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Células U87MG: investigación sobre el glioblastoma con la línea celular U87MG y su impacto en los estudios sobre el cáncer cerebral

La U-87 MG, una línea celular de glioblastoma primario humano, se utiliza ampliamente en la investigación biológica. En concreto, estas células se emplean en los campos de la neurociencia y la inmuno-oncología.

📋 Línea celular U-87 MG: datos básicos
Medio de cultivo
La línea celular U-87 MG se cultiva en EMEM (medio esencial mínimo de Eagle) enriquecido con 1,0 g/L de L-glucosa, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, un 1 % de NEAA, 1 mM de piruvato de sodio y una solución al 10 % de FBS. El medio debe renovarse cada 2 o 3 días.
Tiempo de duplicación
Las células U 87 MG tienen un tiempo de duplicación de la población que oscila entre 18 y 38 horas.
Tipo de crecimiento
La U 87 MG es una línea celular adherente. Las células presentan una forma alargada y crecen en monocapas.
Nivel de bioseguridad
BSL-1
Disponible en
Cytion — Pedir U-87 MG

Características generales y origen de la línea celular U-87 MG

En esta sección se repasan el origen y las características generales de la línea celular U-87 MG. Descubrirás: ¿Qué son las células U-87 MG? ¿De dónde proceden las células U-87? ¿Cuál es la forma completa de U-87 MG? ¿Qué tamaño tienen las células U-87? ¿Cuál es la morfología de la línea celular U-87 MG?

  • La línea celular U87 es una línea celular de glioblastoma y astrocitoma. Se estableció en 1966 en la Universidad de Uppsala. Las células se obtuvieron de un varón caucásico de 44 años que padecía un glioblastoma. Esta línea celular se denomina oficialmente U 87 MG, que significa «glioma maligno de Uppsala 87».
  • Las células U 87 MG presentan una morfología similar a la de las células epiteliales.
  • El tamaño de las células U 87 MG oscila entre 12 y 14 µm de diámetro.
  • Esta línea celular de glioblastoma humano es hipodiploide y presenta un número modal de cromosomas de 44 en aproximadamente el 48 % de la población celular. Sin embargo, también existen ploidías más elevadas en el 5,9 % de la población celular.

Animación médica en 3D que explica el origen de los tumores a partir de los astrocitos.

Información sobre el cultivo de células U-87 MG

Antes de trabajar con células U 87 MG, debes conocer los siguientes puntos clave para el cultivo de estas células de glioblastoma. En concreto, debes saber: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de la población de las células U 87 MG? ¿Qué medios se utilizan para el cultivo de las células U87? ¿Cuál es la densidad de siembra de la línea celular U-87 MG?

Puntos clave para el cultivo de células U-87 MG

Tiempo de duplicación de la población:

Las células U 87 MG tienen un tiempo de duplicación de la población que oscila entre 18 y 38 horas.

Adherentes o en suspensión:

La U-87 MG es una línea celular adherente. Las células tienen una forma alargada y crecen en monocapas.

Densidad de siembra:

Se recomienda sembrar la línea celular de glioblastoma U 87 MG a una densidad celular de 1 × 10 células/cm². Las células U 87 adherentes se lavan con PBS 1× y se incuban con solución de Accutase. A continuación, las células disociadas se centrifugan y se recuperan. Las células se resuspenden cuidadosamente y se añaden a nuevos frascos que contienen medio de crecimiento.

Medio de cultivo:

La línea celular U 87 MG se cultiva en EMEM (medio esencial mínimo de Eagle) enriquecido con 1,0 g/L de L-glucosa, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, un 1 % de NEAA, 1 mM de piruvato de sodio y una solución al 10 % de FBS. El medio debe renovarse cada 2 o 3 días.

Condiciones de crecimiento:

Las células U-87 MG requieren una incubadora humidificada con un suministro de CO₂ al 5 % y una temperatura de 37 °C para un crecimiento óptimo.

Almacenamiento:

Las células U87 se conservan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150 °C para mantener la máxima viabilidad de las células de glioblastoma.

Proceso de congelación y medio:

Los medios de congelación CM-1 o CM-ACF son adecuados para congelar las células U 87 MG. Se recomienda un proceso de congelación lenta, ya que evita que las células sufran cualquier tipo de choque y protege su viabilidad.

Proceso de descongelación:

Los viales congelados de la línea celular U-87 MG se descongelan en un baño de agua a 37 °C. Se añaden medios de crecimiento a las células, se resuspenden y se transfieren a nuevos frascos para su cultivo. Por el contrario, las células U87 pueden centrifugarse para eliminar el medio de congelación y, a continuación, cultivarse.

Nivel de bioseguridad:

Se requiere un nivel de bioseguridad 1 para la manipulación de cultivos celulares de U-87 MG.

U87mg cells

Células U-87 MG observadas al microscopio con un aumento de 10x y 20x.

