Línea celular HT22
La HT22 es una línea celular neuronal murina que se utiliza habitualmente en la investigación neurocientífica. Resulta valiosa para el estudio de trastornos neurodegenerativos y para probar posibles terapias o tratamientos neuroprotectores. Además, las células HT22 son sensibles al glutamato, por lo que se utilizan para investigar la toxicidad inducida por el glutamato o el daño neuronal.
- Medio de cultivo
- Para el cultivo de las células HT22 se utiliza medio DMEM. Se complementa con un 10 % de FBS, 4,5 g/l de glucosa, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/l de NaHCO3 y 1,0 mM de piruvato de sodio para un crecimiento celular óptimo.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de las células HT22 es de aproximadamente 15 horas.
- Tipo de crecimiento
- Las células HT22 son adherentes.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir HT22
Este artículo destaca los aspectos fundamentales de las células HT22 que pueden ayudarle en su trabajo de investigación. Se tratarán principalmente:
- Atributos generales y origen de las células HT22
- Información sobre el cultivo de la línea celular HT22
- Ventajas y desventajas de la línea celular HT22
- Aplicaciones de investigación de la línea celular HT22
- Publicaciones de investigación sobre las células HT22
- Recursos para las células HT22: protocolos, vídeos y más
- Características generales y origen de las células HT22
- Información sobre el cultivo de la línea celular HT22
- Ventajas y desventajas de la línea celular HT22
- 5. Publicaciones de investigación sobre las células HT22
- Recursos para las células HT22: protocolos, vídeos y más
- Referencias
- Preguntas frecuentes
Características generales y origen de las células HT22
Esta sección del artículo arrojará luz sobre el origen y las características generales de las células HT22. Es necesario conocer esta información sobre una línea celular antes de comenzar a trabajar con ella. Aquí aprenderás: ¿Qué son las células HT22? ¿Cuál es la morfología de las células del hipocampo HT22? ¿Cuál es el tamaño de las células HT22?
HT22 es una línea celular continua derivada de la región del hipocampo del cerebro de ratón. Se trata de un subclon de la línea celular parental HT-4, desarrollada mediante la inmortalización de tejidos neuronales murinos a través del antígeno T del virus simio 40 (SV40), un poliomavirus sensible a la temperatura.
Estas células se diferencian de las células hipocampales maduras, ya que carecen de receptores de glutamato y colinérgicos, a diferencia de las neuronas maduras de origen hipocampal. Por lo tanto, no son adecuadas para estudios de investigación relacionados con la memoria [1].
Las células HT22 tienen un aspecto similar al de las células epiteliales.
Información sobre el cultivo de la línea celular HT22
Las células HT22 se utilizan en laboratorios de investigación en neurociencia. Antes de cultivar estas células, los investigadores buscan información esencial sobre el cultivo celular que les permita realizar su trabajo de forma fácil y eficiente. En esta sección se tratan todos los puntos clave para el cultivo de células HT22. Descubrirá: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HT22? ¿Cómo se cultivan las células HT22? ¿Cuál es el protocolo de cultivo de las células HT22? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células HT22?
Puntos clave para el cultivo de células HT22
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de las células HT22 es de aproximadamente 15 horas.
Adherentes o en suspensión:
Las células HT22 son adherentes.
Proporción de subcultivo:
La proporción de subcultivo para las células del hipocampo HT22 es de 1:3 a 1:6. En resumen, se retira el medio y se enjuagan las células adherentes con PBS 1x. Se añade la solución de disociación Accutase al frasco y las células se incuban durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se añade medio de cultivo fresco y las células se recogen en un vial para su centrifugación. El sedimento celular obtenido se resuspende cuidadosamente y las células se dispensan en un frasco de cultivo para su crecimiento.
Medio de crecimiento:
Para el cultivo de células HT22 se utiliza medio DMEM. Se suplementa con un 10 % de FBS, 4,5 g/l de glucosa, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/l de NaHCO3 y 1,0 mM de piruvato de sodio para un crecimiento celular óptimo.
Condiciones de crecimiento:
Los cultivos de células HT22 se mantienen en una incubadora humidificada (a 37 °C) con un suministro de CO₂ al 5 %.
Almacenamiento:
Las células HT22 congeladas pueden almacenarse a temperaturas inferiores a -150 °C, ya sea en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja para su conservación a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:
Las células HT22 pueden congelarse en medios CM-1 o CM-ACF utilizando un método de congelación lenta. Este proceso permite una disminución de solo 1 °C en la temperatura de la muestra por minuto, protege a las células del choque térmico y ayuda a mantener su viabilidad.
Proceso de descongelación:
Las células se descongelan en un baño de agua a 37 °C durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño trozo de hielo. A continuación, se añade medio de cultivo a las células y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. El sedimento celular se resuspende y las células se vierten en un nuevo frasco que contiene medio de cultivo. A continuación, las células se incuban a 37 °C en una incubadora durante al menos 24 horas.
Nivel de bioseguridad:
Para el cultivo de células HT22 es obligatorio disponer de un laboratorio con nivel de bioseguridad 1.
