este estudio propuso que las bacterias lácticas muertas por calor pueden utilizarse potencialmente en la síntesis de productos probióticos porque poseen propiedades inmunomoduladoras y antioxidantes. Los investigadores utilizaron células RAW 264.7 para estudiar estas actividades biológicas.
• Efecto de la formulación a base de hierbas en la mejora de la respuesta inmunitaria en macrófagos RAW 264.7: En este estudio se utilizaron células RAW 264.7 para estudiar el efecto inmunoestimulante de una formulación a base de plantas denominada KM1608. El estudio sugirió que el KM1608 es un potencial agente potenciador de la respuesta inmunitaria.
• Un cribado de plantas utilizadas en la medicina tradicional colombiana reveló el potencial antiinflamatorio de los cálices de Physalis angulata: Este artículo publicado en el Saudi Journal of Biological Sciences investigó el potencial antiinflamatorio de 10 plantas tradicionales colombianas de uso común utilizando células RAW 264.7 estimuladas con LPS.

Células RAW 264.7: Recursos, protocolos, vídeos y más

Las células RAW 264.7 se utilizan a menudo en estudios de transfección. Los siguientes recursos explican diferentes métodos de transfección utilizados para la línea celular RAW 264.7.

• Transfección de células RAW 264.7: Este sitio web proporciona un protocolo para transfectar macrófagos RAW 264.7 utilizando un reactivo de lipofectamina.
• Protocolo de transfección: Este artículo publicado describe un protocolo detallado para la transfección de células RAW 264.7.
• Método de transfección eficiente para células RAW 264.7: Este documento describe otro método práctico de transfección con células RAW 264.7.

Vídeos relacionados con la línea celular RAW 264.7

• Cultivo de células RAW 264.7: Este vídeo explica el protocolo de pasaje de células RAW 264.7.
• Método de transfección: Este vídeo trata sobre la transfección de células RAW 264.7 con un gen reportero.

Preguntas esenciales sobre la línea celular RAW 264.7: Perspectivas de la investigación sobre el mimetismo de los macrófagos y la osteoclastogénesis

Referencias

1. Taciak, B., et al., Evaluación de la estabilidad fenotípica y funcional de la línea celular RAW 264.7 a través de pasajes seriados. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Wang, S., et al., Los macrófagos inflamatorios interrumpen la maduración y mineralización de los osteocitos a través de la regulación de la vía de señalización Notch. Medicina Molecular, 2022. 28(1): p. 102.
3. Orekhov, A.N., et al., Diferenciación de monocitos y polarización de macrófagos. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
4. Khabipov, A., et al., Polarización de macrófagos RAW 264.7 por células de cáncer de páncreas: un modelo para estudiar los macrófagos promotores de tumores. Investigación contra el cáncer, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
5. Kang, C.-H., et al., Heat-killed lactic acid bacteria inhibit nitric oxide production via inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells. Probióticos y proteínas antimicrobianas, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
6. Zhang, J., et al., Polisacáridos de Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducen una respuesta inmune en la línea celular RAW264. 7 a través de una vía NF-κB/MAPK. RSC avanza, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
7. Trinh, T.A., et al., efecto de la formulación a base de hierbas en la mejora de la respuesta inmune en macrófagos RAW 264.7. Biomoléculas, 2020. 10(3): p. 424.