Células U87MG - Investigación del glioblastoma con U87MG y su impacto en los estudios sobre el cáncer cerebral
U-87 MG, la línea celular primaria de glioblastoma humano, se utiliza ampliamente en la investigación biológica. En particular, estas células se emplean en los campos de la neurociencia y la inmuno-oncología.
Características generales y origen de la línea celular U-87 MG
Esta sección repasará el origen y las características generales de la línea celular U87. Aprenderá ¿Qué son las células U-87 MG? ¿De dónde proceden las células U87? ¿Cuál es la forma completa de U-87 MG? ¿Qué tamaño tienen las células U87? ¿Cuál es la morfología de la línea celular U87?
- La línea celular U87 es una línea celular de glioblastoma y astrocitoma. Se creó en 1966 en la Universidad de Uppsala. Las células se obtuvieron de un varón caucásico de 44 años que padecía la enfermedad de glioblastoma. Esta línea celular se denomina formalmente U 87 MG, siglas de Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Las células U 87 MG presentan una morfología similar a la de las células epiteliales.
- El tamaño de las células U 87 MG oscila entre 12 y 14 µm de diámetro.
- Esta línea celular de glioblastoma humano es hipodiploide y posee un número cromosómico modal de 44 en aproximadamente el 48% de la población celular. Sin embargo, también existen ploidías superiores en el 5,9% de la población celular.
Información sobre el cultivo de células U-87 MG
Antes de trabajar con células U 87 MG, debe conocer los siguientes puntos clave para el cultivo de estas células de glioblastoma. En particular, debe saber ¿Cuál es el tiempo de duplicación de la población de células U 87 MG? ¿Qué medio se utiliza para el cultivo de células U87? ¿Cuál es la densidad de siembra de la línea celular U 87 MG?
Puntos clave para el cultivo de células U-87 MG
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Tiempo de duplicación de la población: |
Las células U 87 MG tienen un tiempo de duplicación de la población que oscila entre 18 y 38 horas. |
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Adherentes o en suspensión: |
U 87 MG es una línea celular adherente. Las células tienen forma alargada y crecen en monocapa. |
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Densidad de siembra: |
Se recomienda sembrar la línea celular de glioblastoma U 87 MG a una densidad celular de 1 x104 células/cm2. Las células U87 adherentes se lavan con 1 x PBS y se incuban con solución de Accutase. Después, las células disociadas se centrifugan y se recuperan. Las células se resuspenden cuidadosamente y se añaden a nuevos matraces que contienen medio de crecimiento. |
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Medio de crecimiento: |
La línea celular U 87 MG se cultiva en EMEM (medio esencial mínimo de Eagle) aumentado con 1,0 g/L de L-glucosa, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO3, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato sódico y solución de FBS al 10%. Los medios deben renovarse cada 2 o 3 días. |
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Condiciones de crecimiento: |
Las células U-87 MG requieren un incubador humidificado con un suministro del 5% de CO2 y a 37°C de temperatura para un crecimiento óptimo. |
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Almacenamiento: |
Las células U87 se conservan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150°C para mantener la máxima viabilidad de las células de glioblastoma. |
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Proceso y medio de congelación: |
Los medios de congelación CM-1 o CM-ACF son adecuados para congelar células U 87 MG. Se recomienda un proceso de congelación lento ya que previene a las células de cualquier shock y protege la viabilidad celular. |
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Proceso de descongelación: |
Los viales congelados de la línea celular U-87 MG se descongelan en un baño de agua a 37ºC. Las células se añaden con medio de crecimiento, se resuspenden y se dispensan para cultivarlas en nuevos frascos. Por el contrario, las células U87 pueden centrifugarse para eliminar el medio de congelación y luego cultivarse. |
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Nivel de bioseguridad: |
Se requiere un nivel de bioseguridad 1 para manipular cultivos de células U 87 MG. |
Ventajas e inconvenientes de las células U-87 MG
Cuando pensamos en una línea celular, lo primero que nos viene a la mente es: ¿Qué ventajas tiene utilizar células U-87 MG? ¿Cuáles son las desventajas de las células U87?
Ventajas
Las líneas celulares U 87 MG se utilizan ampliamente en investigación. Algunas ventajas asociadas a esta línea celular son:
Ventajas
- Fácil de cultivar: Las células U 87 MG son fáciles de mantener en cultivo. No requieren requisitos de cultivo celular exigentes o complicados
- Homogeneidad: U-87 MG es una línea celular homogénea. La mayoría de las células de una población poseen la misma composición genética y, por lo tanto, comparten características similares. Estas células se utilizan para el estudio de procesos celulares, el cribado de fármacos y la realización de pruebas
- Bien caracterizada: Esta línea celular de glioblastoma está bien caracterizada por sus características de crecimiento, morfología y expresión génica, lo que la convierte en una valiosa herramienta de investigación
Desventajas
- Aplicabilidad limitada: La U 87 MG es una línea celular de glioblastoma, por lo que sus aplicaciones se limitan principalmente al estudio de los glioblastomas y los mecanismos moleculares subyacentes. Puede no ser adecuada para investigar otros tipos de cáncer.
