Células P19 - Investigación del carcinoma embrionario con células P19
P19 es una línea celular de carcinoma embrionario murino. Se utiliza ampliamente en la investigación biomédica, principalmente para estudiar la biología del desarrollo, la biología de las células madre, la diferenciación celular y el cribado de fármacos. Como las células P19 tienen capacidad de diferenciación, pueden ser útiles para investigar procesos biológicos complejos como la formación de tejidos y el desarrollo embrionario temprano. En este artículo trataremos los fundamentos de las células P19 derivadas de ratón.
Características generales y origen de las células P19
Conocer las características generales y el origen de una línea celular es esencial antes de empezar a trabajar con ella. En esta sección se tratará lo siguiente: ¿Qué es una línea celular P19? ¿Cuál es el tamaño de la célula P19? ¿Cuál es el origen de las células P19?
- P19 es un tipo de células de carcinoma embrionario pluripotente obtenido originalmente a partir de un teratocarcinoma desarrollado en un ratón C3H/He. La línea celular fue establecida por primera vez en 1982 por McBurney y Rogers.
- Las células P19 pueden crecer continuamente en un medio de cultivo suplementado con suero. Pueden diferenciarse en otros tipos celulares cuando se exponen a fármacos no tóxicos como el ácido retinoico y el dimetilsulfóxido (DMSO) [1].
- Estas células de carcinoma de ratón poseen una morfología de tipo epitelial.
- La línea celular P19 tiene un cariotipo masculino euploide (n=40; XY).
Información sobre el cultivo de células P19
La línea celular P19 se cultiva ampliamente en los laboratorios de investigación debido a sus características únicas. Su cultivo es fácil y manejable. En esta sección se ha mencionado toda la información clave que necesita para mantener y cultivar la línea celular P19. Sabremos: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células P19? ¿Cómo se cultiva la línea celular P19? ¿Es P19 una línea celular adherente?
Puntos clave para el cultivo de células P19
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de la línea celular P19 es de aproximadamente 2 a 3 días. |
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Adherente o en suspensión: |
La línea celular de carcinoma embrionario P19 es adherente. |
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Proporción de subcultivo: |
Las células P19 deben subcultivarse cada 48 horas, y debe mantenerse una proporción de división de 1:10 para estas células. Las células adherentes se lavan con tampón fosfato salino 1 X y se incuban con Accutase hasta que las células se disocian. Las células se añaden con medio de cultivo y se recogen por centrifugación. Las células recogidas se resuspenden cuidadosamente y se dispensan en nuevos matraces. |
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Medio de cultivo: |
Para el cultivo de células P19 se utiliza medio DMEM/Ham's F12 que contiene 5% de suero bovino fetal, 3,1 g/L de glucosa, 1,6 mM de L-glutamina, 1,0 mM de piruvato sódico, 15 mM de HEPES y 1,2 g/L de NaHCO3. |
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Condiciones de crecimiento: |
Para el crecimiento y cultivo de la línea celular de carcinoma embrionario P19 es esencial un incubador humidificado a 37°C con un suministro de CO2 del 5%. |
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Conservación: |
Los viales de células P19 congeladas deben almacenarse a una temperatura inferior a -150°C en un congelador o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para mantener la viabilidad de las células a largo plazo. |
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Proceso de congelación y medio: |
Los medios CM-1 o CM-ACF pueden utilizarse para congelar células P19 utilizando un método de congelación lenta que protege a las células de cualquier choque y preserva su viabilidad. |
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Proceso de descongelación: |
Las células P19 congeladas pueden descongelarse en un baño de agua a 37°C agitando rápidamente un vial durante 40 a 60 segundos. Las células se añaden con medio fresco y se centrifugan para eliminar los elementos del medio de congelación. La paleta celular se resuspende de nuevo y las células se vierten en el nuevo matraz para su crecimiento. |
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Nivel de bioseguridad: |
Para la línea celular P19 se requieren condiciones de laboratorio de nivel de bioseguridad 1. |
Línea celular P19: Ventajas y desventajas
En esta sección se analizarán las ventajas y desventajas de la línea celular P19.
