Células DU-145: guía completa para investigadores
DU-145 es una línea celular de carcinoma de próstata humano ampliamente utilizada en la investigación biomédica. Estas células constituyen un modelo inestimable para el estudio de la biología del cáncer de próstata, así como para la experimentación y el desarrollo de fármacos. Además, los investigadores también utilizan las células DU-145 para investigar los mecanismos moleculares que subyacen al desarrollo, el crecimiento y la progresión del cáncer de próstata.
- Medio de cultivo
- EMEM (medio mínimo esencial de Eagle) con suplementos, es decir, 10 % de suero fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ y EBSS. El medio se renueva de 2 a 3 veces por semana.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de la línea DU-145 oscila entre 30 y 40 horas.
- Tipo de crecimiento
- DU-145 es una línea celular adherente.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir DU-145
- Información general y origen de la línea celular DU-145
- Cultivo de células DU-145
- Línea celular DU-145: ventajas y limitaciones
- Aplicaciones de investigación de las células DU-145
- 5. Publicaciones de investigación sobre las células DU-145
- Recursos para la línea celular DU-145: protocolos, vídeos y más
- Preguntas frecuentes
Información general y origen de la línea celular DU-145
Es fundamental comprender los atributos fundamentales y el origen de una línea celular antes de empezar a trabajar con ella. Esta sección ofrece una visión completa de las características y el origen de la línea celular DU-145. Descubrirá: ¿Qué son las células cancerosas DU-145? ¿Cuál es la morfología de las células DU-145? ¿Cuál es la diferencia entre PC-3 y DU-145?
- La DU-145, una línea celular de cáncer de próstata humano, se derivó del cerebro de un hombre caucásico (de 69 años) con carcinoma de próstata metastásico. Estas células fueron depositadas por primera vez por K.R. Stone y sus colegas en 1978.
- Al igual que las células de cáncer de próstata PC-3, las DU-145 también expresan receptores de andrógenos. Sin embargo, cuando estas células se someten a un tratamiento con ligandos androgénicos, no muestran ninguna actividad de los genes que responden a los receptores de andrógenos, por lo que se consideran células andrógeno-independientes.
- Las células DU-145 poseen una morfología epitelial.
- Las células DU-145 son hipotriploides y tienen un número modal de cromosomas de 64. Presentan varios cromosomas marcadores, como del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) y del (9) (p11).
PC-3 frente a DU145
Ambas líneas celulares de cáncer de próstata son independientes del receptor de andrógenos. Se diferencian en cuanto a su potencial tumorigénico y metastásico. Cuando se inyecta en un ratón inmunodeprimido, la línea celular PC-3 forma un adenocarcinoma de grado IV altamente metastásico. Por el contrario, la línea celular DU-145 desarrolla un cáncer de próstata con un potencial metastásico moderado [1].
Cultivo de células DU-145
La línea celular DU-145 se utiliza ampliamente en los laboratorios de investigación del cáncer de próstata. Es importante conocer los siguientes puntos clave para facilitar un cultivo fácil y eficaz. En esta sección se incluye información sobre el medio de cultivo de las células DU-145, el tiempo de duplicación, las condiciones de cultivo celular y los protocolos.
Puntos clave para el cultivo de células DU-145
Tiempo de duplicación de la población:
El tiempo de duplicación de las DU-145 oscila entre 30 y 40 horas.
Adherentes o en suspensión:
DU-145 es una línea celular adherente.
Densidad de siembra:
Las células DU-145 se siembran a una densidad celular recomendada de 2 x 10⁴ células/cm². A esta densidad, las células forman una monocapa confluente en casi 4 días. Para la siembra, las células se lavan con solución salina tamponada con fosfato 1x y se incuban con la solución de pasaje Accutase. Tras 8 a 10 minutos de incubación a temperatura ambiente, se añaden medios de cultivo frescos a las células y se centrifugan. El sedimento celular recogido se resuspende cuidadosamente y las células se vierten en nuevos frascos de cultivo para su crecimiento.
Medio de crecimiento:
EMEM (medio mínimo esencial de Eagle) con suplementos del medio, es decir, 10 % de suero fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO3 y EBSS. El medio se renueva de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:
Los cultivos de DU-145 se mantienen en una incubadora humidificada a 37 °C con una fuente de CO₂ al 5 %.
Almacenamiento:
Las células DU-145 se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador eléctrico para mantener la viabilidad celular a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:
Se recomiendan los medios de congelación CM-1 o CM-ACF para las células de cáncer de próstata DU-145. Para congelar las células se opta por un método de congelación lenta que permite que la temperatura descienda gradualmente a razón de 1 °C. Esto evita que las células sufran un choque térmico y ayuda a mantener su viabilidad.
Proceso de descongelación:
Los viales de células DU-145 congeladas se descongelan rápidamente en un baño de agua a 37 °C durante 40 a 60 segundos. A continuación, se añaden medios de cultivo a las células y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. Las células obtenidas se resuspenden en un medio de crecimiento y se vierten en el matraz para su crecimiento. La recuperación tras la congelación dura casi 24 horas.
Nivel de bioseguridad:
Se requieren condiciones de nivel de bioseguridad 1 para cultivar la línea celular DU145 independiente del receptor de andrógenos.
Línea celular DU-145: ventajas y limitaciones
Al igual que otras líneas celulares, la línea celular de cáncer de próstata DU-145 presenta algunas ventajas e inconvenientes. Estas características pueden ayudarte a decidir su uso en tu investigación. A continuación se mencionan las principales ventajas e inconvenientes de las células DU-145.
