Células B16-F10 - Exploración de la línea celular de melanoma B16-F10 en la investigación de la metástasis
Las célulasB16-F10 constituyen una línea celular de melanoma procedente del ratón C57BL/6J. Se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer de piel. Los investigadores utilizan estas células para estudiar el desarrollo y la progresión tumoral y las intervenciones terapéuticas. Este artículo cubrirá los aspectos fundamentales de las células de melanoma B16-F10. En particular, incluirá:
- Origen y características generales de la línea celular B16-F10
- Información sobre el cultivo de células B16-F10
- Células B16-F10: Ventajas e inconvenientes
- Aplicaciones de las células B16-F10 en investigación
- Publicaciones sobre la línea celular B16-F10
- Recursos para la línea celular B16-F10: Protocolos, vídeos y más
1. Origen y características generales de la línea celular B16-F10
Esta sección le proporcionará información sobre el origen y los atributos distintivos de las células tumorales de melanoma B16F10. Le ayudará a utilizar la línea celular de forma eficiente en su trabajo de investigación. Principalmente, aprenderá: ¿Qué son las células B16-F10? ¿De qué deriva B16F10? ¿Cuál es la morfología de la línea celular B16F12? ¿Cuál es el tamaño de la célula B16F10?
- B16-F10 es un subclon de la línea celular tumoral B16 derivada del tejido cutáneo de ratones C57BL/6J. En este caso, las células de melanoma B16F10 se desarrollaron tras inyectar por vía intravenosa la línea B16 en ratones inmunocomprometidos o singénicos. Estas células se seleccionaron por su potencial para formar colonias pulmonares metastatizadas in vivo y luego se establecieron tras diez ciclos de formación de colonias pulmonares in vitro [1]. Fue desarrollada por Fidler y sus colegas en 1976.
- Las líneas celulares B16-F10 tienen un aspecto epitelial y fusiforme.
- El tamaño aproximado de las células B16-F10 es de 15,4 ± 1,4 μm [2].
Células B16-F1 y B16-F10
Las células B16-F1 y B16-F10 derivan de la línea celular parental B16. Ambas se originaron en la misma y poseen características casi similares. Sin embargo, la principal diferencia es su capacidad metastásica. Las células B16-F10 tienen un alto potencial metastásico, mientras que las B16-F1 lo tienen bajo [3].
2.información sobre el cultivo de células B16-F10
Antes de manipular y cultivar una línea celular, debe conocer su tiempo de duplicación, los medios de crecimiento, las condiciones y los protocolos de cultivo celular. En esta sección hablaremos de ello: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células B16-F10? ¿Cómo se cultivan las células B16-F10? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células B16-F10? ¿Qué condiciones de cultivo se recomiendan para las células B16-F10?
Puntos clave para el cultivo de células B16-F10
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de las células B16-F10 es de aproximadamente 20,1 horas. Puede oscilar entre 17 y 21 horas, dependiendo de las condiciones de cultivo. |
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Adherentes o en suspensión: |
B16-F10 es una línea celular adherente. Las células crecen rápidamente y forman monocapas. |
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Proporción de división: |
Las células B16-F10 se subcultivan en una proporción de división de 1:2 a 1:4. Las células se lavan con una solución de fosfato de sodio. Las células se lavan con tampón fosfato salino (1x) y luego se incuban con la solución de pasaje Accutase durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. Las células se añaden con medio fresco y se centrifugan. El sedimento celular recogido se resuspende de nuevo y las células se distribuyen en el nuevo matraz que contiene medio de cultivo fresco según la proporción de división. |
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Medio de cultivo: |
Las células B16-F10 se cultivan en medio DMEM. El medio se complementa con un 10% de FBS, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO3, 4,5 g/L de glucosa y 1,0 mM de piruvato sódico para un crecimiento celular ideal. Los medios deben sustituirse de 2 a 3 veces por semana. |
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Condiciones de crecimiento: |
Las células B16-F10 se cultivan en una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro del 5% de CO2. |
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Almacenamiento: |
Las células congeladas se almacenan por debajo de -150 °C en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para mantener la viabilidad celular. |
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Proceso y medio de congelación: |
Las células B16-F10 se congelan en medios CM-1 o CM-ACF para su almacenamiento. Para ello, se recomienda un proceso de congelación lento que sólo permita un descenso de la temperatura de 1°C por minuto, para evitar que las células sufran ningún choque. |
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Proceso de descongelación: |
Las células B16-F10 congeladas se descongelan en un baño de agua a 37°C durante 40 a 60 segundos. A continuación, las células se añaden a medio fresco y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. Las células recogidas se resuspenden en un medio de crecimiento y se vierten en matraces para su cultivo. |
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Nivel de bioseguridad: |
Se requiere un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manipular y mantener la línea celular B16-F10. |
3.células B16-F10: Ventajas e inconvenientes
Al igual que otras líneas celulares, B16-F10 también presenta algunas ventajas e inconvenientes. En esta sección se analizan algunos pros y contras significativos de esta línea celular de melanoma cutáneo.
