Células DU-145 - Guía completa para el investigador
DU-145 es una línea celular de carcinoma de próstata humano ampliamente aplicada en la investigación biomédica. Estas células son un modelo inestimable para el estudio de la biología del cáncer de próstata, el ensayo y el desarrollo de fármacos. Además, los investigadores también emplean las células DU-145 para investigar los mecanismos moleculares que subyacen al desarrollo, crecimiento y progresión del cáncer de próstata.
Este artículo le proporcionará información valiosa sobre las células DU-145 de cáncer de próstata. En particular, cubrirá:
- Información general y origen de la línea celular DU-145
- Cultivo de células DU-145
- Línea celular DU-145: Ventajas y limitaciones
- Aplicaciones de investigación de las células DU-145
- Publicaciones de investigación con células DU-145
- Recursos para la línea celular DU-145: Protocolos, vídeos y más
1. Información general y origen de la línea celular DU-145
Comprender los atributos fundamentales y el origen de una línea celular es esencial antes de empezar a trabajar con ella. Esta sección le proporcionará una comprensión exhaustiva de las características y el origen de la línea celular DU-145. Conocerá: ¿Qué son las células cancerosas DU145? ¿Cuál es la morfología de las células DU145? ¿Cuál es la diferencia entre PC-3 y DU145?
- DU-145, una línea celular de cáncer de próstata humano, se derivó del cerebro de un hombre caucásico (69 años) con carcinoma de próstata metastásico. Estas células fueron depositadas por primera vez por K.R. Stone y sus colegas en 1978.
- Al igual que las células de cáncer de próstata PC-3, las DU-145 también expresan receptores androgénicos. Sin embargo, cuando estas células se someten a un tratamiento con ligando androgénico, no muestran ninguna actividad de los genes que responden a los receptores androgénicos, por lo que se consideran células independientes de andrógenos.
- Las células DU-145 poseen una morfología epitelial.
- Las células DU-145 son hipotriploides y tienen un número cromosómico modal de 64. Presentan varios cromosomas marcadores. Presentan varios cromosomas marcadores, como del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) y del (9) (p11).
PC-3 frente a DU145
Ambas líneas celulares de cáncer de próstata son independientes del receptor androgénico. Se diferencian por su potencial tumorigénico y metastásico. Cuando se inyecta en un ratón inmunodeprimido, la línea celular PC-3 forma un adenocarcinoma de grado IV altamente metastásico. En cambio, la línea celular DU-145 desarrolla un cáncer de próstata con un potencial metastásico moderado [1].
2. cultivo de células DU-145
La línea celular DU-145 se utiliza ampliamente en los laboratorios de investigación del cáncer de próstata. Debe conocer los siguientes puntos clave para facilitar su cultivo fácil y eficiente. Esta sección incluirá información sobre el medio DU145, el tiempo de duplicación, las condiciones de cultivo celular y los protocolos.
Puntos clave para el cultivo de células DU-145
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Tiempo de duplicación de la población: |
El tiempo de duplicación de DU-145 oscila entre 30 y 40 horas. |
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Adherente o en suspensión: |
DU-145 es una línea celular adherente. |
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Densidad de siembra: |
Las células DU-145 se siembran a una densidad celular recomendada de 2 x104 células/cm2. A esta densidad, las células producen una monocapa confluente en casi 4 días. Para la siembra, las células se lavan con 1 x tampón fosfato salino y se incuban con la solución de pasaje, Accutase. Tras 8 a 10 minutos de incubación a temperatura ambiente, se añaden células con medio de cultivo fresco y se centrifugan. El sedimento celular recogido se resuspende cuidadosamente y las células se vierten en nuevos frascos de cultivo para su crecimiento. |
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Medio de cultivo: |
EMEM (Medio Esencial Mínimo de Eagle) con suplementos de medio, es decir, 10% de Suero Fetal Bovino (FBS), 2 mM de L-Glutamina, 2,2 g/L de NaHCO3 y EBSS. El medio se renueva de 2 a 3 veces por semana. |
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Condiciones de crecimiento: |
Los cultivos de DU-145 se mantienen en una incubadora humidificada a 37°C con una fuente de CO2 al 5%. |
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Almacenamiento: |
Las células DU-145 se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150°C en un congelador eléctrico para mantener la viabilidad celular durante más tiempo. |
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Proceso y medio de congelación: |
Para las células de cáncer de próstata DU-145 se recomiendan los medios de congelación CM-1 o CM-ACF. Para congelar las células se opta por un método de congelación lento que permite que la temperatura descienda gradualmente 1 °C. Esto evita que las células sufran un shock y ayuda a mantener su viabilidad. |
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Proceso de descongelación: |
Los viales congelados de células DU-145 se descongelan rápidamente en un baño de agua a 37 °C durante 40 a 60 segundos. Después, se añaden las células con los medios de cultivo y se centrifugan para eliminar los componentes de los medios de congelación. Las células recogidas se resuspenden en un medio de cultivo y se vierten en el matraz para su crecimiento. La recuperación de la congelación tarda casi 24 horas. |
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Nivel de bioseguridad: |
Se requieren ajustes de nivel de bioseguridad 1 para cultivar la línea celular DU145 independiente del receptor de andrógenos. |
3. línea celular DU-145: Ventajas y limitaciones
Al igual que otras líneas celulares, la línea celular de cáncer de próstata DU-145 se asocia con algunas ventajas y desventajas. Estos atributos pueden ayudarle a decidir su uso en su investigación. A continuación se mencionan las principales ventajas e inconvenientes de las células DU-145.
