Células Hep3B: Investigación y descubrimiento del carcinoma hepatocelular
HEP3B es una línea celular inmortalizada de carcinoma de hepatocitos de origen humano. Se utiliza ampliamente en la investigación de la hepatotoxicidad y el metabolismo de fármacos. La eficiencia de transfección de HEP3B es sustancial; por lo tanto, estas células se emplean comúnmente para estudiar el desarrollo del cáncer de hígado, la progresión y las intervenciones terapéuticas. Este artículo cubre toda la información necesaria sobre la línea celular HEP3B para ayudarle a trabajar con ella. Principalmente, incluirá:
- Características generales y origen de las células HEP3B
- Información sobre el cultivo de la línea celular HEP3B
- Línea celular HEP3B: Ventajas y limitaciones
- Aplicaciones de las células HEP3B en investigación
- Publicaciones sobre la línea celular HEP3B
- Recursos para la línea celular HEP3B: Protocolos, vídeos y más
1.características generales y origen de las células HEP3B
La principal información que necesita sobre una línea celular es su origen y sus características generales. Puede ayudarte a decidir su uso en tu investigación y a manejarla. Esta sección del artículo cubre toda la información esencial sobre el origen y las características de HEP3B. Aquí aprenderás: ¿Qué es la línea celular Hep 3B? ¿Cuál es el origen de las células Hep3B? ¿Cuál es la morfología de las células HEP3B?
- HEP3B, una línea celular continua de hepatoma humano, se originó a partir del tejido hepático de un niño africano de 8 años con carcinoma hepatocelular (CHC). Fue creada por Aden y sus colegas en 1979 en el laboratorio de Barbara B. Knowles, Instituto Wistar, Filadelfia, EE.UU. [1].
- Las células HEP3B presentan una integración del genoma del virus de la hepatitis B (VHB) en su cromosoma.
- Estas células de carcinoma de hepatocitos presentan una morfología epitelial.
- Las células HEP3B tienen un número cromosómico modal de 60. A diferencia del HepG2, no poseen un cromosoma 1 reordenado.
¿Cuál es la diferencia entre HepG2 y Hep3B?
HepG2 y HEP3B difieren en el número de cromosomas por célula. HEP3B contiene 60 cromosomas, mientras que las células HepG2 tienen una media de 55 cromosomas. Además, la HepG2 es no tumorigénica y negativa a la hepatitis B, mientras que la HEP3B es tumorigénica y positiva al VHB.
2.información sobre el cultivo de la línea celular HEP3B
Conocer la información sobre el cultivo de una línea celular puede facilitarle las cosas. Esta sección cubre todos los puntos clave para el cultivo de la línea celular VHB HEP3B, incluyendo: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células Hep3B? ¿Cuáles son las condiciones de cultivo de HEP3B? ¿Cómo se cultivan las células HCC HEP3B?