Ventajas
La línea celular B16-F10 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer. Las ventajas de las células B16-F10 son:
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Potencial metastásico |
Las células de melanoma cutáneo B16F10 presentan un alto potencial metastásico, lo que las hace valiosas para estudiar la metástasis del cáncer y los mecanismos subyacentes. |
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Modelo tumoral in vitro |
Las células B16-F10 sirven como modelo in vitro para estudiar la progresión y el crecimiento del cáncer, ayudando a los investigadores a comprender los mecanismos celulares y moleculares que lo provocan. |
Desventajas
Las desventajas asociadas a la línea celular B16-F10 son:
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Línea celular derivada de ratón |
B16-F10 es una línea celular derivada de ratón, lo que limita su aplicabilidad a estudios específicos en humanos. Es posible que los resultados de la investigación con estas células no siempre se trasladen realmente a la biología humana. |
4.aplicaciones de las células B16-F10 en investigación
La línea celular B16-F10 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer. A continuación se comentan algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular.
- Investigación del cáncer: La línea celular B16-F10 es un modelo valioso para estudiar los procesos de las células cancerosas, como la proliferación, la invasión, la migración y la muerte celular o apoptosis. Además, ayuda a los investigadores a obtener conocimientos sobre los mecanismos moleculares y las vías que impulsan estos procesos celulares. Un estudio realizado en 2018 exploró el papel de CCR5 (receptor de quimioquinas C-C tipo cinco) en la transición de células de melanoma epiteliales a células mesenquimales y metástasis. Los hallazgos revelaron que la deficiencia de CCR5 restringe el crecimiento tumoral y la metástasis, mientras que la alta expresión conduce a un mayor crecimiento y metástasis de las células B16-F10. Otras investigaciones informaron de que CCR5 regula la expresión de TGFβ1, que regula la señalización PI3K/AKT/GSK3β para promover la transición epitelial a mesenquimal y la migración celular [4].
- Ensayo y desarrollo de fármacos: Las células tumorales de melanoma B16F10 son muy agresivas y, por tanto, adecuadas para probar posibles fármacos y tratamientos antitumorales. Los investigadores emplean estas células y evalúan el efecto de diferentes compuestos sobre el crecimiento celular, la proliferación y la metástasis, ayudando al desarrollo de fármacos. Un estudio realizado en 2018 por Valentina Nanni y sus colegas investigó los efectos terapéuticos del extracto hidroalcohólico de flores de Spartium junceum . El estudio propuso que el extracto de la flor era eficaz para inducir la senescencia en las células B16-F10, lo que conduce a la supresión del crecimiento celular y la melanogénesis, por lo tanto, puede ejercer actividades potenciales contra el cáncer [5].
5.publicaciones sobre la línea celular B16-F10
Éstas son algunas publicaciones de investigación significativas sobre la línea celular de melanoma B16-F10:
Este estudio se publicó en Nutrients (2020). Propone que el extracto etanólico de Sorghum bicolor tiene un efecto anti melanogénico en células de melanoma cutáneo B16F10.
El calcitriol inhibe la proliferación e induce potencialmente la apoptosis en células B16-F10
La investigación publicada en Medical Science Monitor Basic Research (2022) propuso que el fármaco calcitriol ejerce efectos antitumorales en células de melanoma B16-F10 al inhibir la proliferación e inducir la apoptosis.
Este artículo se publica en Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Los hallazgos revelaron que los cardoles, lípidos resorcinólicos, ejercen una intensa citotoxicidad sobre la línea celular B16-F10.
El estudio publicado en Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) exploró el potencial antimetastásico del extracto de exocarpo de Ginkgo biloba utilizando células B16-F10.
Esta investigación en World Neurosurgery (2018) propuso que la timoquinona puede ser una terapia eficaz contra las lesiones metastásicas intracerebrales, ya que suprime el crecimiento de las células B16-F10 e induce la apoptosis.
6.recursos para la línea celular B16-F10: Protocolos, vídeos y más
Las células endoteliales B16F10 se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer de piel. He aquí algunos recursos en línea que explican sus protocolos de cultivo y transfección:
- Transfección de células de melanoma B16F10: Este videotutorial puede ayudarle a aprender el protocolo de transfección de células B16-F10.
- Transfección de células B16-F10: Este documento explicará el protocolo de transfección de ADN in vitro para células de melanoma cutáneo B16F10.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo celular para células B16-F10:
- Subcultivo de células B16-F10: Este sitio web contiene información útil sobre las células tumorales de melanoma B16F10. Incluye medios de crecimiento, tiempo de duplicación, condiciones de cultivo y protocolo para subcultivo de células, y manejo de cultivos criopreservados y proliferativos.
Referencias
- Poste, G., et al., Comparación de las propiedades metastásicas de clones de melanoma B16 aislados de líneas celulares cultivadas, tumores subcutáneos y metástasis pulmonares individuales. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, y S. Sugita, Mecanofenotipado de variantes celulares de melanoma B16 para la evaluación de la eficacia del tratamiento con galato de (-)-epigalocatequina utilizando un dispositivo microfluídico cónico. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Comportamiento de cuatro sublíneas diferentes de células de melanoma murino B16: Piel C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., La alta expresión de CCR5 en el melanoma mejora la transición epitelial-mesenquimal y la metástasis a través de TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Extracto hidroalcohólico de flores de Spartium junceum L. inhibe el crecimiento y la melanogénesis en células B16-F10 induciendo senescencia. Fitomedicina, 2018. 46: p. 1-10.