Células Vero: abriendo nuevos caminos en los estudios virales y la innovación en vacunas

La línea celular Vero, un modelo de células mamíferas inmortalizadas derivadas de las células epiteliales renales del mono verde africano, se sitúa a la vanguardia de la investigación en virología, microbiología y biología celular y molecular. Su amplia aplicación abarca el desarrollo de vacunas, los cribados farmacéuticos y la exploración de la biología de virus y parásitos, la inmunología tumoral y las estrategias inmunoterapéuticas.

Origen y características principales de las células Vero

Al profundizar en una línea celular como la de Vero surgen varias preguntas: ¿Qué son exactamente las células Vero? ¿Cómo se estableció la línea celular Vero? ¿Cuál es la historia detrás del nombre «Vero»? Este apartado tiene como objetivo esclarecer el origen y las principales características de las células Vero.

El origen de la línea celular Vero se remonta a 1962 y proviene de las células epiteliales renales del mono verde africano. Esta línea fue cultivada por Y. Kawakita y Yasumura en la Universidad de Chiba, en Japón. El término «Vero» deriva de «Verda reno» en esperanto, que se traduce como «riñón verde», aunque «Vero» también evoca la noción de «verdad».

Las células Vero suelen formar monocapas, pero pueden adaptarse a cultivos en suspensión, mostrando una estructura de tipo epitelial. Estas células se caracterizan por su forma redondeada o alargada y un diámetro medio de unos 17 µm. Cabe destacar que las células Vero presentan un número cromosómico hipodiploide, siendo el número modal de cromosomas 58 en aproximadamente el 66 % de la población celular, aunque existen variaciones con ploidías más altas en una pequeña fracción (1,7 %) de las células.

Clones de células Vero y sus propiedades únicas

Los distintos clones derivados del linaje celular Vero presentan características únicas que los distinguen de la línea original. Entre ellos, destacan dos clones de células Vero:

• Línea celular Vero E6: También conocida como Vero C1008, este clon proviene de las células Vero 76 y fue aislado en 1979 por P. J. Price mediante una técnica de dilución en placas de microtitulación. Las células Vero E6 son especialmente adecuadas para el cultivo de virus que se replican lentamente.

• Células Vero 76: Procedentes del riñón de un mono verde africano en 1968, estas células conservan la morfología epitelial característica de las células Vero.

Estas variantes de las células Vero, junto con la línea parental, siguen siendo fundamentales para el avance de la investigación virológica y el desarrollo de intervenciones médicas, lo que pone de manifiesto su importancia en la comunidad científica.

Información sobre el cultivo

El cultivo de células Vero, una línea celular de mono, requiere conocer parámetros específicos como el tiempo de duplicación, la densidad de siembra y el medio de cultivo adecuado.

• Tiempo de duplicación de la población: El tiempo de duplicación de las células Vero es de unas 24 horas.

• Adherencia: Las células Vero se adhieren a las superficies y suelen formar monocapas cuando se cultivan.

• Densidad de siembra: Es recomendable comenzar con una densidad de siembra de 1 x 10^4 células/cm^2. Para cultivar células Vero adherentes, lávalas con PBS y trátalas con Accutase para desprendarlas. Tras el desprendimiento, centrifugue las células, resuspenda en medio fresco y transfiéralas a nuevos frascos de cultivo.

• Medio de crecimiento: Tanto el F12 de Ham como el DMEM son medios adecuados para el cultivo de células Vero. Estos deben suplementarse con 2,5 mM de L-glutamina y un 5 % de suero fetal bovino (FBS) para favorecer un crecimiento óptimo. El medio debe renovarse dos o tres veces por semana.

• Condiciones de crecimiento: Las células Vero prosperan a una temperatura de 37 °C en una atmósfera humidificada con un 5 % de CO₂.

• Almacenamiento: Para el almacenamiento a largo plazo, las células Vero deben conservarse a temperaturas inferiores a -150 °C, ya sea en un congelador de temperatura ultrabaja o en la fase de vapor de nitrógeno líquido.

• Proceso de congelación y medio: Para la crioconservación, utilice CM-1 o CM-ACF, o el medio de cultivo con FBS y DMSO, como medio de congelación. Emplee una técnica de congelación lenta, reduciendo la temperatura gradualmente a razón de 1 °C por minuto.

• Proceso de descongelación: Descongele las células Vero sumergiendo el recipiente en un baño de agua a 37 °C y agítelo suavemente durante 40-60 segundos. A continuación, diluya las células en medio fresco, centrifúgelas para eliminar el crioprotector, resuspenda en medio de cultivo fresco y colóquelas en un nuevo frasco para su recuperación y cultivo.

• Nivel de bioseguridad: Las células Vero deben manipularse en un laboratorio que cumpla los requisitos del nivel de bioseguridad 1.

Aplicaciones de la línea celular Vero en la investigación

La línea celular Vero tiene numerosas aplicaciones de investigación en los campos de la biología celular y la virología. A continuación, analizamos algunas de ellas en concreto.

Las células Vero en la investigación viral y la producción de vacunas

Las células Vero, derivadas de células renales de mono verde africano, se han convertido en un elemento básico en el desarrollo de bioprocesos para la producción de vacunas contra diversos virus, entre ellos el poliovirus y el virus de la encefalitis japonesa. Su adaptabilidad tanto en cultivos adherentes como en suspensión, así como su amplia capacidad para albergar virus —incluidos patógenos como el virus de los pequeños rumiantes—, ponen de relieve su importancia en el aislamiento de virus y el desarrollo de vacunas.

Numerosos estudios han utilizado células Vero para la producción de vacunas humanas. Por ejemplo, un estudio destacado publicado en 2019 demostró el uso de células Vero en el desarrollo de una vacuna inactivada contra el virus de la fiebre amarilla [2].

