Línea celular HT-29
HT-29 es una línea celular humana de cáncer colorrectal con una amplia gama de aplicaciones en investigación oncológica y toxicológica. Por ejemplo, estas células son sensibles a los tratamientos quimioterapéuticos estándar contra el cáncer colorrectal. Además, la línea celular HT-29 es un modelo in vitro bien caracterizado para investigar la respuesta del epitelio intestinal a la infección bacteriana. Las células HT-29 imitan las características de las células intestinales maduras, es decir, los enterocitos, por lo que son adecuadas para estudios de fijación y mecanísticos.
Este artículo cubrirá todos los aspectos de la línea celular HT-29 que debe conocer antes de trabajar con ella. Principalmente incluirá:
- Células HT-29: Origen e información general
- Información sobre el cultivo celular de la línea celular HT-29
- Células HT-29: Ventajas y limitaciones
- Células HT-29: Aplicaciones
- Publicaciones de investigación sobre células HT-29
- Recursos sobre células HT-29: Protocolos, vídeos y más
1. Células HT-29: Origen e información general
Antes de utilizar cualquier línea celular, debe conocer sus características generales y su origen. Esta sección le ayudará a aprenderlo: ¿Qué son las células HT-29? ¿Es HT-29 una línea celular de cáncer colorrectal? ¿Cuál es la morfología de las células HT-29?
¿Qué es la línea celular HT-29? HT-29 es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal establecida en 1964 por Trempe y Fogh. Las células procedían originalmente del tumor primario de una mujer caucásica (44 años) con adenocarcinoma colorrectal [1]. Desde su creación, esta línea celular se ha utilizado para estudiar la biología de los cánceres.
Morfología de las células HT-29 La línea celular HT-29 tiene generalmente una morfología de tipo epitelial. Las células diferenciadas crecen en monocapas, forman uniones célula-célula estrechas y poseen un borde en cepillo apical. Si estas células se cultivan en un medio deficiente en glucosa o se les administran inductores como butirato o ácido, presentan características similares a las de los enterocitos.
Tamaño celular: El diámetro de la línea celular de cáncer colorrectal HT-29 es de 11 μm.
Genoma y ploidía: El número modal de cromosomas para la línea celular HT-29 es de 71. Puede oscilar entre 68 y 72. Además, el número cromosómico racionalizado para las células HT-29 es hiper-triploide, con el componente 2S que se produce a una tasa del 2,4 %.
¿Qué es HT29 MTX? HT29 MTX es una línea celular resistente al metotrexato aislada de la línea celular original HT-29 de cáncer de colon humano mediante adaptación a 10 µM de metotrexato. Estas células presentan características de células caliciformes maduras secretoras de moco.
2. Información sobre el cultivo de la línea celular HT-29
Conocer los requisitos básicos de cultivo de una línea celular puede facilitarle el trabajo con ella. Debe saber: ¿cuál es el tiempo de duplicación de la línea celular HT-29? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células HT-29? ¿Qué medio de cultivo utilizar para las células HT-29?
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Tiempo de duplicación |
El tiempo medio de duplicación de la línea celular HT-29 es de 24 horas. |
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Adherente/suspensión |
HT-29 es una línea celular adherente. |
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Densidad de siembra |
La densidad de siembra recomendada para las células HT-29 es de 3 x104 células/cm2. Las células cultivadas se lavan con 1 X PBS y se separan después de incubarlas con Accutase durante 8-10 minutos. Se añade medio fresco y se centrifugan las células. El sedimento celular se resuspende y las células se dispensan en nuevos matraces a la densidad celular recomendada. |
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Medio de cultivo |
Para el cultivo óptimo de células HT-29 se utiliza el Medio Esencial Mínimo de Eagle (EMEM) suplementado con 2,5 mM de L-glutamina y 10% de FBS. El medio debe sustituirse de 2 a 3 veces por semana. |
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Condiciones de crecimiento |
Las células HT-29 requieren un incubador humidificado con 37°C de temperatura y 5% deCO2 para su crecimiento. |
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Almacenamiento |
Estas células se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido a menos de -195°C. |
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Medio y proceso de congelación |
El medio de congelación utilizado para la línea celular HT-29 es CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lento que provoca un descenso de la temperatura de 1 °C y protege eficazmente la viabilidad de las células. |
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Proceso de descongelación |
Las células HT-29 congeladas se descongelan en un baño de agua a 37 °C de temperatura. Estas células pueden resuspenderse y dispensarse directamente en el matraz de medio de crecimiento fresco. Por el contrario, las células descongeladas pueden centrifugarse para eliminar los elementos del medio de congelación, resuspenderse en medio fresco y cultivarse en matraces. |
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Nivel de bioseguridad |
El nivel de bioseguridad 1 se utiliza para manipular y mantener la línea celular HT-29. |
3. Células HT-29: Ventajas y limitaciones
Cada línea celular tiene ventajas y desventajas únicas que la distinguen de otras líneas celulares. Esta sección cubrirá las principales ventajas y limitaciones asociadas a las células HT-29.
