Línea celular HT-29
La HT-29 es una línea celular de cáncer colorrectal humano con una amplia gama de aplicaciones en la investigación oncológica y toxicológica. Por ejemplo, estas células son sensibles a los tratamientos quimioterapéuticos estándar contra el cáncer colorrectal. Además, la línea celular HT-29 es un modelo in vitro bien caracterizado para investigar la respuesta del epitelio intestinal a la infección bacteriana. Las células HT-29 imitan las características de las células intestinales maduras, es decir, los enterocitos, y por lo tanto son adecuadas para estudios de adhesión y mecanismos.
- Medio de cultivo
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- Tiempo de duplicación
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- Tipo de crecimiento
- Adherente
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir HT-29
- Células HT-29: Origen e información general
- Información sobre el cultivo celular de la línea celular HT-29
- Células HT-29: ventajas y limitaciones
- Células HT-29: aplicaciones
- 5. Publicaciones de investigación sobre las células HT-29
- Recursos sobre las células HT-29: protocolos, vídeos y más
- Referencias
- Preguntas frecuentes
Células HT-29: Origen e información general
Antes de utilizar cualquier línea celular, es importante conocer sus características generales y su origen. Esta sección le ayudará a saber: ¿Qué son las células HT-29? ¿Es HT-29 una línea celular de cáncer colorrectal? ¿Cuál es la morfología de las células HT-29?
¿Qué es la línea celular HT-29? HT-29 es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal establecida en 1964 por Trempe y Fogh. Las células se obtuvieron originalmente del tumor primario de una mujer caucásica (de 44 años) con adenocarcinoma colorrectal [1]. Desde su establecimiento, esta línea celular se ha utilizado para estudiar la biología de los cánceres.
Morfología de las células HT-29: La línea celular HT-29 presenta, en general, una morfología de tipo epitelial. Las células diferenciadas crecen en monocapas, forman uniones célula-célula estrechas y poseen un borde en cepillo apical. Si estas células se cultivan en un medio deficiente en glucosa o se les administran inductores como el butirato o el ácido, muestran características similares a las de los enterocitos.
Tamaño celular: El diámetro de la línea celular de cáncer colorrectal HT-29 es de 11 μm.
Genoma y ploidía: El número modal de cromosomas de la línea celular HT-29 es 71. Puede oscilar entre 68 y 72. Además, el número cromosómico simplificado de las células HT-29 es hipertriplóide, con un componente 2S que se da en un 2,4 %.
¿Qué es HT29 MTX? HT29 MTX es una línea celular resistente al metotrexato aislada de la línea celular original de cáncer de colon humano HT-29 mediante adaptación a 10 µM de metotrexato. Estas células presentan características de células caliciformes maduras secretoras de moco.
Información sobre el cultivo de la línea celular HT-29
Conocer los requisitos básicos de cultivo de una línea celular puede facilitarte el trabajo con ella. Debes saber: ¿cuál es el tiempo de duplicación de la línea celular HT-29? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células HT-29? ¿Qué medios se utilizan para las células HT-29?
Tiempo de duplicación
El tiempo de duplicación medio de la línea celular HT-29 es de 24 horas.
Adherente/en suspensión
La HT-29 es una línea celular adherente.
Densidad de siembra
La densidad de siembra recomendada para las células HT-29 es de 3 x 10⁴ células/cm². Las células cultivadas se lavan con PBS 1X y se desprendieron tras una incubación con Accutase durante 8-10 minutos. Se añade medio fresco y se centrifugan las células. Se resuspende el sedimento celular y se dispensan las células en nuevos frascos a la densidad celular recomendada.
Medio de cultivo
Para el cultivo óptimo de las células HT-29 se utiliza medio mínimo esencial de Eagle (EMEM) suplementado con 2,5 mM de L-glutamina y un 10 % de FBS. El medio debe sustituirse de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento
Las células HT-29 requieren una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro de CO₂ al 5 % para su crecimiento.
Almacenamiento
Estas células se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido a una temperatura inferior a -195 °C.
