Células B16 - Guía fundamental de las células de melanoma B16 en la investigación oncológica

B16 es la línea celular de cáncer de piel (melanoma) de origen murino. Esta línea celular es un modelo in vitro eficaz para estudiar los cánceres de piel humanos. Se utiliza con frecuencia para investigar la formación de tumores sólidos y la metástasis de las células cancerosas.

Este artículo le ayudará a comprender los fundamentos de la línea celular de melanoma B16. En concreto, se tratará lo siguiente:

1.características generales y origen de la línea celular B16

Esta sección del artículo cubrirá los rasgos característicos de la línea celular de melanoma B16. Aprenderá las respuestas a las siguientes preguntas frecuentes. Tales como ¿Qué es la línea celular de cáncer B16? ¿De dónde proceden las células B16? ¿Cuál es el tamaño de las células B16?

La línea celular B16 se estableció en 1954. Estas células se obtuvieron de ratones C57BL/6J a los que les apareció espontáneamente un tumor en la piel en los Laboratorios Jackson de Maine.
Se trata de células epiteliales productoras de melanina con capacidad de metástasis en el bazo, el hígado y los pulmones.
Las células B16 del melanoma crecen en monocapa y presentan una morfología celular de tipo epitelial y fusiforme.
El tamaño de la línea celular B16 es de aproximadamente 15,4 μm.
Existen distintos subclones de células B16, como B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 y B16F10. Estas sublíneas son diferentes de las células B16 progenitoras y conservan algunas características específicas. Por ejemplo, presentan diferencias en la morfología, el tamaño celular y otras propiedades. B16F10 tiene una gran capacidad metastásica pulmonar, y B164A5 es la línea celular de cáncer de piel más agresiva en comparación con B16F10, B16-GMCSF y B16FLT3 [1].

animación en 3D de un primer plano de un cáncer de piel en crecimiento, como el melanoma maligno, que inflama el tejido circundante.

2.información sobre el cultivo de la línea celular B16

Antes de mantener o cultivar una línea celular, es posible que busque información clave sobre el tiempo de duplicación, el tipo de célula, los medios de crecimiento, las condiciones de cultivo, etc. Esta sección contiene toda la información necesaria para el cultivo de células B16.

Puntos clave para el cultivo de células B16

Tiempo de duplicación de la población:	El tiempo medio de duplicación de la población de células B16 se estima en 24 horas.
Adherentes o en suspensión:	Las células B16 son adherentes y crecen en monocapas.
Densidad de siembra:	Se recomienda sembrar las células B16 a una densidad celular de 1 a 2 x¹⁰⁴ ^células/cm2. Las células B16 adheridas se enjuagan con 1 x PBS y se disocian de la superficie utilizando solución Accutase. Las células se centrifugan y el sedimento celular se resuspende en el medio de crecimiento. Posteriormente, estas células se dispensan en un nuevo matraz para su crecimiento.
Medio de crecimiento:	Las células B16 se cultivan en medio EMEM (medio esencial mínimo de Eagle) que contiene un 10 % de suero bovino fetal (FBS). El medio de crecimiento debe renovarse 2-3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:	Para cultivar la línea celular B16 se utiliza una incubadora humidificada con un suministro del 5 % de_CO2 y una temperatura de 37 °C.
Almacenamiento:	Estas células se almacenan a una temperatura inferior a -150 °C o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para proteger la viabilidad celular.
Proceso y medio de congelación:	El medio de congelación CM-1 o CM-ACF se utiliza para congelar las células B16 mediante un proceso de congelación lento.
Proceso de descongelación:	Las células B16 congeladas se descongelan a 37 °C en un baño de agua que contiene un agente antimicrobiano. Las células descongeladas pueden cultivarse directamente dispensándolas en matraces que contengan medio de crecimiento. Además, estas células pueden centrifugarse para eliminar los componentes del medio de congelación y luego cultivarse en medios nuevos.
Nivel de bioseguridad:	La línea celular B16 debe manipularse o mantenerse en el laboratorio de bioseguridad de nivel uno.

Capa semiconfluyente de células de melanoma B16 con aumentos de 10x y 20x.

3. línea celular B16: Ventajas e inconvenientes

Al igual que otras líneas celulares, la B16 posee una mezcla única de ventajas e inconvenientes. En esta sección se enumeran algunos pros y contras significativos de esta línea celular de melanoma.

Ventajas

B16 es la primera herramienta murina eficaz ampliamente utilizada en la investigación de la metástasis debido a las ventajas que ofrece. Algunas ventajas de esta línea celular de cáncer de piel son

Fácil de cultivar	La línea celular B16 es fácil de cultivar en los laboratorios de investigación. Se utiliza ampliamente para estudiar la biología de las células cancerosas, las vías de señalización, etc.
Crecimiento rápido	La línea celular de melanoma B16 presenta una alta tasa de proliferación, lo que la hace adecuada para estudiar la división celular y los procesos de crecimiento.
Tumorigenicidad	B16 es una línea celular tumorigénica con propiedades similares a las de los tumores, como invasión, migración y proliferación. Es valiosa para estudiar la formación, progresión y metástasis de tumores.

Desventajas

Las desventajas asociadas a la línea celular B16 son:

Falta de relevancia humana	Debido a que B16 es una línea celular de melanoma de ratón, es posible que no represente con exactitud la biología del cáncer de piel humano, lo que limita la traducibilidad de los resultados de la investigación.
Heterogeneidad	Las células B16 son heterogéneas y muestran propiedades genéticas y fenotípicas variadas dentro del mismo cultivo. Esto puede afectar a la fiabilidad y reproducibilidad de los resultados.