Ventajas
- Potencial de diferenciación: Las células P19 pueden diferenciarse en varios tipos celulares, incluidos cardiomiocitos, neuronas y células microgliales. Requieren fármacos no tóxicos para la diferenciación, como el ácido retinoico y el dimetilsulfóxido (DMSO). El ácido retinoico induce el desarrollo de neuronas, microglía y astroglía, mientras que el DMSO inicia el desarrollo de cardiomiocitos latientes y células musculares lisas. Así pues, las células P19 son útiles para estudiar la diferenciación celular y los procesos de desarrollo
- Sistema modelo: La línea celular de carcinoma embrionario pluripotente P19 es un modelo valioso para estudiar el desarrollo embrionario temprano. Los investigadores utilizan las células P19 para dilucidar las vías de señalización celular y los mecanismos celulares y moleculares implicados en estos procesos
Desventajas
- Origen murino: P19 es una línea celular de carcinoma embrionario murino. Por consiguiente, es posible que los resultados de los estudios realizados con estas células no se trasladen totalmente a la biología y los procesos humanos
Aplicaciones de las células P19 en investigación
Las células P19 tienen varias aplicaciones en investigación debido a su capacidad de diferenciación y su relevancia para la biología del desarrollo y la investigación con células madre. Algunas de las aplicaciones de investigación más importantes de las células de carcinoma embrionario P19 son:
- Estudios de diferenciación celular: Como sabemos, las células P19 pueden diferenciarse en neuronas, microglía, células musculares lisas y cardiomiocitos, por lo que se utilizan ampliamente para estudiar los procesos de diferenciación celular. Además, ayuda a la investigación a investigar el desarrollo neuronal y cardíaco y los mecanismos subyacentes. Un estudio realizado en 2018 descubrió que las especies reactivas de oxígeno (ROS) dirigen la diferenciación de las células P19 hacia tipos celulares específicos e impiden la inducción de otros [3]. Otro estudio exploró el proceso de diferenciación neuronal mediado por ácido retinoico y descubrió la implicación de la vía de señalización PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Biología del desarrollo: Las células P19 son un modelo inestimable para estudiar el desarrollo embrionario temprano. Ayudan a los investigadores a comprender procesos biológicos complejos, como la formación de tejidos durante el desarrollo embrionario. La investigación utilizó células P19 y estudió los factores moleculares que contribuyen a la formación de la comunicación interventricular (CIV). Los resultados revelaron que un ARN no codificante largo, el SNHG6, contribuye a la CIV regulando negativamente el miARN-101 y activando la vía Wnt/β-catenina [5].
- Análisis de fármacos: La línea celular de carcinoma embrionario de ratón P19 también se utiliza para cribar posibles candidatos a fármacos. En un estudio se utilizaron neuronas de células P19 diferenciadas y se investigaron los efectos neuroprotectores inhibidores de la acetilcolinesterasa de la L-Dopa sintética y del extracto acuoso de semillas de Mucuna pruriens. Los resultados mostraron que el extracto de la planta presentaba resultados prometedores en comparación con la L-Dopa [6].
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Células P19: Publicaciones de investigación
Esta sección de artículos tratará algunas publicaciones de investigación interesantes sobre las células P19.
Este artículo se publicó en Oncology Reports en 2017. El estudio propuso que las hormonas sexuales hipofisarias impulsan la adhesión, proliferación y migración de las líneas celulares de teratocarcinoma, incluidas las células P19.
Esta publicación en la revista Experimental & Molecular Medicine (2018) utilizó células P19 y estudió la función del ARN no codificante largo uc.4. Los hallazgos revelaron que uc.4 afecta a la diferenciación celular a través de la modulación de la vía de señalización TGF beta.
Este artículo de investigación se publicó en 2018 en la revista Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. El estudio descubrió que el extracto de tejido cerebral natural y el cultivo celular en 3D pueden acelerar la diferenciación de las células de carcinoma embrionario P19 en células neurales.
Este estudio se publicó en la revista Journal of Ethnopharmacology en 2020. El estudio propuso que el extracto de hoja de Cichorium intybus L. puede inducir la diferenciación de células de carcinoma embrionario P19 en células β pancreáticas productoras de insulina.
Esta investigación se publicó en Molecules (2022). Este estudio exploró los efectos neuroprotectores e inhibidores de la acetilcolinesterasa del extracto de semillas de Mucuna pruriens en neuronas de células P19.
Recursos para la línea celular P19: Protocolos, vídeos y más
Los siguientes son algunos recursos sobre las células P19.
- Protocolo de diferenciación neuronal de células P19: Este artículo contiene el protocolo de diferenciación neuronal de células P19 y otra información útil sobre la diferenciación de células P19.
- Transfección de células P19: Este enlace te ayudará a aprender el protocolo de transfección de células P19.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células p19.
- Células P19: Este sitio web contiene toda la información útil sobre la línea celular P19, incluidas sus condiciones de cultivo, los medios de cultivo de células P19, la división celular y mucho más.
Exploración de la línea celular P19: Preguntas frecuentes
Referencias
- McBurney, M.W., Células de carcinoma embrionario P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al., Línea celular de carcinoma embrionario P19: Un modelo para estudiar las interacciones gen-ambiente. Cell Culture Techniques, 2011: p. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey, y G. Rödel, Las ROS mitocondriales dirigen la diferenciación de las células pluripotentes murinas P19. Investigación de células madre, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F., et al., El ácido todo-trans-retinoide induce la diferenciación de las células P19 en neuronas implicadas en la vía de señalización PI3K/Akt/GSK3β. Revista de Bioquímica Celular, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., Long noncoding RNA SNHG6 contributes to ventricular septal defect formation via negative regulation of miR-101 and activation of Wnt/β-catenin pathway. Die Pharmazie-An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., Mucuna pruriens seed aqueous extract improved neuroprotective and acetylcholinesterase inhibitory effects compared with synthetic L-dopa. Molecules, 2022. 27(10): p. 3131.