Ventajas y desventajas de la línea celular HT22
Las células del hipocampo HT22 presentan una serie de ventajas e inconvenientes que las diferencian de otras líneas celulares neuronales. A continuación se mencionan algunas de las ventajas y desventajas más destacadas de esta línea celular.
Ventajas
Las ventajas de la línea celular neuronal murina HT22 son:
-
Rápida tasa de crecimiento
Las células HT22 tienen un tiempo de duplicación de 15 horas, lo que permite una experimentación rápida y eficiente y contribuye a obtener resultados de investigación oportunos.
-
Inmortalización
La HT22 es una línea celular inmortalizada, lo que garantiza un crecimiento continuo durante largos periodos. Esto proporciona una disponibilidad constante de células, reduce el tiempo y el coste, y facilita la realización de experimentos a largo plazo con resultados consistentes.
Desventajas
Las desventajas de las células HT22 son:
-
Origen murino
La línea celular HT22 se derivó de tejido del hipocampo del cerebro de ratón, lo que puede no representar plenamente la complejidad de la fisiología y el comportamiento de las neuronas humanas, lo que limita su relevancia traslacional.
4. Aplicaciones de investigación de la línea celular HT22
Las células HT22 se utilizan ampliamente en la investigación neurobiológica. En esta sección del artículo se analizan algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular:
- Investigación en neurociencia: Las células HT22 se emplean ampliamente en la investigación de enfermedades neurodegenerativas, como el Alzheimer y el Parkinson. Se consideran una valiosa herramienta de investigación para estudiar los mecanismos de neurotoxicidad y estrés oxidativo relacionados con estas enfermedades. Una investigación realizada en 2020 descubrió que la vía PI3K/AKT/CREB está implicada en la toxicidad neural inducida por la hiperglucemia en las células HT22 [2]. De manera similar, un estudio reciente propuso que la vía Nrf2/HO-1 y el eje de señalización NF-κB desempeñan un papel significativo en la toxicidad de la beta-amiloide en las células HT22 [3].
- Cribado de fármacos: Las células HT22 se utilizan ampliamente para pruebas y cribado de fármacos. Ayudan a los investigadores a identificar posibles agentes terapéuticos que presenten efectos neuroprotectores para combatir las enfermedades neurodegenerativas. Un estudio realizado en 2019 exploró el potencial neuroprotector del compuesto tetrahidrocurcumina en células del hipocampo HT22 tratadas con glutamato. En este caso, el glutamato induce estrés oxidativo en las células HT22 y provoca la muerte celular mediante la activación de las proteínas quinasas activadas por mitógenos [4].
5. Publicaciones de investigación sobre las células HT22
A continuación se presentan algunos artículos de investigación interesantes sobre la línea celular HT22:
Este estudio, publicado en la revista International Journal of Molecular Medicine (2019), propuso el potencial neuroprotector de la crocina, un compuesto aislado del Crocus sativus L., en las células HT22 dañadas por L-glutamato.
Esta publicación en Neuropharmacology (2018) informó de que los derivados del oxindol protegen contra la muerte celular de las células HT22 inducida por el estrés oxidativo.
Este artículo de investigación se publicó en el Journal of Ginseng Research en 2019. Este estudio exploró los efectos neuroprotectores de un producto natural, el ginsenósido Rb2, utilizando la línea celular HT22. El estudio descubrió que el ginsenósido Rb2 reducía eficazmente el estrés oxidativo inducido por el glutamato y la muerte celular en las células del hipocampo murino HT22.
Este estudio, publicado en Ecotoxicology and Environmental Safety (2021), evaluó el potencial citotóxico de las nanopartículas de plata en la línea celular HT22.
La ferrostatina-1 protege a las células HT-22 de la toxicidad oxidativa
Este artículo de investigación se publicó en 2020 en Neural regeneration research. En él se proponía que la ferrostatina-1, un inhibidor de la ferroptosis, previene la toxicidad oxidativa en las células del hipocampo HT22.
Recursos para las células HT22: protocolos, vídeos y más
Algunos recursos en línea sobre las células HT22 explican sus protocolos de transfección, diferenciación y cultivo celular:
- Transfección de HT22: Este documento contiene un protocolo optimizado para la transfección de HT22 en placas de cultivo celular de 24 y 96 pocillos.
- Diferenciación de células HT22: este artículo le guiará de forma exhaustiva sobre el protocolo de diferenciación de HT22.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo celular de HT22:
- Subcultivo de células HT22: este enlace le ayudará a conocer el protocolo de subcultivo de la línea celular HT22. Además, le servirá de ayuda para aprender el protocolo de inducción de neurotoxicidad en las células.
- Células del hipocampo HT22: este sitio web contiene mucha información útil sobre el tiempo de duplicación de las células HT22, los medios de cultivo y los protocolos de cultivo celular.
Referencias
- He, M., et al., La diferenciación induce susceptibilidad a la excitotoxicidad en las neuronas HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., La fisetina previene la neurotoxicidad inducida por niveles elevados de glucosa en las células HT22 a través de la vía de señalización PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Efectos protectores de la berberina contra la neurotoxicidad inducida por β-amiloide en células HT22 a través de la vía Nrf2/HO-1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Efectos neuroprotectores de la tetrahidrocurcumina contra el estrés oxidativo inducido por el glutamato en células HT22 del hipocampo. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.