Células Hep3B: investigación y descubrimientos sobre el carcinoma hepatocelular
HEP3B es una línea celular inmortalizada derivada de un carcinoma hepatocelular humano. Se utiliza ampliamente en la investigación sobre hepatotoxicidad y metabolismo de fármacos. La eficiencia de transfección de HEP3B es considerable; por lo tanto, estas células se emplean habitualmente para estudiar el desarrollo, la progresión y las intervenciones terapéuticas del cáncer de hígado. Este artículo recoge toda la información necesaria sobre la línea celular HEP3B para ayudarle a trabajar con ella. Principalmente, incluirá:
- Medio de crecimiento
- Para el cultivo de las células HEP3B se utiliza un medio EMEM que contiene un 10 % de FBS, 2,2 g/l de NaHCO3, 2 mM de L-glutamina y la solución salina equilibrada de Earle (EBSS).
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de las células HEP3B es de aproximadamente 36 horas.
- Tipo de crecimiento
- Esta línea celular de hepatoma es adherente.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir HEP3B
- Características generales y origen de las células HEP3B
- Información sobre el cultivo de la línea celular HEP3B
- Línea celular HEP3B: ventajas y limitaciones
- Aplicaciones de las células HEP3B en la investigación
- Publicaciones sobre la línea celular HEP3B
- Recursos para la línea celular HEP3B: protocolos, vídeos y más
- Características generales y origen de las células HEP3B
- Información sobre el cultivo de la línea celular HEP3B
- Línea celular HEP3B: ventajas y limitaciones
- Aplicaciones de las células HEP3B en la investigación
- 5. Publicaciones sobre la línea celular HEP3B
- Recursos para la línea celular HEP3B: protocolos, vídeos y más
- Preguntas frecuentes
Características generales y origen de las células HEP3B
La información principal que necesita sobre una línea celular es su origen y sus características generales. Esto puede ayudarle a decidir su uso en su investigación y a manejarla. Esta sección del artículo cubre toda la información esencial sobre el origen y las características de HEP3B. Aquí aprenderá: ¿Qué son las líneas celulares Hep 3B? ¿Cuál es el origen de las células Hep3B? ¿Cuál es la morfología de las células HEP3B?
- HEP3B, una línea celular continua de hepatoma humano, se originó a partir del tejido hepático de un niño africano de 8 años con carcinoma hepatocelular (CHC). Fue establecida por Aden y sus colegas en 1979 en el laboratorio de Barbara B. Knowles, en el Instituto Wistar, Filadelfia, EE. UU. [1].
- Las células HEP3B presentan una integración del genoma del virus de la hepatitis B (VHB) en su cromosoma.
- Estas células de carcinoma hepatocelular presentan una morfología epitelial.
- Las células HEP3B tienen un número modal de cromosomas de 60. A diferencia de las HepG2, no presentan una reordenación del cromosoma 1.
¿Cuál es la diferencia entre HepG2 y Hep3B?
Las células HepG2 y HEP3B difieren en el número de cromosomas por célula. Las células HEP3B contienen 60 cromosomas, mientras que las células HepG2 tienen una media de 55 cromosomas. Además, las células HepG2 no son tumorigénicas y son negativas para la hepatitis B, mientras que las células HEP3B son tumorigénicas y positivas para el VHB.
Información sobre el cultivo de la línea celular HEP3B
Conocer la información sobre el cultivo de una línea celular puede facilitarte el trabajo. En esta sección se tratan todos los puntos clave para el cultivo de la línea celular HEP3B del VHB, incluyendo: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HEP3B? ¿Cuáles son las condiciones de cultivo de HEP3B? ¿Cómo se cultivan las células HEP3B del CHC?
Puntos clave para el cultivo de células HEP3B
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de las células HEP3B es de aproximadamente 36 horas.
Adherentes o en suspensión:
Esta línea celular de hepatoma es adherente.
