Línea celular HT22
HT22 es una línea celular neuronal murina empleada habitualmente en la investigación neurocientífica. Es valiosa para estudiar trastornos neurogenerativos y probar posibles terapias o tratamientos neuroprotectores. Además, las células HT22 son sensibles al glutamato, por lo que se utilizan para investigar la toxicidad o el daño neuronal inducidos por el glutamato.
Este artículo destaca los aspectos imperativos de las células HT22 que pueden ayudarle en su trabajo de investigación. Se tratarán principalmente:
- Atributos generales y origen de las células HT22
- Información sobre el cultivo de la línea celular HT22
- Ventajas y desventajas de la línea celular HT22
- Aplicaciones de investigación de la línea celular HT22
- Publicaciones de investigación sobre células HT22
- Recursos para células HT22: Protocolos, vídeos y más
1. Atributos generales y origen de las células HT22
Esta sección del artículo arrojará luz sobre el origen y las características generales de las células HT22. Conocer esta información sobre una línea celular es necesario antes de comenzar a trabajar con ella. Aquí aprenderá: ¿Qué son las células HT22? ¿Cuál es la morfología de las células HT22 del hipocampo? ¿Cuál es el tamaño de las células HT22?
HT22 es una línea celular continua derivada de la región del hipocampo del cerebro de ratón. Es un subclon de la línea celular parental HT-4 desarrollada por inmortalización de tejidos neuronales murinos mediante un antígeno T de poliomavirus del virus simio 40 (SV40) sensible a la temperatura.
Estas células difieren de las células hipocampales maduras en que carecen de receptores de glutamato y colinérgicos como las neuronas maduras de origen hipocampal. Por lo tanto, no son adecuadas para estudios de investigación relacionados con la memoria [1].
Las células HT22 tienen un aspecto similar al de las células epiteliales.
2. Información sobre el cultivo de la línea celular HT22
Las células HT22 se utilizan en los laboratorios de investigación neurocientífica. Antes de cultivar estas células, los investigadores buscan información esencial sobre el cultivo celular que facilite y haga más eficiente su trabajo. Esta sección cubre todos los puntos clave para el cultivo de células HT22. Usted sabrá: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HT22? ¿Cómo se cultivan las células HT22? ¿Cuál es el protocolo de cultivo de células HT22? ¿Cuál es el medio de cultivo de células HT22?
Puntos clave para el cultivo de células HT22
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de las células HT22 es de aproximadamente 15 horas. |
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Adherentes o en suspensión: |
Las células HT22 son adherentes. |
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Proporción de subcultivo: |
La proporción de subcultivo para las células HT22 del hipocampo es de 1:3 a 1:6. Brevemente, se elimina el medio y las células adherentes se enjuagan con 1 x PBS. Se añade al matraz la solución disociadora de accutasa y se incuban las células de 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se añade medio de cultivo fresco y se recogen las células en un vial para centrifugarlas. El sedimento celular obtenido se resuspende cuidadosamente y las células se introducen en un matraz de cultivo para su crecimiento. |
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Medio de cultivo: |
Para el cultivo de células HT22 se utiliza medio DMEM. Se complementa con un 10% de FBS, 4,5 g/L de glucosa, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO3 y 1,0 mM de piruvato sódico para un crecimiento celular óptimo. |
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Condiciones de crecimiento: |
Los cultivos de células HT22 se mantienen en una incubadora humidificada (37 °C de temperatura) con unaporte de CO2 del 5%. |
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Almacenamiento: |
Las células HT22 congeladas pueden almacenarse a una temperatura inferior a -150 °C en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja a largo plazo. |
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Proceso y medio de congelación: |
Las células HT22 pueden congelarse en medios CM-1 o CM-ACF utilizando un método de congelación lenta. Este proceso permite sólo una disminución de 1 °C en la temperatura de la muestra por minuto, protege a las células del shock y ayuda a mantener su viabilidad. |
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Proceso de descongelación: |
Las células se descongelan en un baño de agua a 37 °C durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño grumo de hielo. Después, se añade medio de cultivo a las células y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. El sedimento celular se resuspende y las células se vierten en el nuevo matraz que contiene los medios de cultivo. A continuación, las células se incuban a 37 °C en una incubadora durante al menos 24 horas. |
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Nivel de bioseguridad: |
El nivel de bioseguridad 1 es obligatorio para el cultivo de células HT22. |
3. Ventajas e inconvenientes de la línea celular HT22
Las células del hipocampo HT22 se asocian con algunas ventajas e inconvenientes que las diferencian de otras líneas celulares neuronales. A continuación se mencionan algunas ventajas y desventajas notables de la línea celular.