Ventajas y desventajas de las células U-87 MG

Cuando pensamos en una línea celular, lo primero que nos viene a la mente es: ¿cuáles son las ventajas de utilizar células U-87 MG? ¿Cuáles son las desventajas de las células U-87?

Ventajas

Las líneas celulares U-87 MG se utilizan ampliamente en investigación. Algunas de las ventajas asociadas a esta línea celular son:

Ventajas

  • Fáciles de cultivar: las células U-87 MG son fáciles de mantener en cultivo. No requieren condiciones de cultivo exigentes ni complicadas.
  • Homogeneidad: la U-87 MG es una línea celular homogénea. La mayoría de las células de una población poseen la misma composición genética y, por lo tanto, comparten características similares. Estas células se utilizan para estudiar procesos celulares, cribado de fármacos y ensayos.
  • Bien caracterizada: Esta línea celular de glioblastoma está bien caracterizada en cuanto a sus características de crecimiento, morfología y expresión génica, lo que la convierte en una valiosa herramienta de investigación.

Desventajas

  • Aplicabilidad limitada: La U-87 MG es una línea celular de glioblastoma, por lo que sus aplicaciones se limitan principalmente al estudio de los glioblastomas y de los mecanismos moleculares subyacentes. Puede que no sea adecuada para investigar otros tipos de cáncer.

Aplicaciones de investigación con células U-87 MG

La línea celular de glioblastoma U87MG se utiliza ampliamente en estudios sobre el cáncer, especialmente en la investigación del glioblastoma. Algunas de las aplicaciones de investigación de las células U 87 MG son:

  • Investigación en biología del cáncer: La línea celular U-87 MG se utiliza para estudiar el crecimiento y el desarrollo del cáncer, los mecanismos moleculares subyacentes, las vías de señalización y el microambiente tumoral. Un estudio publicado en 2020 utilizó un modelo in vitro de glioblastoma, la línea celular U-87 MG, para investigar el gen BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) como diana terapéutica. Los resultados mostraron que el gen BMAL1 inhibe la proliferación, la migración y la invasión de las células del glioblastoma al suprimir la expresión génica de la ciclina B1, la metaloproteasa-9 y la fosfo-AKT [1]. Otra investigación llevada a cabo en 2019 utilizó la línea celular U87 e investigó que la regulación a la baja de la expresión del factor de transcripción LITAF (factor de necrosis tumoral alfa inducido por lipopolisacáridos) puede aumentar la radiosensibilidad de las células de glioma a través de la regulación al alza de la vía FOXO-1. El LITAF también se conoce como gen 7 inducido por p53 (PIG7) [2].
  • Descubrimiento y desarrollo de fármacos: las células U-87 MG pueden utilizarse para el cribado y ensayo de fármacos, lo que permite a los investigadores identificar nuevos fármacos anticancerosos potenciales y evaluar su eficacia y toxicidad. En un estudio se utilizó la línea celular de glioblastoma U-87 MG para evaluar el potencial anticancerígeno y antioxidante del extracto de Inula helenium (L.) [3]. Del mismo modo, otra publicación mencionó el uso de la línea celular U-87 para evaluar el efecto citotóxico y apoptótico de extractos vegetales [4]. Además, un estudio publicado en 2018 analizó el efecto citotóxico de los alcaloides sesquiterpénicos extraídos de plantas del género Nuphar sobre líneas celulares U-87 MG sensibles y resistentes a los fármacos [5].

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Línea celular U-87 MG: Publicaciones de investigación

A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación destacadas sobre la línea celular U-87 MG.

La hipoxia potencia la migración y la invasión de las células del glioblastoma humano U87 a través de la vía PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α

Este artículo, publicado en Neuroreport en 2018, proponía que la hipoxia podría aumentar la migración y la invasión de las células del glioblastoma humano mediante la regulación de la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.

El eriodictiol inhibe la proliferación y la metástasis e induce la apoptosis de las células de glioma a través de la vía de señalización PI3K/Akt/NF-κB

Este estudio se publicó en la revista *Frontiers in Pharmacology* en 2020. Los resultados de la investigación indican que un flavonoide, el eriodictiol, ejerce efectos anticancerígenos sobre la línea celular U87 y suprime la proliferación celular y la metástasis. El compuesto ejerce sus propiedades antitumorales mediante la modulación de la vía PI3K/Akt/NF-κB.

La píldora Xihuang induce la apoptosis de las células del glioblastoma humano U-87 MG al actuar sobre la vía Akt/mTOR/FOXO1 mediada por ROS

Esta investigación, publicada en Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), sugiere que una fórmula a base de hierbas chinas denominada píldora Xihuang puede inducir la apoptosis en las células U87 al actuar sobre la cascada Akt/mTOR/FOXO1 activada por las ROS.

