Células NCI-H1299: Investigación e implicaciones clínicas de las células de cáncer de pulmón NCI-H1299
La NCI-H1299 es una línea celular inmortalizada de cáncer de pulmón de células no pequeñas de origen humano, ampliamente utilizada en la investigación sobre inmuno-oncología, el cáncer y el descubrimiento de fármacos. Además, los investigadores han utilizado estas células para estudiar la sensibilidad a los fármacos, las vías de señalización subyacentes y los mecanismos moleculares relacionados con el cáncer de pulmón. Asimismo, estas células se emplean para estudiar infecciones virales como la del SARS-CoV-2.
- Medio de cultivo
- El RPM1 1640 es un medio ideal para las células NCI-H1299. Se complementa con un 10 % de suero fetal bovino, 4500 mg/L de glucosa, 2,0 mM de L-glutamina, 1 mM de piruvato de sodio, 1500 mg/L de NaHCO₃ y 10 mM de HEPES. El medio debe renovarse entre 2 y 3 veces por semana.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de las células NCI-H1299 oscila entre 22 y 30 horas.
- Tipo de crecimiento
- La NCI-H1299 es una línea celular adherente.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir NCI-H1299
- Características generales y origen de las células NCI-H1299
- Información sobre el cultivo
- Compra de la línea celular NCI-H1299: herramientas de investigación de alta calidad para estudiar la biología del cáncer de pulmón
- Ventajas y desventajas de las células NCI-H1299
- Aplicaciones de investigación de las células NCI-H1299
- Publicaciones de investigación en las que aparecen las células NCI-H1299
- Recursos para la línea celular NCI-H1299: protocolos, vídeos y más
- Preguntas frecuentes sobre la línea celular NCI-H1299
- Referencias
- Preguntas frecuentes
Características generales y origen de las células NCI-H1299
Lo primero que hay que saber sobre una línea celular es su origen y sus características generales, ya que esto le ayudará a planificar su uso en su investigación. Esta sección del artículo le ayudará a conocer información importante sobre el origen y las características de la línea NCI-H1299. Por ejemplo: ¿qué son las células de cáncer de pulmón NCI-H1299? ¿Qué tipo de célula es la NCI-H1299? ¿Cuál es el tamaño de las células NCI-H1299? ¿Cuál es la diferencia entre la A549 y la NCI-H1299?
- La línea celular NCI-H1299 se originó a partir de una metástasis en un ganglio linfático del pulmón de un paciente varón caucásico de 43 años con cáncer.
- Estas células presentan una deleción parcial homocigótica del gen p53; por lo tanto, no expresan la proteína p53. La ausencia de expresión de la proteína p53 en las células NCI-H1299 contribuye a la tendencia proliferativa de las células de cáncer de pulmón H1299.
- Además del p53, se ha descrito que estas células inmortalizadas presentan una mutación en el gen KRAS de la línea NCI-H1299, responsable de sus propiedades de crecimiento, proliferación, migración e invasión.
- El cariotipo de las células NCI-H1299 es casi diploide.
- Las células NCI-H1299 presentan una morfología similar a la de las células epiteliales.
- Estas células son aplanadas y tienen un grosor inferior a 5 µm.
NCI-H1299 y A549
NCI-H1299 y A549 son líneas celulares de cáncer de pulmón no microcítico. Las células NCI-H1299 son más agresivas y sensibles en comparación con las A549. Ambas presentan mutaciones relativamente similares, como la del gen KRAS. Sin embargo, a diferencia de las células NCI-H1299, las células A549 expresan el gen p53.
Información sobre el cultivo
Mantener un cultivo de una línea celular no es fácil hasta que se conoce toda la información clave sobre ella, incluyendo: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de la NCI-H1299? ¿Cuál es la densidad de siembra de la NCI-H1299? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células NCI-H1299? ¿Cómo se cultivan las líneas celulares NCI-H1299? Esta sección te ayudará a conocer las respuestas a todas estas preguntas sobre el cultivo de células NCI-H1299.
Puntos clave para el cultivo de células NCI-H1299
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de las células NCI-H1299 oscila entre 22 y 30 horas.
Adherentes o en suspensión:
La NCI-H1299 es una línea celular adherente.
Proporción de subcultivo:
Las células NCI-H1299 se subcultivan en una proporción recomendada de 1:3 a 1:6. Para la siembra, las células adherentes se lavan con PBS 1x y se incuban con solución de pasaje Accutase durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. A las células desprendidas se les añade medio de cultivo fresco y se centrifugan. A continuación, se resuspende el sedimento celular y las células se vierten en nuevos frascos que contienen medio de crecimiento.