Ventajas
Las ventajas de la línea celular neuronal murina HT22 son:
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Rápida tasa de crecimiento
Las células HT22 tienen un tiempo de duplicación de 15 horas, lo que permite una experimentación rápida y eficiente y ayuda a obtener resultados de investigación oportunos.
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Inmortalización
HT22 es una línea celular inmortalizada, lo que garantiza un crecimiento continuo durante periodos prolongados. Esto proporciona una disponibilidad constante de células, reduce el tiempo y los costes, y facilita la realización de experimentos a largo plazo con resultados consistentes.
Desventajas
Las desventajas de las células HT22 son
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Origen murino
La línea celular HT22 se derivó de tejido del hipocampo del cerebro de ratón, que puede no representar completamente la complejidad de la fisiología y el comportamiento de las células neuronales humanas, lo que limita su relevancia traslacional.
4. Aplicaciones de investigación de la línea celular HT22
Las células HT22 se utilizan ampliamente en la investigación neurobiológica. En esta sección del artículo se discuten algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular:
- Investigación en neurociencia: Las células HT22 se emplean ampliamente en la investigación de enfermedades neurodegenerativas, es decir, las enfermedades de Alzheimer y Parkinson. Se consideran una valiosa herramienta de investigación para estudiar la neurotoxicidad y los mecanismos de estrés oxidativo relacionados con estas enfermedades. Una investigación realizada en 2020 descubrió que la vía PI3K/AKT/CREB está implicada en la toxicidad neuronal inducida por la hiperglucemia en células HT22 [2]. Del mismo modo, un estudio reciente propuso que la vía Nrf2/HO-1 y el eje de señalización NF- κB desempeñan papeles significativos en la toxicidad beta amiloide de HT22 [3].
- Cribado de fármacos: Las células HT22 se utilizan ampliamente con fines de ensayo y cribado de fármacos. Ayudan a los investigadores a identificar posibles agentes terapéuticos que exhiben efectos neuroprotectores para combatir enfermedades neurodegenerativas. Un estudio realizado en 2019 exploró el potencial neuroprotector del compuesto tetrahidrocurcumina en células del hipocampo HT22 tratadas con glutamato. En él, el glutamato induce estrés oxidativo en las células HT22 y causa la muerte celular mediante la activación de las proteínas quinasas activadas por mitógenos [4].
5. Publicaciones de investigación con células HT22
Estos son algunos artículos de investigación interesantes sobre la línea celular HT22:
Este estudio del International Journal of Molecular Medicine (2019) propuso el potencial neuroprotector de la crocina, un compuesto aislado del Crocus sativus L. en las células HT22dañadaspor L-glutamato.
Esta publicación en Neuropharmacology (2018) informó que los derivados de oxindol protegen contra la muerte celular HT22 inducida por estrés oxidativo.
Este trabajo de investigación se publicó en el Journal of Ginseng Research en 2019. Este estudio exploró los efectos neuroprotectores de un producto natural, el ginsenósido Rb2, utilizando la línea celular HT22. El estudio encontró que el ginsenósido rb2 redujo eficientemente el estrés oxidativo inducido por glutamato y la muerte celular en células de hipocampo murino HT22.
Este estudio publicado en Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) evaluó el potencial citotóxico de las nanopartículas de plata en la línea celular HT22.
La ferrostatina-1 protege a las células HT-22 de la toxicidad oxidativa
Este artículo de investigación se publicó en 2020 en Neural regeneration research. En él se proponía que la ferrostatina-1, un inhibidor de la ferroptosis, previene la toxicidad oxidativa en células del hipocampo HT22.
6. Recursos para células HT22: Protocolos, vídeos y más
Algunos recursos en línea sobre las células HT22 explican sus protocolos de transfección, diferenciación y cultivo celular:
- Transfección HT22: Este documento contiene un protocolo optimizado para la transfección de HT22 en placas de cultivo celular de 24 y 96 pocillos.
- Diferenciación de células HT22: Este artículo le guiará de forma exhaustiva sobre el protocolo de diferenciación de células HT22.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células HT22:
- Subcultivo de células HT22: Este enlace le ayudará a conocer el protocolo de subcultivo de la línea celular HT22. Además, le ayudará a aprender el protocolo para inducir neurotoxicidad en las células.
- Células HT22 del hipocampo: Este sitio web contiene mucha información útil sobre el tiempo de duplicación de las células HT22, los medios y los protocolos de cultivo celular.
Referencias
- He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin previene las células HT22 de la neurotoxicidad inducida por glucosa alta a través de la vía de señalización PI3K/Akt/CREB. Fronteras en Neurociencia, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Efectos neuroprotectores de la tetrahidrocurcumina contra el estrés oxidativo inducido por glutamato en células HT22 del hipocampo. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.