Ventajas
Las ventajas de las células DU-145 son:
Tumorigenicidad
La DU-145 es una línea celular de cáncer de próstata tumorigénica y agresiva con un potencial metastásico moderado. Se utiliza para desarrollar el modelo de xenoinjerto DU-145 en ratones inmunodeprimidos con el fin de estudiar la biología, el desarrollo y el crecimiento del cáncer de próstata in vitro e in vivo.
Independencia del receptor de andrógenos
Las células de cáncer de próstata DU-145 son independientes del receptor de andrógenos. No dependen de los andrógenos para su crecimiento y no muestran respuesta a nivel celular y molecular cuando se tratan con andrógenos. Ideales para investigar los mecanismos del cáncer de próstata independiente de hormonas.
Limitaciones
Las limitaciones de la línea celular DU-145 son:
Modelo in vitro
DU-145 es un modelo celular in vitro de carcinoma de próstata metastásico, por lo que puede que no represente plenamente la complejidad de los tumores de próstata primarios. Además, puede que no sea representativo de todos los tipos y subtipos de cáncer de próstata debido a características específicas como la independencia del receptor de andrógenos.
Aplicaciones de investigación de las células DU-145
La línea celular de cáncer de próstata DU-145 tiene una amplia gama de aplicaciones de investigación. A continuación se enumeran algunas aplicaciones prometedoras.
- Biología del cáncer de próstata: DU-145 es un modelo relevante para estudiar la biología del cáncer de próstata. Los investigadores utilizan estas células para investigar los mecanismos moleculares que impulsan el desarrollo, la progresión y la metástasis del cáncer. Además, también se exploran las alteraciones genéticas comúnmente asociadas al cáncer de próstata. Una investigación llevada a cabo en 2021 examinó las células DU-145 para identificar posibles biomarcadores con implicaciones diagnósticas y terapéuticas eficaces. El estudio sugirió la actina gamma 1 (ACTG1) como posible biomarcador del cáncer de próstata, ya que promueve la proliferación de las células cancerosas y regula la metástasis a través de la activación de la vía MAPK/ERK [2].
- Cribado y desarrollo de fármacos: Las células de cáncer de próstata DU-145 se utilizan ampliamente para evaluar la citotoxicidad y la eficacia de posibles fármacos anticancerígenos. Esto ayuda a los investigadores a identificar nuevos fármacos, comprender la resistencia a los medicamentos y los mecanismos moleculares subyacentes. Un estudio realizado en 2022 exploró el efecto citotóxico de una mezcla resinosa, el propóleo o pegamento de abeja, en las líneas celulares de cáncer de próstata PC-3 y DU-145. El estudio demostró los efectos inhibidores del crecimiento de esta sustancia natural en ambas líneas celulares y propuso su potencial anticancerígeno [3]. En 2019 se llevó a cabo otro estudio que investigó los efectos antiproliferativos de un compuesto natural, la betaína, en las células de cáncer de próstata DU-145. La investigación demostró que la betaína ejerce actividades antiproliferativas al aumentar la muerte celular mediada por el estrés oxidativo y la inflamación en las células DU-145 [4].
5. Publicaciones de investigación sobre las células DU-145
A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación sobre la línea celular DU-145.
Este estudio, publicado en Biological Trace Element Research en 2020, propuso que el sulfato de zinc (ZnSO₄) ejerce efectos antiproliferativos en las células DU-145 mediante la inducción de apoptosis, cambios morfológicos, daño oxidativo e inflamación.
Este artículo de investigación se publicó en BMC Complementary Medicine and Therapies en 2020. Este estudio exploró el potencial citotóxico y antimetastásico de una planta, el extracto de corteza de Annona muricata L., y su fitoquímico bioactivo, la annonacina, en la línea celular DU-145.
Esta publicación en IUBMB Life (2019) propuso que la interacción del ARN largo no codificante LOXL1-AS1 con miR-let-7a-5p y la vía del EGFR regula la resistencia a la doxorrubicina en las células de cáncer de próstata DU-145.
Este artículo publicado en Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) afirmaba que la regulación a la baja del gen del receptor del dominio discoidina 1 (DDR1) provoca la muerte de las células DU-145 e inhibe la transición epitelial a mesenquimal (EMT) mediante la activación de la vía Pyk2/MKK7.
Este estudio publicado en el Journal of Food Biochemistry (2019) propuso que la casticina, una polimetoxiflavona, inhibe la migración y la invasión de las células DU-145 mediante la regulación de la señalización Ras/Akt/NF-κB.
Recursos para la línea celular DU-145: protocolos, vídeos y más
Existen muchos recursos en línea sobre la línea celular de cáncer de próstata DU-145. En esta sección se mencionan algunos recursos que explican el manejo, el mantenimiento y el protocolo de transfección de estas células:
- Transfección de DU-145: este tutorial en vídeo es una guía paso a paso para aprender el protocolo de transfección de células DU-145.
El protocolo de cultivo celular de DU-145 se menciona aquí.
- Subcultivo de DU-145: este enlace le ayudará a aprender el protocolo para el subcultivo de células DU-145.
- Células DU-145: este sitio web contiene mucha información útil sobre la línea celular DU-145, incluyendo el medio DU-145, el protocolo para el subcultivo y el manejo de cultivos proliferativos y criopreservados.
Referencias
- Lima, A.R., et al., Discriminación entre el exometaboloma de células prostáticas humanas normales y cancerosas mediante GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., El silenciamiento de la expresión de ACTG1 induce la transición epitelial-mesenquimal del cáncer de próstata a través de la vía de señalización MAPK/ERK. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Efectos anticancerígenos de los extractos de propóleos obtenidos mediante el método de separación en frío sobre las líneas celulares de cáncer de próstata PC-3 y DU-145. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., La betaína inhibe la proliferación celular al aumentar la apoptosis mediada por el estrés oxidativo y la inflamación en la línea celular de cáncer de próstata humano DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.