Proporción de división:
Las células HEP3B se subcultivan en una proporción de 1:2 a 1:4. Las células HEP3B adherentes se enjuagan con PBS 1x y, a continuación, se incuban con la solución de disociación Accutase. Tras 8 a 10 minutos, se añade medio fresco y se centrifugan las células. A continuación, las células recogidas se resuspenden cuidadosamente y se vierten en frascos que contienen medio de cultivo en la proporción de división recomendada.
Medio de crecimiento:
Para el cultivo de células HEP3B se utiliza medio EMEM que contiene un 10 % de FBS, 2,2 g/l de NaHCO₃, 2 mM de L-glutamina y solución salina equilibrada de Earle (EBSS).
Condiciones de crecimiento:
Las células HEP3B se cultivan en una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro continuo de CO₂ al 5 %.
Almacenamiento:
Las células HEP3B congeladas se almacenan a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador eléctrico o en la fase de vapor de nitrógeno líquido.
Proceso de congelación y medio:
El medio de congelación recomendado para las células HEP3B es CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lenta que permite solo una disminución de 1 °C en la temperatura por minuto para proteger la viabilidad celular.
Proceso de descongelación:
Las células congeladas se descongelan en un baño de agua preajustado a 37 °C durante 40 a 60 segundos. Posteriormente, estas células se añaden al medio de cultivo fresco y se centrifugan para eliminar los elementos del medio de congelación. Las células recogidas se resuspenden y se distribuyen en nuevos frascos para su cultivo.
Nivel de bioseguridad:
Se requiere un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para el cultivo de células HEP3B.
Línea celular HEP3B: ventajas y limitaciones
HEP3B es una línea celular de carcinoma hepatocelular ampliamente utilizada. En esta sección se abordarán algunas de las principales ventajas y limitaciones de estas células de hepatoma.
Ventajas
Las principales ventajas de las células HEP3B son:
Fáciles de cultivar
Las células HEP3B no tienen requisitos de cultivo celular exigentes, lo que las hace fáciles de manejar y mantener en un laboratorio de investigación. Esto simplifica los procedimientos experimentales.
Alta eficiencia de transfección
Las células HEP3B presentan una notable eficiencia de transfección, lo que hace que se utilicen ampliamente en estudios relacionados con la manipulación genética y la expresión génica.
Tumorigenicidad
HEP3B es una línea celular de carcinoma hepatocelular tumorigénica capaz de formar tumores cuando se inyecta en un ratón inmunodeprimido. Esto facilita el estudio de la progresión y el desarrollo del cáncer utilizando modelos de xenoinjertos de HEP3B.
Estado del P53 en HEP3B
Las células HEP3B poseen una mutación del gen P53 similar a la del carcinoma hepatocelular (CHC) y otros tipos de cáncer, lo que las hace relevantes para estudiar los efectos de la mutación de P53 en el crecimiento, el desarrollo y la progresión del cáncer.
Limitaciones
La limitación asociada a la línea celular HEP3B es:
Modelo celular in vitro
La línea celular HEP3B sirve como modelo in vitro de las células del carcinoma hepatocelular (CHC). Sin embargo, es posible que no represente plenamente la complejidad del CHC tal y como se encuentra en los organismos vivos. En consecuencia, los resultados experimentales in vitro pueden diferir de los observados in vivo.
Aplicaciones de las células HEP3B en la investigación
La línea celular HEP3B ofrece varias aplicaciones en la investigación biomédica. Algunas de las principales aplicaciones de las células HEP3B incluyen:
- Biología del cáncer: HEP3B es una línea celular de carcinoma hepatocelular humano. Se trata de un modelo celular de gran valor para investigar los mecanismos celulares y moleculares subyacentes al desarrollo y la progresión del CHC. Los investigadores utilizan estas células para estudiar mutaciones genéticas, procesos celulares y vías de señalización celular asociadas al cáncer de hígado. Por ejemplo, un estudio utilizó células HEP3B y descubrió que el microARN-223-3p regula los componentes del inflamasoma NLRP3, inhibe la proliferación y potencia la apoptosis de las células de hepatocarcinoma HEP3B [2].
