Células NCI-H1299: Investigación e implicaciones clínicas de las células de cáncer de pulmón NCI-H1299
NCI-H1299 es una línea celular humana inmortalizada de cáncer de pulmón de células no pequeñas ampliamente utilizada en la investigación de oncología inmunológica, cáncer y descubrimiento de fármacos. Además, los investigadores utilizan estas células para estudiar la sensibilidad a los fármacos, las vías de señalización subyacentes y los mecanismos moleculares relacionados con el cáncer de pulmón. Además, estas células se emplean para estudiar infecciones víricas como el SARS-CoV-2.
Características generales y origen de las células NCI-H1299
Lo primero que hay que saber sobre una línea celular es su origen y sus características generales, ya que te ayudarán a idear su uso en tu investigación. Esta sección del artículo le ayudará a conocer algunos datos importantes sobre el origen y las características de NCI-H1299. Por ejemplo, ¿qué son las células de cáncer de pulmón NCI-H1299? ¿Qué tipo de célula es el NCI-H1299? ¿Cuál es el tamaño de las células NCI-H1299? ¿Cuál es la diferencia entre A549 y NCI-H1299?
- La línea celular NCI-H1299 se originó a partir de una metástasis en un ganglio linfático del pulmón de un paciente varón caucásico de 43 años con cáncer.
- Estas células poseen una deleción parcial homocigótica del gen p53; por lo tanto, no expresan la proteína p53. La falta de expresión de la proteína p53 NCI-H1299 contribuye a la tendencia proliferativa de las células de cáncer de pulmón H1299.
- Además de p53, estas células inmortalizadas presentan la mutación NCI-H1299 KRAS, responsable de sus propiedades de crecimiento, proliferación, migración e invasión.
- El cariotipo NCI-H1299 es casi diploide.
- Las células NCI-H1299 tienen una morfología similar a la de las células epiteliales.
- Estas células son aplanadas y tienen un grosor inferior a 5 µm.
NCI-H1299 y A549
NCI-H1299 y A549 son líneas celulares de cáncer de pulmón no microcítico. Las células NCI-H1299 son más agresivas y sensibles que las A549. Ambas presentan mutaciones relativamente similares, como KRAS. Sin embargo, a diferencia de las células NCI-H1299, las células A549 expresan el gen P53.
Información sobre el cultivo
Mantener el cultivo de una línea celular no es fácil hasta que no se conoce toda la información clave sobre ella, incluyendo: ¿Cuál es el tiempo de duplicación del NCI-H1299? ¿Cuál es la densidad de siembra del NCI-H1299? ¿Qué es el medio celular NCI-H1299? ¿Cómo se cultivan las líneas celulares NCI-H1299? Esta sección le ayudará a conocer las respuestas a todas estas preguntas sobre el cultivo de células NCI-H1299.
Puntos clave para el cultivo de células NCI-H1299
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de las células NCI-H1299 oscila entre 22 y 30 horas. |
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Adherentes o en suspensión: |
NCI-H1299 es una línea celular adherente. |
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Ratio de Subcultivo: |
Las células NCI-H1299 se subcultivan en una proporción recomendada de 1:3 a 1:6. Para la siembra, las células adherentes se lavan con 1x PBS y se incuban con la solución de pasaje Accutase durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. Las células desprendidas se añaden con medio de cultivo fresco y se centrifugan. A continuación, se resuspende el sedimento celular y se vierten las células en nuevos matraces con medio de cultivo. |
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Medio de cultivo: |
RPM1 1640 es un medio ideal para células NCI-H1299. Se complementa con un 10% de suero bovino fetal, 4500 mg/L de glucosa, 2,0 mM de L-glutamina, 1 mM de piruvato sódico, 1500 mg/L de NaHCO3 y 10 mM de HEPES. Los medios deben renovarse cada 2 o 3 veces por semana. |
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Condiciones de crecimiento: |
Los cultivos de células de cáncer de pulmón NCI-H1299 se mantienen en una incubadora humidificada a 37°C con un suministro del 5% de CO2. |
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Conservación: |
La línea celular NCI-H1299 puede almacenarse a largo plazo en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en congeladores de temperatura ultrabaja a menos de -150°C. |
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Proceso y medio de congelación: |
CM-1 o CM-ACF son los medios de congelación de las células NCI-H1299. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lento que sólo permite una disminución de 1 grado de la temperatura por minuto para proteger la viabilidad celular. |