Medio de crecimiento:
El RPM1 1640 es un medio ideal para las células NCI-H1299. Se complementa con un 10 % de suero fetal bovino, 4500 mg/L de glucosa, 2,0 mM de L-glutamina, 1 mM de piruvato de sodio, 1500 mg/L de NaHCO₃ y 10 mM de HEPES. El medio debe renovarse entre 2 y 3 veces por semana.
Condiciones de cultivo:
Los cultivos de células de cáncer de pulmón NCI-H1299 se mantienen en una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro de CO₂ al 5 %.
Almacenamiento:
La línea celular NCI-H1299 puede almacenarse a largo plazo en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en congeladores de temperatura ultrabaja a una temperatura inferior a -150 °C.
Proceso de congelación y medio:
CM-1 o CM-ACF son los medios de congelación de las células NCI-H1299. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lenta que permite solo una disminución de 1 grado de temperatura por minuto para proteger la viabilidad celular.
Proceso de descongelación:
Las células NCI-H1299 congeladas se agitan rápidamente en un baño de agua precalentado a 37 grados Celsius durante 40 a 60 segundos, hasta que quede un pequeño trozo de hielo. A las células descongeladas se les añade medio fresco y pueden cultivarse directamente en nuevos frascos o centrifugarse. En el primer caso, el medio debe sustituirse tras 24 horas de incubación. La centrifugación ayuda a eliminar los componentes del medio de congelación. Posteriormente, las células recogidas se resuspenden en medio fresco y se transfieren al nuevo frasco para su cultivo.
Nivel de bioseguridad:
Se requiere un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manipular el cultivo celular NCI-H1299.
Adquiere la línea celular NCI-H1299: herramientas de investigación de alta calidad para el estudio de la biología del cáncer de pulmón
Ventajas y desventajas de las células NCI-H1299
Al igual que otras líneas celulares cancerosas humanas, la NCI-H1299 también presenta algunas características distintivas asociadas a ventajas e inconvenientes específicos. A continuación, resumimos algunas de las más significativas.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular de cáncer de pulmón no microcítico NCI-H1299 son:
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Modelo in vitro de cáncer de pulmón
Las líneas celulares NCI-H1299 se han desarrollado a partir de metástasis en los ganglios linfáticos de un carcinoma de pulmón y, por lo tanto, presentan propiedades relativamente similares. Por ello, estas células pueden servir como modelo in vitro para investigar la biología del cáncer de pulmón, los mecanismos celulares y moleculares, así como para seleccionar y probar posibles tratamientos.
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Fácil de cultivar
Las células NCI-H1299 son fáciles de cultivar y mantener en un laboratorio de investigación. No existen requisitos ni procedimientos de cultivo celular complicados.
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Mutaciones P53 y KRAS en las células NCI-H1299
Las células NCI-H1299 carecen de expresión del gen p53, lo que les permite proliferar vigorosamente. Además, presentan una mutación en el gen KRAS que contribuye al crecimiento, la proliferación, la invasión y la migración celular. Teniendo esto en cuenta, los investigadores utilizan las células H1299 para investigar los mecanismos moleculares relacionados con las mutaciones de KRAS y p53.
Desventajas
Las desventajas de las células NCI-H1299 son:
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Especificidad tisular
Las células NCI-H1299 proceden de tejido pulmonar. Por lo tanto, su aplicabilidad se limita principalmente a la investigación del carcinoma de pulmón. Es posible que no representen plenamente la heterogeneidad y las características generales de otros tipos de cáncer.
Aplicaciones de investigación de las células NCI-H1299
La línea celular NCI-H1299 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de pulmón. A continuación se mencionan algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular.