- Cribado y desarrollo de fármacos: La línea celular HEP3B también se utiliza para probar, cribar y desarrollar nuevas terapias contra el carcinoma hepático. Además, se utiliza para evaluar la toxicidad y la eficacia de diferentes fármacos y tratamientos contra el cáncer. Los investigadores también utilizaron estas células de hepatoma para estudiar el metabolismo de los fármacos. Los investigadores utilizaron células HEP3B y evaluaron el potencial citotóxico del extracto de la planta Cotinus coggygria en células de carcinoma hepatocelular HEP3B [3].
- Infecciones virales: HEP3B es una línea celular positiva al virus de la hepatitis B; por lo tanto, se emplea para estudiar infecciones virales que pueden conducir al desarrollo de cáncer de hígado, es decir, el VHB y el VHC. Esto puede ayudar a comprender mejor las infecciones virales y a desarrollar posibles tratamientos antivirales. Por ejemplo, un estudio utilizó células de carcinoma hepatocítico HEP3B e investigó la importancia de la ubiquitinación para la propagación del virus de la hepatitis C. Los resultados sugirieron que la proteasa 15 específica de ubiquitina (USP15) interviene en la propagación del VHC mediante la regulación de funciones específicas de los hepatocitos, como la formación de gotas lipídicas y la traducción del ARN del VHC [4].
5. Publicaciones sobre la línea celular HEP3B
En esta sección del artículo se tratarán algunas publicaciones de investigación interesantes sobre las células HEP3B.
Esta publicación en Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) propuso que el estrés del retículo endoplásmico inducido por el compuesto luteolina podría ejercer efectos antitumorales en las células HEP3B sin P53 de una manera independiente de P53.
Posible acción sobre las células de cáncer de hígado Hep3B del lupeol aislado de Avicennia marina
Este estudio publicado en Archiv der Pharmazie (2021) propuso un triterpenoide pentacíclico, el lupeol, como posible agente anticancerígeno contra las células HEP3B.
Este artículo se publicó en Molecular Medicine Reports (2017). Los resultados del estudio indican que el extracto etanólico de Cnidium monnieri (L.) Cusson induce la muerte celular (apoptosis) y la detención del ciclo celular en las células de carcinoma hepatocelular HepG2 y HEP3B a través de la regulación de p53 y de la vía de señalización Akt/GSK-3β.
Esta investigación, publicada en Biomolecules and Therapeutics (2020), propuso que la auranofina exhibe actividad sinérgica y promueve la apoptosis mediada por el sulforafano de las células HEP3B a través de la activación de la vía PI3K/AKT.
Este artículo de investigación publicado en BioFactors (2023) propone que el ARN circular-0072309 ejerce efectos antitumorales en las células de carcinoma hepatocelular HEP3B al actuar sobre el miARN-665.
Recursos para la línea celular HEP3B: protocolos, vídeos y más
A continuación se enumeran algunos recursos disponibles sobre las células HEP3B:
- Transfección de HEP3B: este vídeo explica el protocolo de transfección para las células HEP3B.
- Eficacia de la transfección de HEP3B: este enlace le ayudará a conocer la composición del medio DMEM para HEP3B, el paso de células y el protocolo de transfección para las células HEP3B. Además, proporciona información para optimizar el uso del reactivo Lipofectamine 3000 en su protocolo de transfección.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células HEP3B:
- Condiciones de cultivo de HEP3B: Este enlace le ayudará a conocer el protocolo para el manejo y mantenimiento de cultivos de Huh7 y HEP3B.
- Células HEP3B: Este sitio web contiene mucha información sobre las células HEP3B, incluyendo los medios HEP3B, el protocolo para la división celular, la descongelación y el manejo de cultivos proliferativos y crioconservados.
Referencias
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origen y propiedades de las líneas celulares de carcinoma hepatocelular. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al., El miRNA-223-3p regula el NLRP3 para promover la apoptosis e inhibir la proliferación de las células Hep3B. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. y S. Selen-Isbilir, Efecto citotóxico del extracto de Cotinus coggygria sobre la línea celular cancerosa Hep3B. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., La USP15 participa en la propagación del virus de la hepatitis C a través de la regulación de la traducción del ARN viral y la formación de gotas lipídicas. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.