Células HK-2 - Estudio de la función y patología renales con células HK-2 en investigación renal
HK-2 es una línea celular epitelial renal humana inmortalizada que se utiliza habitualmente en la investigación toxicológica. Los investigadores evalúan los efectos de las toxinas ambientales en estas células renales. Además, también emplean células HK-2 para investigar enfermedades renales y sus mecanismos subyacentes.
Este artículo explicará casi toda la información esencial sobre las células HK-2, incluyendo sus características generales, condiciones de cultivo celular, aplicaciones en investigación y mucho más. Aprenderá lo siguiente:
- Células HK-2: Origen y características generales
- Línea celular HK-2: Información sobre el cultivo
- Ventajas y limitaciones de las células HK-2
- Aplicaciones de la línea celular HK-2 en investigación
- Células HK-2: Publicaciones sobre investigación
- Recursos para la línea celular HK-2: Protocolos, vídeos y más
1.células HK-2: Origen y características generales
Es imprescindible conocer el origen y las características generales de una línea celular para su correcta manipulación, mantenimiento y uso. Esta sección del artículo cubrirá lo siguiente: ¿Qué son las células HK-2 del riñón humano 2? ¿Cuál es la función del HK2? ¿Qué son las células HK2? ¿Cuál es el origen de la línea celular HK-2? ¿Cuál es el tamaño y la morfología de las células HK-2?
- Las células del riñón humano 2 (HK-2) son un tipo de células tubulares proximales procedentes del tejido renal normal de un adulto europeo. La línea celular HK-2 se estableció mediante la transfección de células renales con un retrovirus recombinante que comprendía los genes E6/E7 del virus del papiloma humano 16. Este experimento provocó la inmortalización y el establecimiento de una línea celular epitelial renal HK-2 de crecimiento continuo.
- Las células HK-2 presentan una morfología epitelial.
- El tamaño de las células HK-2 oscila entre 17,4 -18,6 µm de diámetro. El diámetro medio es de 18,2 µm [1].
2.línea celular HK-2: Información sobre el cultivo
La información sobre el cultivo de la línea celular del riñón humano 2 puede ayudarle significativamente antes de trabajar con ella. En esta sección del artículo se menciona información imprescindible sobre el cultivo de la línea celular HK-2. Usted sabrá: ¿Son adherentes las células HK-2? ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HK-2? ¿Qué medio se utiliza para cultivar células HK-2?
Puntos clave para el cultivo de células HK-2
|
Tiempo de duplicación de la población: |
El tiempo de duplicación de las células HK-2 oscila entre 47,3 h y 61,7 h. |
|
Adherentes o en suspensión: |
La línea celular epitelial renal HK-2 es adherente. |
|
Proporción de subcultivo: |
Las células HK-2 se subcultivan en una proporción de 1:2 a 1:4. Las células HK-2 adherentes se lavan con 1 x PBS y se incuban a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos después de añadir la solución de Accutase. Se añade medio de cultivo a las células disociadas y se centrifugan. Las células recogidas se resuspenden cuidadosamente y se vierten en nuevos matraces para su cultivo. |
|
Medio de cultivo: |
El medio ideal para las células HK-2 es un medio para la línea celular de queratinocitos que contenga un 10% de suero bovino fetal, 0,05 mg/ml de extracto de hipófisis bovina (BPE) y 5 ng/ml de factor de crecimiento epidérmico (EGF). El medio debe cambiarse cada 2 o 3 días a la semana. |
|
Condiciones de crecimiento: |
Los cultivos de la línea celular de riñón humano 2 se mantienen en una incubadora humidificada con un suministro del 5% de CO2 a 37°C. |
|
Almacenamiento: |
Las células congeladas se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador de temperatura ultrabaja. |
|
Proceso y medio de congelación: |
Los medios de congelación CM-1 o CM-ACF son ideales para la congelación de células HK-2. Brevemente, se opta por un método de congelación lento que sólo permite una caída de temperatura de 1 grado Celsius por minuto y protege a las células de cualquier choque. |
|
Proceso de descongelación: |
Las células congeladas se descongelan en un baño de agua a 37 grados Celsius. Estas células se añaden con medios de cultivo frescos y se resuspenden. A continuación, las células se dispensan en un nuevo matraz que contiene medio de cultivo. Transcurridas 24 horas, se sustituye el medio para eliminar los componentes del medio de congelación. |
|
Nivel de bioseguridad: |
Los cultivos de células HK-2 se mantienen en laboratorios de bioseguridad de nivel 1. |
3.ventajas y limitaciones de las células HK-2
HK-2 es una línea celular epitelial de túbulo proximal humano ampliamente utilizada. Al igual que otras líneas celulares, también presenta algunas ventajas y limitaciones. En esta sección se analizarán algunas de las principales ventajas y desventajas de la línea celular de riñón humano 2.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular HK-2 incluyen:
|
Bien caracterizada |
La línea celular HK-2 está ampliamente caracterizada en cuanto a su morfología, tamaño y genoma. Se han realizado numerosos estudios de investigación con estas células renales normales. |
|
Inmortalizada |
HK-2 es una línea celular continua con una vida útil prolongada, que permite su propagación a través de varios pasajes. Esta característica garantiza un suministro continuo de células para experimentos de laboratorio. |
|
Características epiteliales del túbulo proximal |
Las células HK-2 presentan un fenotipo bien diferenciado característico de las células del túbulo proximal (PTC) que se encuentran en el riñón humano. Este rasgo único convierte a las células HK-2 en un valioso modelo in vitro para estudiar la fisiología renal, los procesos celulares y las respuestas a diversos estímulos. |
Limitaciones
A continuación se exponen algunas limitaciones de la línea celular HK-2:
|
Modelo in vitro |
HK-2 sirve como modelo in vitro de células renales normales, en particular exhibiendo características de las células epiteliales del túbulo proximal. Sin embargo, es posible que no reproduzca completamente la complejidad del tejido renal humano y el microambiente que se encuentra in vivo. |
4.aplicaciones de la línea celular HK-2 en investigación
La línea celular HK-2 tiene numerosas aplicaciones en la investigación toxicológica. A continuación se exponen algunos usos específicos y significativos de esta línea celular de túbulo proximal humano en la investigación.