4. aplicaciones de las células B16

La línea celular B16 se utiliza ampliamente en estudios de investigación. Algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular son:

Biología tumoral: Esta línea celular murina de cáncer de piel es tumorigénica y se utiliza ampliamente para comprender la biología tumoral. Se han realizado varios estudios para explorar los mecanismos celulares que subyacen al crecimiento, la proliferación y la metástasis de las células tumorales utilizando células B16. Un estudio de investigación realizado en 2020 utilizó células B16 para investigar el papel del ARN no codificante largo, LncRNA MEG3, en la formación, crecimiento y metástasis del melanoma. Esta investigación descubrió que el ARN no codificante modula el eje miARN-21/E-Cadherina para estimular estos eventos celulares [2]. Del mismo modo, se investigó el papel potencial de la señalización Notch1 en la inmunosupresión inducida por tumores utilizando células B16 [3].
Descubrimiento de fármacos: Las células B16 se utilizan para validar y probar los posibles efectos terapéuticos de fármacos candidatos. Un estudio evaluó el efecto antitumoral del ácido neogambógico, un compuesto natural, utilizando una línea celular B16. Los resultados del estudio revelaron que este compuesto modula la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR para causar la muerte de las células cancerosas [4]. Otro estudio investigó el efecto antimelanoma del Ginsenoside Rg3, una saponina, utilizando la línea celular B16. La investigación propuso que este compuesto natural causaba actividad antitumoral mediante la regulación a la baja de las vías ERK y Akt [5].

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5.publicaciones de investigación sobre células B16

A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación significativas en las que aparece la línea celular de melanoma B16.

El LncRNA MEG3 promueve el crecimiento, la metástasis y la formación de melanoma a través de la modulación del eje miR-21/E-cadherina

Esta publicación en la revista Cancer Cell International (2020), propuso que el ARN no codificante largo MEG3 potencia la formación, el crecimiento y la metástasis de las células de melanoma B16 mediante la modulación del eje miRNA-21/E-Cadherina.

Un nuevo derivado del psoraleno-MPFC potencia la melanogénesis a través de la activación de las vías de señalización p38 MAPK y PKA en células B16

Este artículo se publicó en el International Journal of Molecular Medicine en 2018. Este estudio investigó el efecto melanogénico y los mecanismos de un derivado del psoraleno- 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] cromen-2-ona (MPFC) en células B16. El estudio propuso que este derivado promueve la melanogénesis mediante la estimulación de la señalización celular PKA y p38 MAPK.

La señalización de Notch1 en células de melanoma promovió la inmunosupresión inducida por el tumor a través de la regulación al alza de TGF-β1

Esta investigación se publicó en 2018 en la revista Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Los hallazgos del estudio sugieren que la activación de la señalización Notch1 en células B16 puede impedir la inmunidad antitumoral mediante el aumento de la expresión del gen TGF-β1.

El ácido neogambógico induce la apoptosis de células B16 de melanoma a través de la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR

Este estudio fue realizado por Chunlan Wu y sus colegas en 2020 y publicado en la revista Acta Biochimica Polonica. Esta investigación afirma que el ácido neogambógico, un compuesto natural, puede causar la muerte de células de melanoma B16 mediante la modulación de la cascada de señalización PI3K/Akt/mTOR.

Un complejo de iridio (III) como potente agente anticancerígeno induce la apoptosis y la autofagia en células B16 mediante la inhibición de la vía AKT/mTOR

Este trabajo de investigación se publicó en el European Journal of Medicinal Chemistry en 2018. En este estudio, los investigadores investigaron la actividad anticancerígena de un compuesto, complejo de iridio (III), utilizando células de melanoma B16.

La ailantona induce la detención del ciclo celular y la apoptosis en células de melanoma B16 y A375

Este estudio propone que un bioactivo vegetal, la ailantona, posee potencial anticancerígeno, ya que puede inducir la apoptosis y la detención del ciclo celular en células de melanoma B16 y A375. Este trabajo se publicó en Biomolecules en 2019.

6. recursos para la línea celular B16: Protocolos, vídeos y más

Existen recursos limitados sobre la línea celular B16 que explican sus protocolos de cultivo y transfección.

Cultivo de células de melanoma: Este vídeo ofrece valiosos consejos para el cultivo de líneas celulares de melanoma.
Subcultivo de una línea celular: Este vídeo explica un protocolo general de subcultivo para una línea celular.
Transfección de la línea celular B16F10: Este vídeo explica el protocolo de transfección para una sublínea de células de melanoma B16. Puede ayudarle a optimizar el protocolo de transfección para células B16.

A continuación se presentan algunos protocolos de cultivo celular para células B16.

Cultivo de células B16: Este sitio web contiene toda la información necesaria para el cultivo de células B16, incluidos los medios de crecimiento, el subcultivo, la descongelación y la congelación de células.

Referencias

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: Piel C57 BL/6J. Revista internacional de patología experimental, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 promueve el crecimiento del melanoma, la metástasis y la formación a través de la modulación de miR-21/E-cadherina eje. Célula de cáncer internacional, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 signaling in melanoma cells promoted tumor-induced immunosuppression via upregulation of TGF-β1. Revista de investigación experimental y clínica del cáncer, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., El ácido neogambógico induce la apoptosis de las células de melanoma B16 a través de la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Actividad antitumoral del ginsenósido Rg3 en melanoma a través de la regulación a la baja de las vías ERK y Akt. Revista internacional de oncología, 2019. 54(6): p. 2069-2079.