Medio y proceso de congelación
El medio de congelación utilizado para la línea celular HT-29 es CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lenta que provoca un descenso de 1 °C en la temperatura y protege eficazmente la viabilidad de las células.
Proceso de descongelación
Las células HT-29 congeladas se descongelan en un baño de agua a una temperatura de 37 °C. Estas células pueden resuspenderse y dispensarse directamente en el frasco de medio de crecimiento fresco. Por el contrario, las células descongeladas pueden centrifugarse para eliminar los elementos del medio de congelación, resuspenderse en medio fresco y cultivarse en frascos.
Nivel de bioseguridad
Se utiliza el nivel de bioseguridad 1 para manipular y mantener la línea celular HT-29.
Células HT-29: ventajas y limitaciones
Cada línea celular tiene sus propias ventajas e inconvenientes que la distinguen de otras líneas celulares. En esta sección se tratarán las principales ventajas y limitaciones asociadas a las células HT-29.
Ventajas
Las principales ventajas de las células HT-29 son:
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Fáciles de cultivar
La línea celular HT-29 es fácil de manejar y mantener, sin requisitos complejos para su cultivo. Se cultiva ampliamente en laboratorios de investigación.
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Modelo in vitro de células intestinales
Las células HT-29 pueden diferenciarse en células intestinales maduras (enterocitos y células productoras de moco) en condiciones de cultivo específicas. Se utilizan como modelo celular para estudiar la digestión de los alimentos y la biodisponibilidad.
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Alta eficiencia de transfección
Las células de cáncer de colon HT-29 ofrecen una alta eficiencia de transfección, lo que las hace adecuadas para estudios de expresión y regulación génica. Se pueden realizar experimentos de transfección tanto transitoria como estable utilizando diversos métodos.
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Sensibilidad a los fármacos
Las células HT-29 son sensibles a fármacos quimioterapéuticos como el fluorouracilo y el oxaliplatino, de uso común en el tratamiento del cáncer de colon. Se utilizan para estudiar la resistencia a los fármacos y para cribar posibles fármacos terapéuticos para el carcinoma colorrectal.
Limitaciones
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Heterogeneidad
Las células HT-29, al igual que otras líneas celulares cancerosas, presentan heterogeneidad y pueden no formar una población celular uniforme. Esto puede afectar a la reproducibilidad de los resultados en determinados ensayos y dar lugar a variaciones menores en los resultados experimentales.
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Diferenciación limitada
Las células HT-29 tienen un potencial de diferenciación limitado. No se diferencian completamente en células intestinales o de colon, sino que solo presentan algunas características distintivas. Esta limitación puede restringir su uso en el estudio de procesos biológicos más complejos.
Células HT-29: Aplicaciones
La línea celular HT-29 se cultiva ampliamente en laboratorios de investigación debido a su amplia gama de aplicaciones. En esta sección se tratarán solo algunas de las aplicaciones más significativas de las células HT-29.
Investigación sobre el cáncer: HT-29 es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal, por lo que se utiliza para estudiar la progresión y el desarrollo del cáncer, así como los mecanismos moleculares subyacentes. Un estudio realizado en 2018 utilizó la línea celular HT-29 para investigar las moléculas celulares responsables de la metástasis. Este estudio observó que los genes de la vimentina y el CXCR4 regulan la metástasis celular. Por su parte, la transfección del mimético del microARN-193a-5p puede reducir los niveles de ARNm de estos genes y disminuir con éxito la metástasis de las células cancerosas [2].
Investigación toxicológica: La línea celular HT-29 se utiliza ampliamente en la investigación toxicológica. Estas células de carcinoma colorrectal se emplean para evaluar la toxicidad de diferentes fármacos candidatos mediante diversos ensayos. Por ejemplo, un estudio exploró el potencial tóxico de un extracto etanólico de la planta Syzygium cumini en la línea celular HT-29. Los resultados mostraron una supresión significativa del crecimiento de las células HT-29, lo que indica las prometedoras propiedades anticancerígenas del extracto [3].
