Publicado: 2023 | Última revisión: mayo de 2026

Guía completa de buenas prácticas en el almacenamiento de células

Resumen de la gestión de cultivos celulares

La gestión eficaz de los cultivos celulares es esencial para mantener su integridad con fines de investigación y aplicaciones terapéuticas. El cultivo continuo o prolongado de líneas celulares puede dar lugar a diversas complicaciones, tales como:

• Contaminación microbiana: Los cultivos abiertos son vulnerables a diversas infecciones microbianas que pueden alterar el comportamiento y la viabilidad de las células.
• Alteración de las características: Las características celulares clave, como la expresión de antígenos o la producción de anticuerpos, pueden perderse con el tiempo.
• Variación genética: puede producirse inestabilidad genómica en líneas celulares conocidas por sus cariotipos inestables, lo que da lugar a resultados experimentales poco fiables.
• Limitación de la vida útil: Ciertos tipos de células tienen un número limitado de divisiones antes de entrar en senescencia y dejar de proliferar.
• Riesgo de contaminación cruzada: El cultivo prolongado aumenta el riesgo de que una línea celular contamine a otra, lo que da lugar a datos erróneos.
• Intensidad de recursos: Los cultivos a largo plazo exigen más consumibles y mayor mano de obra, lo que eleva los costes de forma significativa.

Enfoque estratégico para el almacenamiento de células

Un sistema de banco de células es un enfoque estratégico para mitigar los riesgos mencionados anteriormente. El sistema recomendado es el sistema de banco de células maestro, que implica los siguientes pasos:

1. Cuarentena inicial: Los cultivos celulares recién adquiridos deben aislarse y tratarse en condiciones de cuarentena estrictas para evitar la contaminación del laboratorio.
2. Creación de un stock de reserva: Tras la expansión inicial del cultivo, se debe criopreservar un pequeño número de ampollas (3-5) como stock de reserva para casos de emergencia.
3. Formación del Banco Maestro de Células: Expandir los cultivos a partir de una ampolla del Stock de Reserva para establecer un Banco Maestro de Células, compuesto por un mayor número de ampollas (10-20 o más, en función del uso previsto).
4. Control de calidad riguroso: Una submuestra del banco maestro de células se somete a exhaustivas pruebas de control de calidad, que incluyen la evaluación de la viabilidad celular, la confirmación de la ausencia de contaminantes microbianos y, potencialmente, la realización de pruebas virales y de autenticidad.
5. Desarrollo del banco de células de trabajo: A continuación, se utiliza una parte del banco maestro de células para crear un banco de células de trabajo, que es la fuente principal para la investigación y la aplicación activas.

Protocolos detallados de control de calidad

El control de calidad es una parte crucial del mantenimiento de un banco de células. Abarca:

• Pruebas de viabilidad y recuento: garantizar que las células estén vivas y presentes en cantidades suficientes.
• Cribado microbiano: pruebas periódicas para detectar bacterias, hongos y micoplasmas con el fin de evitar que los cultivos celulares se vean comprometidos.
• Procedimientos de autenticación: Confirmación de la identidad de las líneas celulares mediante métodos como el perfil de ADN.

Recomendaciones de almacenamiento y uso

Las condiciones de almacenamiento adecuadas son las siguientes:

• Instalaciones de almacenamiento específicas: Utilizar instalaciones diseñadas específicamente para el almacenamiento de bancos de células, como tanques de nitrógeno líquido o congeladores eléctricos, para evitar la contaminación cruzada y garantizar la viabilidad a largo plazo.

Consistencia y garantía de calidad:

• Material celular consistente: un sistema de banco de células garantiza que todos los materiales utilizados en los experimentos procedan de una fuente consistente.
• Número de pases controlado: Al utilizar células dentro de un rango controlado de números de pases, se minimiza la variabilidad experimental.
• Práctica de cultivo «justo a tiempo»: Cultivar las células solo cuando es necesario ayuda a preservar las características originales de la línea celular y reduce los costes asociados al mantenimiento de cultivos continuos.