Puntos clave para el cultivo de células HEP3B
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de las células HEP3B es de aproximadamente 36 horas. |
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Adherentes o en suspensión: |
Esta línea celular de hepatoma es adherente. |
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Proporción de división: |
Las células HEP3B se subcultivan en una proporción de 1:2 a 1:4. Las células HEP3B adherentes se enjuagan con 1 x PBS y luego se incuban con la solución de disociación Accutase. Después de 8 a 10 minutos, se añade medio fresco y se centrifugan las células. A continuación, las células recolectadas se resuspenden cuidadosamente y se vierten en matraces que contienen medio de cultivo en una proporción de división recomendada. |
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Medio de cultivo: |
Para el cultivo de células HEP3B se utiliza un medio EMEM que contiene un 10% de FBS, 2,2 g/L de NaHCO3, 2 mM de L-Glutamina y solución salina equilibrada de Earle (EBSS). |
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Condiciones de crecimiento: |
Las células HEP3B se cultivan en una incubadora humidificada a 37°C con un suministro continuo de CO2 al 5%. |
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Almacenamiento: |
Las células HEP3B congeladas se almacenan a una temperatura inferior a -150°C en un congelador eléctrico o en la fase de vapor de nitrógeno líquido. |
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Proceso y medio de congelación: |
El medio de congelación recomendado para las células HEP3B es CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan utilizando un proceso de congelación lento que sólo permite una disminución de la temperatura de 1°C por minuto para proteger la viabilidad celular. |
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Proceso de descongelación: |
Las células congeladas se descongelan en un baño de agua preajustado a 37°C durante 40 a 60 segundos. Posteriormente, estas células se añaden al medio de crecimiento fresco y se centrifugan para eliminar los elementos del medio de congelación. Las células recogidas se resuspenden y se dispensan en nuevos matraces para su crecimiento. |
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Nivel de bioseguridad: |
Para el cultivo de células HEP3B se requiere un laboratorio de bioseguridad de nivel 1. |
3.línea celular HEP3B: Ventajas y limitaciones
HEP3B es una línea celular de carcinoma hepatocelular ampliamente utilizada. Esta sección se centrará en algunas ventajas y limitaciones clave de estas células de hepatoma.
Ventajas
Las principales ventajas de las células HEP3B son:
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Facilidad de cultivo |
Las células HEP3B no tienen requisitos complicados de cultivo celular, por lo que son fáciles de manipular y mantener en un laboratorio de investigación. Esto simplifica los procedimientos experimentales. |
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Alta eficacia de transfección |
Las células HEP3B presentan una notable eficiencia de transfección, lo que las hace ampliamente utilizadas en la manipulación genética y en estudios relacionados con la expresión génica. |
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Tumorigenicidad |
HEP3B es una línea celular de carcinoma hepatocelular tumorigénica capaz de formar tumores cuando se inyecta en un ratón inmunodeprimido. Esto ayuda a estudiar la progresión y el desarrollo del cáncer utilizando modelos de xenoinjerto HEP3B. |
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Estado P53 de HEP3B |
Las células HEP3B poseen una mutación del gen P53 similar a la del carcinoma hepatocelular (CHC) y otros tipos de cáncer, lo que las hace relevantes para estudiar los efectos de la mutación del gen P53 en el crecimiento, desarrollo y progresión del cáncer. |
Limitaciones
La limitación asociada a la línea celular HEP3B es:
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Modelo celular in vitro |
La línea celular HEP3B sirve como modelo in vitro de células de carcinoma hepatocelular (CHC). Sin embargo, es posible que no represente totalmente la complejidad del CHC tal y como se encuentra en los organismos vivos. En consecuencia, los resultados experimentales in vitro pueden diferir de los observados in vivo. |
4.aplicaciones de las células HEP3B en investigación
La línea celular HEP3B ofrece varias aplicaciones en la investigación biomédica. Algunas de las principales aplicaciones de investigación de las células HEP3B incluyen:
- Biología del cáncer: HEP3B es una línea celular de carcinoma hepatocelular humano. Es un modelo celular inestimable para investigar los mecanismos celulares y moleculares que subyacen al desarrollo y la progresión del CHC. Los investigadores utilizan estas células para estudiar mutaciones genéticas, procesos celulares y vías de señalización celular asociadas al cáncer de hígado. Por ejemplo, en un estudio en el que se utilizaron células HEP3B se descubrió que el microARN-223-3p regula los componentes del inflamasoma NLRP3, inhibe la proliferación y aumenta la apoptosis de las células de hepatocarcinoma HEP3B [2].
- Cribado y desarrollo de fármacos: La línea celular HEP3B también se utiliza para probar, cribar y desarrollar nuevas terapias contra el carcinoma hepático. Además, se utiliza para evaluar la toxicidad y eficacia de diferentes fármacos y tratamientos contra el cáncer. Los investigadores también utilizaron estas células de hepatoma para estudiar el metabolismo de los fármacos. Los investigadores utilizaron células HEP3B y evaluaron el potencial citotóxico del extracto de la planta Cotinus coggygria en las células de carcinoma de hepatocitos HEP3B [3].
