Células THP-1 al descubierto: Investigación pionera en leucemia
La línea celular THP-1, conocida como Tohoku Hospital Pediatrics-1, es un cultivo espontáneo inmortalizado de células de leucemia monocítica humana. Sirve como modelo versátil en el estudio de la biología de los monocitos, las actividades de los macrófagos y sus funciones en el cáncer y la inmunoterapia. La línea celular THP1 de leucemia humana refleja las propiedades fisiológicas y funcionales de los monocitos de sangre periférica, lo que la convierte en un recurso inestimable para investigar los antígenos de diferenciación de los monocitos y los aspectos más amplios de su fisiología. Este artículo ofrece una visión general fundamental de la línea celular THP1.
Información general y origen de la línea celular THP-1
Para los que trabajan por primera vez con la línea celular THP-1, es esencial comprender sus características básicas. Discutiremos su definición, origen, morfología, tamaño y propiedades genómicas.
Línea celular THP-1: THP-1 es una línea celular de leucemia monocítica humana derivada de la sangre periférica de un paciente de 1 año diagnosticado de leucemia monocítica aguda (subtipo M5) en 1980.
Morfología: Las células THP-1 presentan una morfología celular redonda, grande y singular.
Tamaño celular: Estas células son relativamente grandes, con un diámetro medio superior a 21 µm.
Genoma y ploidía: THP-1 es una línea celular casi diploide, con un análisis del cariotipo que revela un número cromosómico diploide (n = 46).
Cultivo de la línea celular de leucemia humana THP-1
El conocimiento adecuado de las características de una línea celular simplifica su proceso de cultivo. Esta sección proporciona detalles cruciales para el cultivo y mantenimiento de la línea celular THP-1, incluyendo el tiempo de duplicación, los medios de cultivo, las propiedades de adherencia, la densidad de siembra, las condiciones de crecimiento, el almacenamiento y los procesos de congelación y descongelación.
Tiempo de duplicación: El tiempo de duplicación de las células THP-1 es de aproximadamente 35 horas, aunque puede variar de 19 a 50 horas dependiendo de las condiciones de cultivo.
Adherencia: Las células THP-1 crecen en suspensión pero pueden diferenciarse en células adherentes de tipo macrófago en determinadas condiciones.
Densidad de siembra: La densidad de siembra ideal oscila entre 1,0x10^5 y 1,5x10^6 células viables/mL. Esto se consigue diluyendo las células de un cultivo a la densidad deseada.
Medio de crecimiento: El medio recomendado es RPMI 1640 suplementado con un 10% de FBS, 1 mM de piruvato sódico y 2,5 mM de L-glutamina.
Condiciones de crecimiento: Las células deben cultivarse en una incubadora humidificada con un suministro del 5% de CO2 a 37°C.
Almacenamiento: Para su conservación a largo plazo, las células deben almacenarse por debajo de -150°C para mantener su viabilidad.
Proceso de congelación: Utilizar medios CM-1 o CM-ACF para un método de congelación lento, con una disminución de la temperatura de 1°C por minuto.
Proceso de descongelación: Agitar rápidamente durante 40-60 segundos en un baño de agua a 37°C que contenga un agente antimicrobiano y, a continuación, transferir a matraces con medios de crecimiento.
Nivel de bioseguridad: Las células THP-1 deben manipularse en laboratorios de bioseguridad de nivel 1.
Esta descripción simplificada y científicamente precisa proporciona información esencial sobre la línea celular THP-1, ayudando a los investigadores en su trabajo con esta valiosa herramienta de investigación.
Exploración de la biología de los macrófagos con la línea celular THP-1: Perspectivas de la diferenciación, la función y la dinámica inmunitaria
Las células THP-1 como modelo para la diferenciación de macrófagos y el análisis de funciones
En relación con las células THP-1, la diferenciación y las funciones de los macrófagos adquieren un significado único. Las células THP-1 son una línea de monocitos de leucemia humana utilizada habitualmente como modelo para estudiar la biología de monocitos y macrófagos in vitro. Tienen la capacidad de diferenciarse en células similares a los macrófagos cuando se tratan con forbol 12-miristato 13-acetato (PMA), imitando la transición que experimentan los monocitos periféricos para convertirse en macrófagos en el organismo. Tras la diferenciación, los macrófagos derivados de THP-1 pueden polarizarse en macrófagos M1 o M2 mediante estímulos específicos, reflejando los estados proinflamatorio asociado a M1 o antiinflamatorio y de reparación tisular asociado a M2.
