Células HK-2: estudio de la función y la patología renal con células HK-2 en la investigación renal
HK-2 es una línea celular epitelial renal humana inmortalizada que se utiliza habitualmente en la investigación toxicológica. Los investigadores evalúan los efectos de las toxinas ambientales en estas células renales. Además, también emplean células HK-2 para investigar enfermedades renales y sus mecanismos subyacentes.
- Medio de cultivo
- El medio ideal para las células HK-2 es un medio para líneas celulares queratinocíticas que contenga un 10 % de suero fetal bovino, 0,05 mg/ml de extracto hipofisario bovino (BPE) y 5 ng/ml de factor de crecimiento epidérmico (EGF). El medio debe renovarse cada 2 o 3 días a la semana.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de las células HK-2 oscila entre 47,3 h y 61,7 h.
- Tipo de crecimiento
- La línea celular epitelial renal HK-2 es adherente.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-2
- Disponible en
- Cytion — Pedir HK-2
- Células HK-2: Origen y características generales
- Línea celular HK-2: Información sobre el cultivo
- Ventajas y limitaciones de las células HK-2
- Aplicaciones de la línea celular HK-2 en la investigación
- 5. Células HK-2: Publicaciones de investigación
- Recursos para la línea celular HK-2: protocolos, vídeos y más
- Preguntas frecuentes
Células HK-2: origen y características generales
Es imprescindible conocer el origen y las características generales de una línea celular para su correcta manipulación, mantenimiento y uso. En esta sección del artículo se tratarán los siguientes temas: ¿Qué son las células HK-2 del riñón humano 2? ¿Cuál es la función de las HK-2? ¿Qué son las células HK-2? ¿Cuál es el origen de la línea celular HK-2? ¿Cuál es el tamaño y la morfología de las células HK-2?
- Las células del riñón humano 2 (HK-2) son un tipo de células tubulares proximales procedentes del tejido renal normal de un adulto europeo. La línea celular HK-2 se estableció mediante la transfección de células renales con un retrovirus recombinante que comprendía los genes E6/E7 del virus del papiloma humano 16. Este experimento provocó la inmortalización y el establecimiento de una línea celular epitelial renal HK-2 de crecimiento continuo.
- Las células HK-2 presentan una morfología epitelial.
- El tamaño de las células HK-2 oscila entre 17,4 y 18,6 µm de diámetro. El diámetro medio es de 18,2 µm [1].
Línea celular HK-2: Información sobre el cultivo
La información sobre el cultivo de la línea celular renal humana 2 puede resultarle de gran ayuda antes de trabajar con ella. En esta sección del artículo se menciona información imprescindible sobre el cultivo de células HK-2. Descubrirá: ¿Son las células HK-2 adherentes? ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HK-2? ¿Qué medio se utiliza para cultivar células HK-2?
Puntos clave para el cultivo de células HK-2
Tiempo de duplicación de la población:
El tiempo de duplicación de las células HK-2 oscila entre 47,3 h y 61,7 h.
Adherentes o en suspensión:
La línea celular epitelial renal HK-2 es adherente.
Proporción de subcultivo:
Las células HK-2 se subcultivan en una proporción de 1:2 a 1:4. Las células HK-2 adherentes se lavan con PBS 1x y se incuban a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos tras añadir la solución de Accutase. Se añade medio de cultivo a las células disociadas y se centrifugan. Las células recogidas se resuspenden cuidadosamente y se vierten en nuevos frascos para su cultivo.
Medio de crecimiento:
El medio ideal para las células HK-2 es un medio para líneas celulares de queratinocitos que contenga un 10 % de suero fetal bovino, 0,05 mg/ml de extracto hipofisario bovino (BPE) y 5 ng/ml de factor de crecimiento epidérmico (EGF). El medio debe cambiarse cada 2 o 3 días a la semana.
Condiciones de crecimiento:
Los cultivos de la línea celular renal humana 2 se mantienen en una incubadora humidificada con un suministro de CO₂ al 5 % a 37 °C.
Almacenamiento:
Las células congeladas se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador de temperatura ultrabaja.
Proceso de congelación y medio:
Los medios de congelación CM-1 o CM-ACF son ideales para la congelación de células HK-2. En resumen, se opta por un método de congelación lenta que permite un descenso de la temperatura de solo 1 grado Celsius por minuto y protege a las células de cualquier choque.
Proceso de descongelación:
Las células congeladas se descongelan en un baño de agua a una temperatura de 37 °C. A estas células se les añade medio de cultivo fresco y se resuspenden. Posteriormente, las células se dispensan en un nuevo frasco que contiene medio de crecimiento. Tras 24 horas, se sustituye el medio para eliminar los componentes del medio de congelación.
Nivel de bioseguridad:
Los cultivos celulares HK-2 se mantienen en laboratorios de nivel de bioseguridad 1.
Ventajas y limitaciones de las células HK-2
La HK-2 es una línea celular epitelial del túbulo proximal humano muy utilizada. Al igual que otras líneas celulares, también presenta algunas ventajas y limitaciones. En esta sección se analizan algunos de los principales pros y contras de la línea celular renal humana 2.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular HK-2 incluyen:
Bien caracterizada
La línea celular HK-2 está ampliamente caracterizada en cuanto a su morfología, tamaño y genoma. Se han realizado numerosos estudios de investigación sobre estas células renales normales.