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Proceso de descongelación: |
Las células NCI-H1299 congeladas se agitan rápidamente en un baño de agua precalentado a 37 grados Celsius durante 40 a 60 segundos hasta que queda un pequeño trozo de hielo. Las células descongeladas se añaden con medio fresco y pueden cultivarse directamente en nuevos matraces o centrifugarse. En el primer caso, los medios deben sustituirse tras 24 horas de incubación. La centrifugación ayuda a eliminar los elementos congelados del medio. Después, las células cosechadas se resuspenden en medio fresco y se dispensan en el nuevo matraz para su cultivo. |
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Nivel de bioseguridad: |
Se requiere un laboratorio de bioseguridad de nivel 1 para manejar el cultivo de células NCI-H1299. |
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Ventajas e inconvenientes de las células NCI-H1299
Al igual que otras líneas celulares de cáncer humano, NCI-H1299 también posee algunas características distinguibles asociadas a ventajas e inconvenientes específicos. A continuación resumimos algunas de las más significativas.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular de cáncer de pulmón de células no pequeñas NCI-H1299 son:
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Modelo in vitro decáncer de pulmón
Las líneas celulares NCI-H1299 se han desarrollado a partir de metástasis en ganglios linfáticos de carcinoma de pulmón, por lo que poseen propiedades relativamente similares. Por lo tanto, estas células pueden servir como modelo in vitro para investigar la biología del cáncer de pulmón, los mecanismos celulares y moleculares y cribar y probar posibles terapias.
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Fáciles de cultivar
Las células NCI-H1299 son fáciles de cultivar y mantener en un laboratorio de investigación. No existen requisitos ni procedimientos complicados para el cultivo celular.
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NCI-H1299 P53 y NCI-H1299 con mutación KRAS
Las células NCI-H1299 carecen de la expresión del gen p53, que permite a las células proliferar vigorosamente. Además, poseen la mutación KRAS, que contribuye al crecimiento, la proliferación, la invasión y la migración de las células. Teniendo esto en cuenta, los investigadores utilizan las células H1299 para investigar los mecanismos moleculares relacionados con las mutaciones KRAS y P53.
Desventajas
Las desventajas de las células NCI-H1299 son:
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Especificidad tisular
Las células NCI-H1299 proceden de tejido pulmonar. Por lo tanto, su aplicabilidad se limita principalmente a la investigación del carcinoma de pulmón. Es posible que no represente plenamente la heterogeneidad y las características generales de otros tipos de cáncer.
Aplicaciones de investigación de las células NCI-H1299
La línea celular NCI-H1299 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de pulmón. A continuación se mencionan algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular.
- Biología del cáncer: Las células NCI-H1299 sirven como una gran herramienta de investigación para estudiar el desarrollo y la progresión del cáncer, así como los mecanismos celulares y moleculares relacionados. Estas células equipan ciertas mutaciones, lo que permite a los investigadores explorar comportamientos relacionados con las células cancerosas, vías de señalización y perfiles de expresión génica. Varios estudios han utilizado la línea celular de carcinoma pulmonar de células no pequeñas NCI-H1299 para estudiar la biología del cáncer de pulmón. Por ejemplo, un estudio realizado en 2018 investigó la vía de señalización implicada en la apoptosis de células de cáncer de pulmón utilizando células NCI-H1299. Los investigadores descubrieron que la vía PI3K/AKT contribuye a la proliferación celular, y su inhibición puede causar la muerte de las células cancerosas [1]. Asimismo, otro estudio investigó los mecanismos implicados en la transición epitelio-mesénquima (EMT) de las células NCI-H1299. Este estudio propuso que una proteína extracelular SPARC (proteína secretada ácida y rica en cisteína) contribuye a la EMT y la migración de NCI-H1299, por lo que promueve la tumorigénesis en las células: la proteína SPARC actúa como mediadora de la señalización de TGF-β1 [2].