Aplicaciones de investigación con células U-87 MG
La línea celular de glioblastoma U87MG se utiliza ampliamente en estudios sobre el cáncer, especialmente en la investigación del glioblastoma. Algunas de las aplicaciones de investigación de las células U 87 MG son:
- Investigación de la biología del cáncer: La línea celular U87 se utiliza para estudiar el crecimiento y desarrollo del cáncer, los mecanismos moleculares subyacentes, las vías de señalización y el microambiente tumoral. Un estudio publicado en 2020 utilizó un modelo in vitro de glioblastoma, la línea celular U-87 MG, para investigar el gen BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) como diana terapéutica. Los hallazgos mostraron que el gen BMAL1 inhibe la proliferación, migración e invasión de células de glioblastoma mediante la supresión de la ciclina B1, la metaloproteinasa-9 y la expresión génica de fosfo-AKT [1]. Otra investigación llevada a cabo en 2019 utilizó la línea celular U87 e investigó que la expresión del factor de transcripción LITAF (factor de necrosis tumoral alfa inducido por lipopolisacáridos) regulado a la baja puede aumentar la radiosensibilidad de las células de glioma a través de la regulación al alza de la vía FOXO-1. El factor de transcripción LITAF también se conoce como patofactor de necrosis tumoral alfa. LITAF también se conoce como gen 7 inducido por p53 (PIG7) [2].
- Descubrimiento y desarrollo de fármacos: Las células U-87 MG pueden utilizarse para el cribado y ensayo de fármacos, lo que permite a los investigadores identificar nuevos fármacos potenciales contra el cáncer y evaluar su eficacia y toxicidad. En una investigación se utilizó la línea celular de glioblastoma U 87 MG para evaluar el potencial anticancerígeno y antioxidante del extracto de Inula helenium (L.) [3]. Del mismo modo, otra publicación mencionó el uso de la línea celular U87 para probar el efecto citotóxico y apoptótico de los extractos de plantas [4]. Además, una investigación publicada en 2018, estudió el efecto citotóxico de alcaloides sesquiterpénicos extraídos de plantas Nuphar en líneas celulares U 87 MG sensibles y resistentes a los fármacos [5].
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Línea celular U-87 MG: Publicaciones de investigación
Estas son algunas publicaciones de investigación destacadas sobre la línea celular U 87 MG.
Este artículo publicado en Neuroreport 2018 propuso que la hipoxia podría aumentar la migración y la invasión de las células de glioblastoma humano mediante la regulación de la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Este estudio se publica en Frontiers in Pharmacology en 2020. Los resultados de la investigación afirman que un flavonoide, Eriodictyol, ejerce efectos anticancerígenos sobre la línea celular U87 y suprime la proliferación celular y la metástasis. El compuesto actúa como mediador de sus propiedades antitumorales modulando la vía PI3K/Akt/NF-κB.
Esta investigación en Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) sugiere que una fórmula herbal china llamada píldora Xihuang puede inducir la apoptosis en células U87 dirigiéndose a la cascada Akt/mTOR/FOXO1 activada por ROS.
LITAF mejora la radiosensibilidad de las células de glioma humano a través de la vía FoxO1
Este trabajo de investigación se publicó en la revista Cellular and Molecular Neurobiology en 2019. El estudio propuso que un factor de transcripción, LITAF, regula a la baja y mejora la radiosensibilidad de las células de glioma mediante la regulación de la vía de señalización FOXO-1.
Este artículo se publicó en Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Los investigadores utilizaron células U 87 MG para investigar el efecto citotóxico de las nanopartículas de PLGA cargadas con curcumina.
Recursos para las células U-87 MG: Protocolos, vídeos y más
La línea celular de glioblastoma U87MG se utiliza en muchos laboratorios de investigación del cáncer. Algunos recursos sobre esta línea celular son:
- Transfección de la línea celular U87: Este documento le describirá un protocolo de transfección para células U 87 MG.
- Transfección de la línea celular U 87 MG: Este vídeo es un tutorial que explica paso a paso el protocolo de transfección de células U87.
El recurso para el protocolo de cultivo celular de células U87 se enumera a continuación:
- Células U87 MG: Este enlace contiene información básica sobre la línea celular U87 MG. Incluye breves protocolos de división, congelación y descongelación celular.
Perspectivas en la investigación del glioma U87 MG: Preguntas frecuentes
Referencias
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 Suppresses Proliferation, Migration, and Invasion of U87MG Cells by Downregulating Cyclin B1, Phospho-AKT, and Metalloproteinase-9. (BMAL1 suprime la proliferación, migración e invasión de las células U87MG mediante la regulación a la baja de la ciclina B1, la fosfo-AKT y la metaloproteinasa-9). Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF aumenta la radiosensibilidad de las células de glioma humano a través de la vía FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., actividades antioxidantes y anticancerígenas del extracto de Inula helenium (L.) en la línea celular de glioblastoma humano U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, y A. Ghasempour, Citotoxicidad e inducción de apoptosis en células de cáncer de mama, cáncer de piel y glioblastoma por extractos de plantas. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Citotoxicidad de alcaloides sesquiterpénicos de plantas Nuphar hacia líneas celulares sensibles y resistentes a fármacos. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.