Ventajas
Las principales ventajas de las células HT-29 son
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Facilidad de cultivo
La línea celular HT-29 es fácil de manipular y mantener, sin requisitos complejos para su cultivo. Se cultiva ampliamente en los laboratorios de investigación.
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Modelo in vitro de células intestinales
Las células HT-29 pueden diferenciarse en células intestinales maduras (enterocitos y células productoras de moco) en condiciones de cultivo específicas. Se utilizan como modelo celular para estudiar la digestión y la biodisponibilidad de los alimentos.
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Alta eficacia de transfección
Las células HT-29 de cáncer de colon ofrecen una alta eficiencia de transfección, lo que las hace adecuadas para estudios de expresión y regulación génica. Pueden realizarse experimentos de transfección tanto transitoria como estable utilizando varios métodos.
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Sensibilidad a los fármacos
Las células HT-29 son sensibles a fármacos quimioterapéuticos como el fluorouracilo y el oxaliplatino, utilizados habitualmente en el tratamiento del cáncer de colon. Se utilizan para estudiar la resistencia a los fármacos y cribar posibles fármacos terapéuticos para el carcinoma colorrectal.
Limitaciones
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Heterogeneidad
Las células HT-29, al igual que otras líneas celulares de cáncer, presentan heterogeneidad y pueden no formar una población celular uniforme. Esto puede afectar a la reproducibilidad de los resultados en determinados ensayos y dar lugar a pequeñas variaciones en los resultados experimentales.
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Diferenciación limitada
Las células HT-29 tienen un potencial de diferenciación limitado. No se diferencian completamente en células intestinales o de colon, sino que presentan sólo algunos rasgos característicos. Esta limitación puede restringir su uso en el estudio de procesos biológicos más complejos.
4. células HT-29: Aplicaciones
La línea celular HT-29 se cultiva ampliamente en los laboratorios de investigación debido a su amplia gama de aplicaciones. Esta sección cubrirá sólo algunas aplicaciones significativas de las células HT-29.
Investigación del cáncer: HT-29 es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal, por lo que se utiliza para estudiar la progresión del cáncer, el desarrollo y los mecanismos moleculares subyacentes. Un estudio realizado en 2018 utilizó la línea celular HT-29 para investigar las moléculas celulares responsables de la metástasis. Este estudio observó que los genes vimentina y CXCR4 regulan la metástasis celular. Mientras que la transfección del imitador del microARN-193a-5p puede reducir los niveles de ARNm de estos genes y disminuir con éxito la metástasis de las células cancerosas [2].
Investigación toxicológica: La línea celular HT-29 se utiliza ampliamente en la investigación toxicológica. Estas células de carcinoma colorrectal se utilizan para evaluar la toxicidad de diferentes fármacos candidatos mediante diferentes ensayos. Por ejemplo, un estudio exploró el potencial de toxicidad de un extracto etanólico de la planta Syzygium cumini en la línea celular HT-29. Los resultados mostraron una supresión significativa de las células HT-29 en la línea celular. Los resultados mostraron una supresión significativa del crecimiento de células HT-29, lo que indica las prometedoras propiedades anticancerígenas del extracto [3].