- Biología del cáncer: Las células NCI-H1299 constituyen una excelente herramienta de investigación para estudiar el desarrollo y la progresión del cáncer, así como los mecanismos celulares y moleculares relacionados. Estas células presentan determinadas mutaciones, lo que permite a los investigadores explorar los comportamientos de las células cancerosas, las vías de señalización y los perfiles de expresión génica asociados. Varios estudios han utilizado la línea celular NCI-H1299 de carcinoma pulmonar de células no pequeñas para estudiar la biología del cáncer de pulmón. Por ejemplo, un estudio realizado en 2018 investigó la vía de señalización implicada en la apoptosis de las células cancerosas pulmonares utilizando células NCI-H1299. Los investigadores descubrieron que la vía PI3K/AKT contribuye a la proliferación celular y que su inhibición puede provocar la muerte de las células cancerosas [1]. Del mismo modo, otra investigación analizó los mecanismos implicados en la transición epitelial a mesenquimal (EMT) de la línea NCI-H1299. Este estudio propuso que una proteína extracelular, la SPARC (proteína secretada ácida y rica en cisteína), contribuye a la EMT y a la migración de las células NCI-H1299, promoviendo así la tumorigénesis en las células; la proteína SPARC actúa como mediadora de la señalización del TGF-β1 [2].
- Descubrimiento y cribado de fármacos: la línea celular NCI-H1299, derivada del cáncer de pulmón humano, se utiliza ampliamente para evaluar la toxicidad y la eficacia de posibles fármacos. Además, los investigadores la emplean para investigar el mecanismo de acción de los fármacos antitumorales. También se han realizado estudios con estas células para identificar posibles dianas farmacológicas y mecanismos de resistencia. Por ejemplo, una investigación llevada a cabo por Xiao-Yun Shen y sus colegas analizó el potencial anticancerígeno del compuesto natural bruceína D (BD). Los resultados revelaron que la BD inhibe significativamente la proliferación, la invasión y la migración de las células NCI-H1299. Por lo tanto, puede considerarse una posible terapia adyuvante para el tratamiento del carcinoma pulmonar de células no pequeñas [3]. De manera similar, un estudio evaluó los efectos citotóxicos del xantohumol, tanto en monoterapia como en combinación con el fármaco quimioterapéutico cisplatino, sobre las células de cáncer de pulmón NCI-H1299 [4].
Publicaciones de investigación sobre la línea celular NCI-H1299
A continuación se recogen algunas de las publicaciones de investigación más relevantes y citadas sobre la línea celular de carcinoma de pulmón NCI-H1299.
Este artículo se publicó en la revista *Human and Experimental Toxicology* (2021). El estudio propuso que el indol-3-carbinol induce la apoptosis en las células H1299 mediante el aumento de los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS).
Esta investigación se publicó en 2018 en la revista *Cellular Physiology and Biochemistry*. Los resultados de la investigación revelaron que la combinación de ácido cafeico y paclitaxel ejerce un efecto anticancerígeno sinérgico en la línea celular de cáncer de pulmón no microcítico NCI-H1299.
Este artículo de investigación se publicó en *Molecular Medicine Reports* (2018). El estudio evaluó el efecto antitumoral de la tubeimosida-1, una saponina triterpenoide, y los mecanismos subyacentes en la línea celular NCI-H1299.
Este artículo, publicado en la revista *Journal of Cancer* (2020), propuso que la pristimerina, un compuesto natural, inhibe la proliferación y la migración de las células NCI-H1299.
Mecanismo de regulación del gen VIPR1 en las células del adenocarcinoma de pulmón humano H1299
Este estudio, publicado en Medical Oncology (2019), exploró los posibles efectos de la sobreexpresión del gen VIPR1 en la línea celular de adenocarcinoma NCI-H1299.
Recursos sobre la línea celular NCI-H1299: protocolos, vídeos y más
A continuación se presentan algunos recursos en línea sobre las células NCI-H1299.
- Transfección de NCI-H1299: este vídeo explica el protocolo de transfección transitoria para la línea celular NCI-H1299.
- Subcultivo de una línea celular adherente: este vídeo le ayudará a aprender un procedimiento general de subcultivo para una línea celular adherente.
El siguiente enlace contiene información sobre el cultivo celular de las células NCI-H1299.
- Línea celular NCI-H1299: este enlace le ayudará a conocer el protocolo de pases y transfección de las células NCI-H1299.
Preguntas frecuentes sobre la línea celular NCI-H1299
Referencias
- Gu, J., et al., Estudio de la apoptosis inducida por el EGCG en células de cáncer de pulmón mediante la inhibición de la vía de señalización PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., «SPARC actúa como mediador del TGF-β1 en la promoción de la transición epitelial a mesenquimal en células de cáncer de pulmón A549 y H1299». Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Estudio sobre el mecanismo de acción de la bruceína D en el tratamiento de las células H1299 de cáncer de pulmón no microcítico. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., «Efectos citotóxicos del xantohumol y su combinación con cisplatino en células H1299 de cáncer de pulmón metastásico humano». Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.