LITAF aumenta la radiosensibilidad de las células de glioma humano a través de la vía FoxO1

Este artículo de investigación se publicó en la revista *Cellular and Molecular Neurobiology* en 2019. El estudio propuso que un factor de transcripción, LITAF, reduce la expresión de FOXO-1 y aumenta la radiosensibilidad de las células de glioma mediante la regulación de la vía de señalización de FOXO-1.

Preparación de nanopartículas de PLGA cargadas con curcumina e investigación de sus efectos citotóxicos en células U87MG de glioblastoma humano

Este artículo se publicó en Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Los investigadores utilizaron células U87MG para investigar el efecto citotóxico de las nanopartículas de PLGA cargadas con curcumina.

Recursos sobre las células U-87 MG: protocolos, vídeos y más

La línea celular de glioblastoma U87MG se utiliza en muchos laboratorios de investigación sobre el cáncer. Algunos recursos relacionados con esta línea celular son:

A continuación se incluye el recurso con el protocolo de cultivo celular de las células U87:

  • Células U87 MG: este enlace contiene información básica sobre la línea celular U87 MG. Incluye breves protocolos de división, congelación y descongelación de células.

Perspectivas en la investigación del glioma U87 MG: Preguntas frecuentes

Las líneas celulares de glioma, como las células de glioblastoma U87, son células cultivadas derivadas de gliomas humanos que se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer para estudiar la biología tumoral, la genética y la respuesta a los fármacos. Sirven como modelos para comprender el comportamiento tumoral y probar estrategias terapéuticas.

Una línea celular isogénica se refiere a células derivadas de una única célula, lo que garantiza la uniformidad genética. En la investigación del glioma, las líneas isogénicas proporcionan un modelo consistente para estudiar los cambios genéticos y su impacto en el crecimiento tumoral y la respuesta a los tratamientos.

El perfil de ADN de las líneas celulares de glioma es fundamental para identificar alteraciones genéticas, comprender la evolución de los tumores y desarrollar terapias dirigidas. Ayuda a clasificar los tumores en función de marcadores genéticos como las mutaciones de IDH1.

El suero en los medios de cultivo celular proporciona factores de crecimiento, hormonas y nutrientes esenciales a las células de glioma. Sin embargo, su composición puede afectar a la reproducibilidad experimental, por lo que cada vez se utilizan más condiciones sin suero o con suero definido.

La citotoxicidad celular en líneas celulares de glioma se evalúa mediante ensayos como la citometría de flujo, que mide la salud, viabilidad y muerte celular tras el tratamiento con fármacos o células inmunitarias como las células asesinas naturales (NK).

La citotoxicidad de las células NK desempeña un papel fundamental en la investigación del tratamiento del glioma, ya que las células NK pueden reconocer y eliminar células tumorales sin sensibilización previa. El estudio de las interacciones de las células NK con las células de glioma ayuda a desarrollar estrategias para mejorar la eliminación de tumores mediada por células NK.

El tumor de origen proporciona un contexto sobre el entorno biológico original y las características del tumor. Comprender esto ayuda a correlacionar los hallazgos de los estudios de líneas celulares con el comportamiento real del tumor y el pronóstico del paciente.

La microscopía electrónica ofrece una visualización detallada de las estructuras celulares y subcelulares en líneas celulares de glioma, lo que resulta crucial para examinar la morfología celular, la salud de los orgánulos y los cambios tras los tratamientos.

El ligando NKG2D se expresa en las células tumorales y se une al receptor NKG2D de las células NK, desencadenando una respuesta citotóxica. El estudio de esta interacción ayuda a comprender y potencialmente mejorar las respuestas inmunitarias contra el glioma.

los modelos de cultivo celular en 3D imitan con mayor precisión el microentorno tumoral, lo que permite comprender mejor el crecimiento, la migración y la resistencia a los fármacos de los gliomas. Esta técnica es crucial para realizar estudios oncológicos traslacionales más pertinentes.

Referencias

  1. Gwon, D.H., et al., «BMAL1 suprime la proliferación, la migración y la invasión de las células U87MG mediante la regulación a la baja de la ciclina B1, la AKT fosforilada y la metaloproteasa-9». Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
  2. Huang, C., et al., «LITAF potencia la radiosensibilidad de las células de glioma humano a través de la vía FoxO1». Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
  3. Koc, K., et al., «Actividades antioxidantes y anticancerígenas del extracto de Inula helenium (L.) en la línea celular humana de glioblastoma U-87 MG». J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
  4. Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh y A. Ghasempour, «Citotoxicidad e inducción de la apoptosis en células de cáncer de mama, cáncer de piel y glioblastoma mediante extractos vegetales». Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
  5. Fukaya, M., et al., «Citotoxicidad de los alcaloides sesquiterpénicos de las plantas del género Nuphar frente a líneas celulares sensibles y resistentes a los fármacos». Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.

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