- Infecciones víricas: HEP3B es una línea celular positiva al virus de la hepatitis B; por lo tanto, se emplea para estudiar infecciones víricas que pueden conducir al desarrollo de cáncer de hígado, es decir, VHB y VHC. Esto puede ayudar a comprender mejor las infecciones virales y a desarrollar posibles tratamientos antivirales. Por ejemplo, en un estudio se utilizaron células cancerosas de hepatocitos HEP3B y se investigó la importancia de la ubiquitinación para la propagación del virus de la hepatitis c. Los resultados sugirieron que la proteasa 15 específica de la ubiquitina (USP15) interviene en la propagación del VHC a través de la regulación de funciones específicas de los hepatocitos, como la formación de gotas lipídicas y la traducción del ARN del VHC [4].
5.publicaciones sobre la línea celular HEP3B
Esta sección del artículo cubrirá algunas publicaciones de investigación interesantes sobre las células HEP3B.
Esta publicación en Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) propuso que el estrés del retículo endoplásmico inducido por compuestos de luteolina puede ejercer efectos antitumorales en células HEP3B sin P53 de una manera independiente de P53.
Ataque potencial a células de cáncer de hígado Hep3B por lupeol aislado de Avicennia marina
Este estudio publicado en Archiv der Pharmazie (2021) propuso un triterpenoide pentacíclico, el lupeol, como posible agente anticancerígeno contra las células HEP3B.
Este artículo se publica en Molecular Medicine Reports (2017). Los resultados del estudio afirman que el extracto etanólico de Cnidium monnieri (L.) Cusson induce la muerte celular (apoptosis) y la detención del ciclo celular en células de hepatocarcinoma HepG2 y HEP3B a través de la regulación de la vía de señalización p53 y Akt/GSK-3β.
Esta investigación publicada en Biomolecules and Therapeutics (2020) propuso que la auranofina exhibe una actividad sinérgica y promueve la apoptosis mediada por sulforafano de las células HEP3B a través de la activación de la vía PI3K/AKT.
Este artículo de investigación en BioFactors (2023) propuso que el ARN circular-0072309 ejerce efectos antitumorales en células de carcinoma hepatocelular HEP3B a través de la focalización en miARN-665.
6.recursos para la línea celular HEP3B: Protocolos, vídeos y más
Los siguientes son algunos recursos disponibles sobre las células HEP3B:
- Transfección HEP3B: Este vídeo explica el protocolo de transfección de las células HEP3B.
- Eficacia de la transfección de HEP3B: Este enlace le ayudará a conocer la composición del medio DMEM para HEP3B, el pasaje de células y el protocolo de transfección para células HEP3B. Además, proporciona información para optimizar el reactivo HEP3B lipofectamine 3000 en su protocolo de transfección.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células HEP3B:
- Condiciones de cultivo HEP3B: Este enlace le ayudará a conocer el protocolo de manipulación y mantenimiento de los cultivos Huh7 y HEP3B.
- Células HEP3B: Este sitio web tiene mucha información sobre las células HEP3B, incluyendo los medios de cultivo HEP3B, el protocolo para la división celular, la descongelación y el manejo de cultivos proliferativos y criopreservados.
Referencias
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origen y propiedades de las líneas celulares de carcinoma hepatocelular. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al., miRNA-223-3p regula NLRP3 para promover la apoptosis e inhibir la proliferación de células hep3B. Medicina experimental y terapéutica, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. y S. Selen-Isbilir, Efecto citotóxico del extracto de Cotinus coggygria en la línea celular de cáncer Hep3B. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., USP15 participa en la propagación del virus de la hepatitis C mediante la regulación de la traducción del ARN viral y la formación de gotas lipídicas. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.