- Descubrimiento y cribado de fármacos: NCI-H1299, una línea celular de cáncer de pulmón humano, se emplea ampliamente para evaluar la toxicidad y eficacia de fármacos potenciales. Además, los investigadores la utilizan para estudiar el mecanismo de acción de los fármacos antitumorales. Los estudios también han utilizado estas células para identificar posibles dianas farmacológicas y mecanismos de resistencia. Por ejemplo, Xiao-Yun Shen y sus colegas investigaron el potencial anticancerígeno del compuesto natural bruceína D (BD). Los resultados revelaron que la BD impide significativamente la proliferación, invasión y migración de las células NCI-H1299. Por lo tanto, puede considerarse una terapia adyuvante potencial para tratar el carcinoma pulmonar de células no pequeñas [3]. Del mismo modo, un estudio evaluó los efectos citotóxicos del xantohumol solo y en combinación con el fármaco quimioterapéutico cisplatino en células de cáncer de pulmón NCI-H1299 [4].
Publicaciones de investigación con células NCI-H1299
Aquí encontrará algunas de las publicaciones de investigación más importantes y citadas sobre la línea celular de carcinoma de pulmón NCI-H1299.
Este artículo se publicó en la revista Human and Experimental Toxicology (2021). El estudio propone que el indol-3-carbinol induce la apoptosis en células H1299 a través de la elevación de los niveles de especies reactivas del oxígeno (ROS).
Esta investigación se publicó en 2018 en la revista Cellular Physiology and Biochemistry. Los resultados de la investigación revelaron que la combinación de ácido cafeico y paclitaxel ejerce un efecto anticancerígeno sinérgico en la línea celular de cáncer de pulmón de células no pequeñas, NCI-H1299.
Este artículo de investigación se publicó en Molecular Medicine Reports (2018). El estudio evaluó el efecto antitumoral de tubeimoside-1, una saponina triterpenoide, y los mecanismos subyacentes en la línea celular NCI-H1299.
Este artículo publicado en el Journal of Cancer (2020) propone que la Pristimerina, un compuesto natural, suprime la proliferación y migración de las células NCI-H1299.
Mecanismo de regulación del gen VIPR1 en células de adenocarcinoma de pulmón humano H1299
Este estudio en Medical Oncology (2019) exploró los efectos potenciales de la sobreexpresión del gen VIPR1 en la línea celular de adenocarcinoma NCI-H1299.
Recursos para la línea celular NCI-H1299: Protocolos, vídeos y más
He aquí algunos recursos en línea sobre las células NCI-H1299.
- Transfección NCI-H1299: Este vídeo explica el protocolo de transfección transitoria para la línea celular NCI-H1299.
- Subcultivo de una línea celular adherente: Este vídeo le ayudará a aprender un procedimiento general de subcultivo para una línea celular adherente.
El siguiente enlace contiene información sobre el cultivo de células NCI-H1299.
- Línea celular NCI-H1299: Este enlace puede ayudarle a conocer el protocolo de pasaje y transfección de células NCI-H1299.
Preguntas frecuentes sobre la línea celular NCI-H1299
Referencias
- Gu, J., et al., Estudio de la apoptosis inducida por EGCG en células de cáncer de pulmón mediante la inhibición de la vía de señalización PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC actúa como mediador de TGF-β1 en la promoción de la transición epitelial a mesenquimal en células de cáncer de pulmón A549 y H1299. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Un estudio sobre el mecanismo de bruceína D en el tratamiento de células de cáncer de pulmón de células no pequeñas H1299. Revista Mundial de Medicina Tradicional China, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Cytotoxic Effects of Xanthohumol and Its Combination with Cisplatin on Human Metastatic Lung Cancer H1299 Cells. Revista de avances en medicina e investigación médica, 2019. 30(9): p. 1-15.