Estos macrófagos THP-1 diferenciados conservan funciones clave como la fagocitosis, la presentación de antígenos y la producción de citocinas, lo que los convierte en un sistema in vitro inestimable para investigar los mecanismos moleculares y celulares que subyacen a las respuestas de los macrófagos a diversas señales. Los estudios realizados con células THP-1 han proporcionado información sobre las actividades de los macrófagos, incluidas las respuestas a agentes infecciosos, las interacciones con células cancerosas y el papel de los macrófagos en la inmunorregulación y la inflamación. Las células THP-1 también constituyen una potente herramienta para el cribado de posibles compuestos terapéuticos que puedan modular la actividad de los macrófagos y para explorar los aspectos inmunológicos de la participación de los macrófagos en la patogénesis y resolución de enfermedades.
Exploración de la polarización y las actividades de los macrófagos con THP-1
Las células THP-1 son fundamentales para el estudio de la polarización de los macrófagos humanos, un proceso crucial para comprender las respuestas inmunitarias en la salud y la enfermedad. Al diferenciar las células THP-1 en macrófagos M0, M1 y M2, los investigadores pueden examinar la activación clásica de los macrófagos (M1), asociada a respuestas proinflamatorias, y la polarización de los macrófagos M2, vinculada a procesos antiinflamatorios o curativos. Este modelo de polarización de macrófagos permite comprender mejor las funciones de despliegue de los macrófagos en diversos contextos, como el desarrollo tumoral y la respuesta de las células cancerosas a las terapias.
THP-1 en la investigación del cáncer: De la apoptosis a la quimiorresistencia
La línea celular THP-1 es clave en el estudio de la apoptosis de las células cancerosas y de los mecanismos que subyacen a la respuesta de las células tumorales a los tratamientos. Los ensayos que utilizan células THP-1, como los ensayos ADCP dirigidos a células cancerosas específicas, ayudan a dilucidar las interacciones entre macrófagos y células tumorales, incluidas las células HepG2. Además, investigar la actividad de las caspasas en células THP-1 contribuye a nuestra comprensión de la apoptosis, un proceso crítico en la progresión y el tratamiento del cáncer. El impacto de los agentes quimioterapéuticos, como el etopósido, en las células THP-1 permite comprender el papel de estas células en la quimiorresistencia, lo que subraya aún más su relevancia en la investigación del cáncer.
Células THP-1 e inmunoterapia: Objetivo y respuesta
En el ámbito de la inmunoterapia, las células THP-1 se utilizan para modelizar la interacción entre las células inmunitarias y el cáncer, investigando cómo pueden aprovecharse los macrófagos para atacar células cancerosas, como las células Raji. El estudio de la expresión de ARNm y proteínas en células THP-1 ayuda a comprender las intrincadas vías de señalización que intervienen en la respuesta inmunitaria y el potencial de intervención terapéutica. Esta investigación es fundamental para desarrollar estrategias que permitan manipular las actividades de los macrófagos con vistas a mejorar los resultados inmunoterapéuticos.
La línea celular THP-1, gracias a su capacidad para imitar a los monocitos periféricos y sufrir la polarización de los macrófagos, se ha convertido en una piedra angular en el estudio de la leucemia humana, la biología de los macrófagos y sus implicaciones en el cáncer y la inmunoterapia. Su versatilidad y relevancia en diversos ensayos lo convierten en una herramienta esencial para avanzar en nuestra comprensión del papel del sistema inmunitario en la salud y la enfermedad.
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Aplicaciones de investigación de las células THP-1
Antes de trabajar con cualquier línea celular, hay que examinar su aplicación en investigación y comprender cómo utilizar estas células en su estudio. Aquí hemos mencionado algunas aplicaciones de investigación destacadas de la línea celular THP-1.
La línea celular THP-1 se utiliza ampliamente en la investigación inmunológica porque puede diferenciarse en varias células inmunitarias. Estos son algunos ejemplos de estudios que han utilizado células THP-1:
- Un estudio de 2018 utilizó células THP-1 para derivar células de macrófagos e investigar vías inflamatorias y mecanismos relacionados. Los investigadores descubrieron que una proteína llamada proteína de unión a la apolipoproteína A-1 (AIBP) podría detener las vías inflamatorias al unirse a la apoA-1 y estabilizar el transportador de casetes de unión a ATP A1 (ABCA1) [3].
- Otro estudio utilizó células THP-1 para desarrollar células similares a los monocitos e investigar los efectos del neuroprotector ácido docosahexaenoico (DHA) en estas células en el contexto de la enfermedad de Alzheimer. El estudio exploró los posibles mecanismos subyacentes a la interacción de la proteína beta amiloide (Aβ) [4].
- En otro estudio se utilizaron macrófagos derivados de la línea celular THP-1 para investigar el potencial promotor de tumores de los exosomas secretados por células de adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) [5].
Publicaciones que destacan las células THP-1 en la investigación científica
Existen multitud de estudios sobre las células THP-1. Aquí se enumeran algunos ejemplos relevantes:
- La proteína de unióna la apolipoproteína A-1 inhibe las vías de señalización inflamatoria al unirse a la apolipoproteína A-1 en macrófagosTHP-1. Este estudio se publicó en la revista Circulation Journal en 2018. Esta investigación trató macrófagos derivados de la línea celular THP-1 con lipopolisacárido para inducir vías inflamatorias. El estudio propuso que la proteína de unión a la apolipoproteína A-1 previene las cascadas inflamatorias al unirse a la proteína apolipoproteína A-1.