Microbiología: HT-29 puede utilizarse como sistema celular huésped para investigar la patogénesis de posibles microbios, es decir, bacterias y virus. Los investigadores pueden infectar células HT-29 con microbios para investigar su virulencia y la respuesta del huésped. En un estudio de este tipo se utilizaron células HT-29 para explorar las propiedades probióticas de las bacterias del ácido láctico [4]. Otro estudio utilizó células HT-29 para evaluar la eficacia y seguridad de tratamientos con bacteriófagos [5].
5. Publicaciones de investigación sobre células HT-29
Esta sección ilustrará algunas publicaciones notables sobre células HT-29 que le ayudarán a concebir su estudio de investigación.
Este estudio propuso el extracto etanólico de Syzygium cumini como potencial agente anticancerígeno contra la línea celular de cáncer colorrectal HT-29. El extracto suprimió significativamente el crecimiento de las células cancerosas.
Esta publicación en Bioscience Reports probó la actividad anticancerígena de un compuesto, la tetradrina, en células HT-29. Los resultados revelaron que la tetradrina inhibe la proliferación y el crecimiento de las células cancerosas mediante la regulación de las vías de señalización celular.
Este estudio propone que miRNA-193a-5p puede regular potencialmente la metástasis de células HT-29 mediante la regulación de genes relacionados con la metástasis.
Este trabajo se publica en Nature Scientific Reports en 2018. Este estudio utilizó la línea celular tumorigénica HT-29 como modelo celular intestinal para evaluar la eficacia del tratamiento bacteriófago propuesto.
En este estudio, los investigadores utilizaron células HT-29 para investigar las actividades probióticas de las bacterias lácticas. Curiosamente, el estudio indicó que las bacterias lactobacilos impiden la adhesión de bacterias patógenas a las células del colon.
6. Recursos sobre células HT-29: Protocolos, vídeos y más
Esta sección cubrirá algunos recursos en línea disponibles sobre las células HT-29 que ayudarán a aprender sus protocolos de mantenimiento, cultivo y transfección.
Protocolos de cultivo celular
Los siguientes recursos le guiarán sobre el subcultivo de células HT-29.
- Cultivo de células HT-29: Este enlace le proporcionará conocimientos básicos sobre el medio de cultivo, la descongelación y el subcultivo de células HT-29.
- Mantenimiento de cultivos de HT-29: Este artículo contiene toda la información útil sobre el cultivo y mantenimiento de células HT-29.
Protocolos de transfección
La línea celular HT-29 tiene una gran eficiencia de transfección, y se utiliza frecuentemente en estudios de expresión génica. Los siguientes recursos describen los posibles protocolos de transfección para estas células.
- Transfección de HT-29: Este enlace web contiene el protocolo detallado para la transfección de células HT-29.
- Transfección de la línea celular HT-29: Este documento describe el protocolo de transfección de la línea celular HT-29 con ADN plasmídico.
Vídeos relacionados con la línea celular HT-29
Aquí encontrará algunos vídeos sobre el cultivo y mantenimiento de esta línea celular tumorigénica.
- Pasaje de células: Este vídeo muestra el protocolo de pasaje de células para líneas celulares adherentes.
- Transfección de células HT-29: Este vídeo le guiará sobre el método de transfección utilizado para células HT-29.
Esperamos que la información contenida en este artículo sea valiosa y suficiente para el manejo y mantenimiento de líneas celulares HT-29. Si planea utilizar células HT-29 en su estudio, solicítenoslas.
Referencias
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29 cell line. El impacto de los bioactivos alimentarios en la salud: modelos in vitro y ex vivo, 2015: p. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p inhibe la migración de células humanas de cáncer de colon HT-29 a través de la supresión de la vía de metástasis. Revista de bioquímica celular, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, y R. Safaralizadeh, Evaluación del efecto anticancerígeno del extracto etanólico de Syzygium cumini en la línea celular colorrectal HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Probiotic properties of lactobacilli and their ability to inhibit the adhesion of enteropathogenic bacteria to Caco-2 and HT-29 cells. Probióticos y proteínas antimicrobianas, 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J., et al., Los bacteriófagos son más virulentos para las bacterias con células humanas que en cultivo bacteriano; insights from HT-29 cells. Informes científicos, 2018. 8(1): p. 5091.