Las células Vero se utilizan habitualmente en estudios de infección viral, como un estudio realizado en 2020 en el que se infectaron células Vero con diferentes aislados del virus SARS-CoV-2 para estudiar las propiedades de crecimiento del virus [4]. Del mismo modo, otro estudio investigó las respuestas celulares a la infección por SARS-CoV-2 utilizando un cultivo de células Vero [5].

El papel de las células Vero en la ingeniería de tejidos y el desarrollo de bioprocesos en fase inicial

Más allá de la producción de vacunas, las células Vero contribuyen a la ingeniería de tejidos y al campo más amplio del desarrollo de bioprocesos, lo que subraya la necesidad de una investigación continua sobre sus propiedades y aplicaciones. La selección de sublíneas adecuadas de células Vero es clave para maximizar su potencial en las industrias biotecnológica y farmacéutica.

Aplicación de las células Vero en las pruebas de eficacia y seguridad de los medicamentos

Las células Vero se emplean con frecuencia en ensayos de fármacos para evaluar la eficacia y la seguridad de los compuestos farmacéuticos. Estas células suelen considerarse un modelo estándar de células renales normales en estudios que investigan los efectos citotóxicos de diversos fármacos y agentes terapéuticos. Por ejemplo, una investigación que comparó el impacto de los extractos de raíz de la planta Terminalia avicennioides tanto en HepG2 —una línea celular de cáncer de hígado— como en las células Vero, derivadas del epitelio renal de mono, reveló que los extractos resultaban más perjudiciales para las células cancerosas que para las células normales.

Limitaciones de las células Vero

Aunque las células Vero se utilizan ampliamente, presentan ciertas limitaciones, como la producción de toxina Vero y alteraciones genómicas que pueden afectar a determinadas aplicaciones. Comprender las sublíneas específicas y las características genómicas de las células Vero, incluido el linaje F6 de Vero, es esencial para optimizar su uso en diversos bioprocesos.

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Publicaciones de investigación

A continuación se presentan algunas de las publicaciones de investigación más recientes y más citadas sobre las células Vero.

Adaptación de las células Vero al crecimiento en suspensión para la producción del virus de la rabia en diferentes medios sin suero

Este estudio, publicado en la revista Vaccine (2019), adaptó las células Vero para que crecieran en cultivos en suspensión con el fin de producir el virus de la rabia en títulos elevados utilizando diversos medios sin suero.

Susceptibilidad de Toxoplasma gondii al extracto etanólico de Tinospora crispa en células Vero

Este artículo se publicó en la revista «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» en 2019. El estudio propuso que el extracto etanólico de la planta Tinospora crispa ejerce un efecto perjudicial sobre el parásito Toxoplasma gondii. Sin embargo, es seguro para las células huésped (la línea celular Vero).

Efectos del extracto de hojas de Colchicum baytopiorum sobre la citotoxicidad y las vías de muerte celular en las líneas celulares C-4 I y Vero

Este artículo fue publicado por la revista «Journal of the Balkan Union of Oncology» en 2021. En este estudio, Ozlem Dagdeviren Ozsoylemez y Gul Ozcan analizaron el efecto citotóxico del extracto de hojas de Colchicum baytopiorum en las líneas celulares C-4I y Vero.

El resveratrol inhibe la replicación del coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo grave (SARS-CoV-2) en células Vero cultivadas

Este estudio, publicado en *Phytotherapy Research* (2021), utilizó células Vero infectadas con el SARS-CoV-2 para investigar el efecto terapéutico del resveratrol sobre la replicación del virus.

Las estatinas lipofílicas inhiben la producción del virus del Zika en células Vero

Este artículo publicado en *Nature Scientific Reports* (2019) propone que las estatinas lipofílicas —es decir, la cerivastatina, la lovastatina, la fuvastatina, la simvastatina y la mevastatina— pueden impedir la producción del virus del Zika en células Vero.

Recursos para células Vero: protocolos, vídeos y más

• Transfección de células Vero: este enlace le guiará a través de un protocolo de transfección para células Vero.
• Transfección de la línea celular Vero: este vídeo explica un protocolo de transfección para la línea celular Vero.
• Subcultivo de células Vero: este vídeo describe recomendaciones generales para el subcultivo de líneas celulares adherentes.

Protocolos de cultivo celular

• Cultivo de células Vero: esta página web contiene un protocolo bien explicado para el cultivo de células Vero.
• Cultivo de células Vero: Este documento puede ayudarte a conocer el protocolo para la propagación, el mantenimiento y la congelación de células Vero.

Referencias

1. Ammerman, N.C., M. Beier‐Sexton y A.F. Azad, «Crecimiento y mantenimiento de líneas celulares Vero». Current protocols in microbiology, 2008. 11(1): p. A. 4E. 1–A. 4E. 7.
2. Pato, T.P., et al., «Purificación del virus de la fiebre amarilla producido en células Vero para la fabricación de vacunas inactivadas». Vaccine, 2019. 37(24): p. 3214–3220.
3. Aliyu-Amoo, H., et al., Efecto antiproliferativo de extractos y fracciones de la raíz de Terminalia avicennioides (Combretaceae) Guill. y Perr. sobre las líneas celulares HepG2 y Vero. Clinical Phytoscience, 2021, 7(1): p. 1–7.
4. Yao, P., et al., Aislamiento y características de crecimiento del SARS-CoV-2 en células Vero. *Virologica Sinica*, 2020. 35(3): p. 348–350.
5. Park, B.K., et al., Señalización diferencial y producción de virus en células Calu-3 y Vero tras la infección por el SARS-CoV-2. Biomolecules & Therapeutics, 2021. 29(3): p. 273.