Inmortalizada
La HK-2 es una línea celular continua con una vida útil prolongada, lo que permite su propagación a través de varios pases. Esta característica garantiza un suministro continuo de células para experimentos de laboratorio.
Características epiteliales del túbulo proximal
Las células HK-2 presentan un fenotipo bien diferenciado, característico de las células del túbulo proximal (PTC) que se encuentran en el riñón humano. Esta característica única convierte a las células HK-2 en un valioso modelo in vitro para estudiar la fisiología renal, los procesos celulares y las respuestas a diversos estímulos.
Limitaciones
A continuación se enumeran algunas limitaciones de la línea celular HK-2:
Modelo in vitro
La línea HK-2 sirve como modelo in vitro de las células renales normales, mostrando en particular las características de las células epiteliales del túbulo proximal. Sin embargo, es posible que no reproduzca plenamente la complejidad del tejido renal humano y el microambiente que se encuentra in vivo.
Aplicaciones de la línea celular HK-2 en la investigación
La línea celular HK-2 tiene numerosas aplicaciones en la investigación toxicológica. A continuación, hemos analizado algunos usos específicos y significativos de esta línea celular de túbulo proximal humano en la investigación.
- Fisiología renal: Las células HK-2 se utilizan habitualmente para estudiar la fisiología y las funciones renales normales. Los investigadores emplean estas células epiteliales del túbulo proximal para investigar los canales iónicos, los procesos de transporte y otros mecanismos celulares que regulan la homeostasis renal. Por ejemplo, los investigadores estudiaron el papel de los canales del potencial receptor transitorio 6 (TRPC6) en la muerte celular inducida por el (+)-Conocarpan (CNCP), un neolignano, en las células epiteliales renales HK-2 [2].
- Enfermedades renales: La línea celular renal humana 2 se utiliza para investigar diferentes enfermedades renales, como la lesión renal aguda y la nefropatía diabética, así como sus mecanismos celulares y moleculares subyacentes. Por ejemplo, se ha descubierto que los niveles de metilación de la proteína Klotho están relacionados con el daño renal. La disminución de la metilación del promotor del gen Klotho puede potenciar su expresión y aliviar el daño renal inducido en modelos de ratones diabéticos db/db y en células HK-2 tratadas con glucosa elevada [3].
- Estudios toxicológicos: Las células HK-2 son una excelente herramienta de investigación para evaluar los posibles efectos de diversos fármacos, sustancias químicas y contaminantes ambientales. Estos estudios pueden ayudar a los investigadores a evaluar la seguridad de los fármacos y sus efectos secundarios en las células renales. Por ejemplo, un estudio publicado en 2022 evaluó los posibles efectos de los polisacáridos y el extracto acuoso de la hierba natural Polygonatum kingianum (PK) sobre la nefrotoxicidad inducida por el uranio en células HK-2. Se descubrió que el PK ejerce efectos protectores y previene la intoxicación por uranio en las células renales [4].
5. Células HK-2: Publicaciones de investigación
A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación interesantes sobre las células epiteliales renales HK-2.
Este estudio, publicado en Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022), propone que el ARN circular HIPK3 puede reducir la inhibición de la proliferación de las células HK-2 causada por la toxicidad de la hiperglucemia. Además, puede inhibir la muerte celular mediante la regulación de la cascada miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.
Esta publicación de investigación en Nanomedicine (2020) evaluó diferentes mecanismos de toxicidad de las nanopartículas de oro (AuNPs) en células cancerosas 786-0 y células epiteliales del túbulo proximal HK-2.
Este artículo se publicó en Renal Failure (2022). Los resultados indican que el microARN-320c puede reducir la toxicidad inducida por niveles elevados de glucosa en las células renales (HK-2) al actuar sobre el PTEN e inhibir la señalización PI3K/AKT.
Este estudio, publicado en Tissue Engineering Part A (2022), propone que los exosomas derivados de células madre mesenquimales previenen la transición epitelial-mesenquimal de las células renales HK-2.
El artículo publicado en Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) afirma que el lncRNA TapSAKI potencia la respuesta inflamatoria y la muerte celular de las células HK-2 mediante la regulación de la vía de señalización microARN-22/PTEN/TLR4/NF-κB.
Recursos para la línea celular HK-2: protocolos, vídeos y más
HK-2 es una línea celular muy conocida. A continuación se presentan algunos recursos que describen el protocolo de cultivo de células HK-2.
- Cultivo celular de HK-2: este sitio web contiene abundante información sobre el cultivo celular de HK-2. Por ejemplo, proporciona la fórmula del medio de cultivo de HK-2, el protocolo de pases y el protocolo para el manejo y mantenimiento de cultivos proliferativos y criopreservados.
- Pase de células: este vídeo le ayudará a aprender un protocolo general de división o pase para líneas celulares adherentes.
Referencias
- Handl, J., et al., El efecto del paso repetido en la susceptibilidad de las células HK-2 del túbulo proximal humano a los compuestos tóxicos. Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
- Yang, G., et al., La activación de los canales TRPC6 contribuye a la muerte celular apoptótica inducida por (+)-conocarpan en células HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
- Yang, X.H., et al., El EGCG atenúa el daño renal al revertir la hipermetilación de klotho en ratones diabéticos db/db y en células HK-2. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
- Li, W., et al., Efectos protectores de los polisacáridos y el extracto acuoso de Polygonatum kingianum sobre la toxicidad inducida por el uranio en células renales humanas (HK-2). International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.