- ElDHA atenúa la necroptosis inducida por Aβ a través de la vía de señalización RIPK1/RIPK3 en monocitos THP-1. Esta investigación propuso que el ácido docosahexaenoico (DHA) inhibe la necroptosis inducida por la proteína beta amiloide en monocitos derivados de THP-1 en el contexto de la enfermedad de Alzheimer
- Efectos promotores de tumores de los exosomas de células de cáncer de páncreas en macrófagos derivados de THP-1: En esta publicación, Linton y sus colegas observaron el efecto promotor del cáncer de los exosomas secretados por células de adenocarcinoma ductal pancreático sobre macrófagos originados en la línea celular THP-1.
- Los efectos de laclasificación de residuos en el microbioma ambiental, la viabilidad de las células THP-1 y las respuestas inflamatorias: En este estudio se utilizaron macrófagos derivados de la línea celular THP-1 y se estudió el efecto del microbioma presente en la industria de clasificación de residuos sobre la secreción de citocinas proinflamatorias por parte de estas células.
- Se estandarizaron protocolos para la diferenciación de células THP-1 a macrófagos con fenotipos M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) y M (IL-10) distintos: Este estudio describe protocolos para inducir la diferenciación en células THP-1 y desarrollar macrófagos con fenotipos particulares.
- Laproteoglicanasa proaterogénica ADAMTS-1 es regulada a la baja por el ácido láurico a través de las vías de señalización PI3K y JNK en macrófagos derivados de THP-1. Este trabajo se publicó en Molecular Biology Reports en 2019. Este estudio exploró el potencial terapéutico del ácido láurico en macrófagos derivados de THP-1. Los resultados mostraron que el ácido láurico estabiliza la placa de aterosclerosis e inhibe la trombosis modulando la expresión de ADAMS-1 (proteoglicanasa proaterogénica).
Recursos para la línea celular THP-1
Esta sección cubrirá todos los recursos en línea disponibles sobre las células THP-1. Esto le ayudará significativamente a aprender los protocolos de cultivo, diferenciación y transfección.
Protocolos de cultivo celular
Estos son algunos recursos que explican los protocolos de cultivo y manipulación de las células THP-1.
- Protocolo de cultivo y diferenciación: Este documento contiene información detallada y exhaustiva sobre los medios de cultivo celular, el subcultivo, la congelación y descongelación, y los protocolos de diferenciación de estas células.
- Subcultivo de célulasTHP-1: Este documento contiene un protocolo de subcultivo para células THP-1.
Protocolos de transfección
- Transfección de células THP-1: Este enlace trata sobre la transfección de células THP-1 con ADN plasmídico.
- Este documento describe un protocolo de transfección de células THP-1.
Vídeos relacionados con las células THP-1
THP-1 es una línea celular ampliamente cultivada. Existen muchos recursos de vídeo que explican la manipulación y el cultivo de esta línea celular:
- Cultivo de células THP-1: Este vídeo trata sobre el cultivo de la línea celular THP-1.
- Transfección de la línea celular THP-1: Este vídeo muestra un protocolo para la transfección altamente eficiente de células THP-1.
Esperamos que este artículo contenga información adecuada sobre el cultivo, la diferenciación, las ventajas y las aplicaciones de investigación de las células THP-1. Si tiene previsto utilizar este modelo celular in vitro de leucemia mieloide aguda en su investigación, considere la posibilidad de hacernos un pedido.
Preguntas frecuentes sobre la línea celular THP-1
Referencias
- Chanput, W., J.J. Mes, y H.J. Wichers, THP-1 cell line: an in vitro cell model for immune modulation approach. Inmunofarmacología internacional, 2014. 23(1): p. 37-45.
- Chanput, W., V. Peters, y H. Wichers, Células THP-1 y U937. El impacto de los bioactivos alimentarios en la salud: modelos in vitro y ex vivo, 2015: p. 147-159.
- Zhang, M., et al., La proteína de unión a la apolipoproteína A-1 inhibe las vías de señalización inflamatorias mediante la unión a la apolipoproteína A-1 en macrófagos THP-1. Circulation Journal, 2018. 82(5): p. 1396-1404.
- Yuan, S., et al., El DHA atenúa la necroptosis inducida por Aβ a través de la vía de señalización RIPK1/RIPK3 en monocitos THP-1. Biomedicina y Farmacoterapia, 2020. 126: p. 110102.
- Linton, S.S., et al., Efectos promotores de tumores de los exosomas de células de cáncer de páncreas en macrófagos derivados de THP-1. PLoS One, 2018. 13(11): p. e0206759.