- Fisiología renal: Las células HK-2 se utilizan habitualmente para estudiar la fisiología y las funciones renales normales. Los investigadores emplean estas células epiteliales del túbulo proximal para investigar los canales iónicos, los procesos de transporte y otros mecanismos celulares que regulan la homeostasis renal. Por ejemplo, los investigadores estudiaron el papel de los canales del potencial receptor transitorio 6 (TRPC6) en la muerte celular inducida por (+)-conocarpan (CNCP), un neolignano, en las células epiteliales renales HK-2 [2].
- Enfermedades renales: La línea celular de riñón humano 2 se utiliza para investigar diferentes enfermedades renales, como la lesión renal aguda y la nefropatía diabética, y sus mecanismos celulares y moleculares subyacentes. Por ejemplo, la investigación descubrió que los niveles de metilación de la proteína klotho están relacionados con el daño renal. La disminución de la metilación del promotor del gen Klotho puede aumentar su expresión y aliviar el daño renal inducido en modelos de ratones db/db diabéticos y en células HK-2 tratadas con glucosa elevada [3].
- Estudios toxicológicos: Las células HK-2 son una gran herramienta de investigación para evaluar los efectos potenciales de diversos fármacos, productos químicos y contaminantes ambientales. Los estudios pueden ayudar a los investigadores a evaluar la seguridad de los fármacos y sus efectos secundarios en las células renales. Por ejemplo, un estudio publicado en 2022 evaluó los posibles efectos de los polisacáridos y el extracto acuoso de la hierba natural Polygonatumkingianum (PK) sobre la nefrotoxicidad inducida por el uranio en las células HK-2. Los investigadores descubrieron que la PK ejerce efectos protectores sobre las células renales. Descubrieron que el PK ejerce efectos protectores y previene la intoxicación por uranio en las células renales [4].
5.células HK-2: Publicaciones de investigación
Las siguientes son algunas publicaciones de investigación interesantes sobre las células epiteliales renales HK-2.
Este estudio publicado en Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) propuso que el ARN circular HIPK3 puede disminuir la inhibición de la proliferación de las células HK-2 causada por la toxicidad de la glucosa elevada. Además, puede inhibir la muerte celular regulando la cascada miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.
Esta investigación publicada en Nanomedicine (2020) evaluó diferentes mecanismos de toxicidad de nanopartículas de oro (AuNPs) en células de carcinoma 786-0 y células epiteliales del túbulo proximal HK-2.
Este artículo se publicó en Renal Failure (2022). Los resultados afirman que el microRNA-320c puede reducir la toxicidad inducida por glucosa elevada en células renales (HK-2) dirigiéndose a PTEN e inhibiendo la señalización PI3K/AKT.
Este estudio publicado en Tissue Engineering Part A (2022) propuso que los exosomas derivados de células madre mesenquimales evitan la transición epitelio-mesénquima de las células renales HK-2.
El artículo del Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) afirma que el lncRNA TapSAKI mejora la respuesta a la inflamación y la muerte celular de HK-2 mediante la regulación de la vía de señalización microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.
6.recursos para la línea celular HK-2: Protocolos, vídeos y más
HK-2 es una famosa línea celular. A continuación se presentan algunos recursos que describen el protocolo de cultivo de células HK-2.
- Cultivo de células HK-2: Este sitio web está repleto de información sobre el cultivo de células HK-2. Por ejemplo, proporciona la receta del medio de cultivo celular HK-2, el protocolo de pasaje y el protocolo de manipulación y mantenimiento de cultivos proliferativos y crioconservados.
- Pasaje celular: Este vídeo le ayudará a aprender un protocolo general de división o pasaje para líneas celulares adherentes.
Referencias
- Handl, J., et al., The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds. Investigación Fisiológica, 2020. 69(4): p. 731.
- Yang, G., et al., La activación de los canales TRPC6 contribuye a la muerte celular apoptótica inducida por (+)-conocarpan en células HK-2. Toxicología química y alimentaria, 2019. 129: p. 281-290.
- Yang, X.H., et al., EGCG atenúa el daño renal mediante la reversión de la hipermetilación de klotho en ratones db/db diabéticos y células HK-2. Medicina Oxidativa y Longevidad Celular, 2020. 2020.
- Li, W., et al., Protective effects of Polygonatum kingianum polysaccharides and aqueous extract on uranium-induced toxicity in human kidney (HK-2) cells. Revista Internacional de Macromoléculas Biológicas, 2022. 202: p. 68-79.