Microbiología: Las células HT-29 pueden utilizarse como sistema de células huéspedes para investigar la patogénesis de posibles microbios, es decir, bacterias y virus. Los investigadores pueden infectar las células HT-29 con microbios para investigar su virulencia y la respuesta del huésped. En un estudio de este tipo se utilizaron células HT-29 para explorar las propiedades probióticas de las bacterias del ácido láctico [4]. Otro estudio utilizó células HT-29 para evaluar la eficacia y la seguridad de los tratamientos con bacteriófagos [5].
5. Publicaciones de investigación sobre las células HT-29
En esta sección se presentan algunas publicaciones destacadas sobre las células HT-29 que le ayudarán a diseñar su estudio de investigación.
Este estudio propuso el extracto etanólico de Syzygium cumini como un posible agente anticancerígeno contra la línea celular colorrectal HT-29. El extracto inhibió significativamente el crecimiento de las células cancerosas.
Esta publicación en Bioscience Reports evaluó la actividad anticancerígena de un compuesto, la tetrandrina, en células HT-29. Los resultados revelaron que la tetrandrina inhibe la proliferación y el crecimiento de las células cancerosas mediante la regulación de las vías de señalización celular.
Este estudio propuso que el miARN-193a-5p podría regular la metástasis de las células HT-29 mediante la regulación de genes relacionados con la metástasis.
Este artículo se publicó en Nature Scientific Reports en 2018. Este estudio utilizó la línea celular tumorigénica HT-29 como modelo celular intestinal para evaluar la eficacia del tratamiento con bacteriófagos propuesto.
En este estudio, los investigadores utilizaron células HT-29 para investigar las actividades probióticas de las bacterias del ácido láctico. Curiosamente, el estudio indicó que las bacterias lactobacilos impiden la adhesión de bacterias patógenas a las células del colon.
Recursos sobre las células HT-29: protocolos, vídeos y más
En esta sección se tratarán algunos recursos en línea disponibles sobre las células HT-29 que ayudarán a aprender sus protocolos de mantenimiento, cultivo y transfección.
Protocolos de cultivo celular
Los siguientes recursos le guiarán sobre el subcultivo de células HT-29.
- Cultivo de células HT-29: este enlace proporciona conocimientos básicos sobre el medio de crecimiento, la descongelación y el subcultivo de las células HT-29.
- Mantenimiento de cultivos de HT-29: este artículo contiene toda la información útil sobre el cultivo y el mantenimiento de las células HT-29.
Protocolos de transfección
La línea celular HT-29 tiene una gran eficiencia de transfección y se utiliza con frecuencia en estudios de expresión génica. Los siguientes recursos describen los posibles protocolos de transfección para estas células.
- Transfección de HT-29: Este enlace web contiene el protocolo detallado para la transfección de células HT-29.
- Transfección de la línea celular HT-29: Este documento describe el protocolo de transfección de la línea celular HT-29 con ADN plasmídico.
Vídeos relacionados con la línea celular HT-29
A continuación se muestran algunos vídeos sobre el cultivo y mantenimiento de esta línea celular tumorigénica.
- Pase de células: Este vídeo muestra el protocolo de pase de células para líneas celulares adherentes.
- Transfección de células HT-29: Este vídeo le guiará sobre el método de transfección utilizado para las células HT-29.
Esperamos que la información de este artículo le resulte útil y suficiente para manejar y mantener la línea celular HT-29. Si tiene previsto utilizar células HT-29 en su estudio, solicítelas a través de nosotros.
Referencias
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles e I. Recio, «Línea celular HT29. El impacto de los bioactivos alimentarios en la salud: modelos in vitro y ex vivo», 2015: p. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., «El microARN-193a-5p inhibe la migración de las células de cáncer de colon humano HT-29 mediante la supresión de la vía de metástasis». Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean y R. Safaralizadeh, «Evaluación del efecto anticancerígeno del extracto etanólico de Syzygium cumini en la línea celular colorrectal HT-29». Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Propiedades probióticas de los lactobacilos y su capacidad para inhibir la adhesión de bacterias enteropatógenas a las células Caco-2 y HT-29. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J., et al., Los bacteriófagos son más virulentos para las bacterias con células humanas que en cultivos bacterianos; conclusiones a partir de las células HT-29. Scientific Reports, 2018. 8(1): p. 5091.