Ventajas
Las ventajas de las células DU-145 son
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Tumorigenicidad |
DU-145 es una línea celular de cáncer de próstata tumorigénica agresiva con un potencial metastásico moderado. Se utiliza para desarrollar el modelo de xenoinjerto DU145 en ratones inmunocomprometidos para estudiar la biología, el desarrollo y el crecimiento del cáncer de próstata in vitro e in vivo. |
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Independencia del receptor de andrógenos |
Las células de cáncer de próstata DU-145 son independientes del receptor androgénico. No dependen de los andrógenos para crecer y no muestran respuesta a nivel celular y molecular cuando se tratan con andrógenos. Ideal para investigar los mecanismos del cáncer de próstata hormono-independiente. |
Limitaciones
Las limitaciones de la línea celular DU-145 son:
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Modelo in vitro |
DU-145 es un modelo celular in vitro de carcinoma de próstata metastásico, por lo que puede no representar totalmente la complejidad de los tumores de próstata primarios. Además, puede no implicar todos los tipos y subtipos de cáncer de próstata debido a características específicas como la independencia del receptor de andrógenos. |
4. aplicaciones de las células DU-145 en investigación
La línea celular DU-145 de cáncer de próstata tiene una amplia gama de aplicaciones en investigación. A continuación se enumeran algunas aplicaciones prometedoras.
- Biología del cáncer de próstata: DU-145 es un modelo relevante para estudiar la biología del cáncer de próstata. Los investigadores emplean estas células para estudiar los mecanismos moleculares que impulsan el desarrollo, la progresión y la metástasis del cáncer. Además, también se exploran las alteraciones genéticas comúnmente asociadas al cáncer de próstata. Una investigación realizada en 2021 examinó las células DU-145 para identificar posibles biomarcadores con implicaciones diagnósticas y terapéuticas eficaces. El estudio sugirió la actina gamma 1 (ACTG1) como posible biomarcador del cáncer de próstata, ya que promueve la proliferación de las células cancerosas y regula la metástasis a través de la activación de la vía MAPK/ERK [2].
- Cribado y desarrollo de fármacos: Las células DU-145 de cáncer de próstata se utilizan ampliamente para probar la citotoxicidad y eficacia de posibles fármacos contra el cáncer. Esto ayuda a los investigadores a identificar nuevos fármacos, comprender la resistencia a los medicamentos y los mecanismos moleculares subyacentes. Un estudio realizado en 2022 exploró el efecto citotóxico de una mezcla resinosa, el propóleo o cola de abeja, en las líneas celulares de cáncer de próstata PC-3 y DU-145. El estudio mostró efectos inhibidores del crecimiento de esta sustancia natural en ambas líneas celulares y propuso su potencial anticancerígeno [3]. En 2019 se llevó a cabo otro estudio que investigó los efectos antiproliferativos de un compuesto natural, la betaína, en células de cáncer de próstata DU-145. La investigación demostró que la betaína ejerce actividades antiproliferativas al elevar la muerte celular mediada por el estrés oxidativo y la inflamación en las células DU-145 [4].
5.publicaciones de investigación con células DU-145
Las siguientes son algunas publicaciones de investigación sobre la línea celular DU-145.
Este estudio publicado en Biological Trace Element Research, 2020, propuso que el sulfato de zinc (ZnSo4) ejerce efectos antiproliferativos en las células DU-145 mediante la inducción de apoptosis, cambios morfológicos, daño oxidativo e inflamación.
Este artículo de investigación se publicó en BMC Complementary Medicine and Therapies en 2020. Este estudio exploró el potencial citotóxico y antimetastásico de una planta, Annona muricata L. extracto de corteza, y su bioactivo annonacin en la línea celular DU-145.
Esta publicación en IUBMB Life (2019) propuso que la interacción del ARN no codificante largo LOXL1-AS1 con miR-let-7a-5p y la vía del EGFR regulan la resistencia a la doxorrubicina en células de cáncer de próstata DU-145.
Este artículo publicado en Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) afirma que la regulación a la baja del gen Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) causa la muerte de las células DU-145 e inhibe la transición epitelial a mesenquimal (EMT) a través de la activación de la vía Pyk2/MKK7.
Este estudio en el Journal of Food Biochemistry (2019) propuso que Casticin, una polimetoxiflavona, inhibe la migración y la invasión de las células DU-145 mediante la regulación de la señalización Ras/Akt/NF-κB.
6. recursos para la línea celular DU-145: Protocolos, vídeos y más
Existen muchos recursos en línea sobre la línea celular DU-145 de cáncer de próstata. En esta sección se mencionan algunos recursos que explican la manipulación, el mantenimiento y el protocolo de transfección de estas células:
- Transfección de DU-145: Este video tutorial es una guía paso a paso para aprender el protocolo de transfección de células DU-145.
Aquí se menciona el protocolo de cultivo de células DU-145.
- Subcultivo de DU-145: Este enlace le ayudará a aprender el protocolo de subcultivo o subcultivo de células DU-145.
- Células DU-145: Este sitio web contiene mucha información útil sobre la línea celular DU-145, incluyendo el medio DU145, el protocolo para el subcultivo y el manejo de cultivos proliferativos y criopreservados.
Referencias
- Lima, A.R., et al., Discriminación entre el exometaboloma de las células normales y cancerosas de la próstata humana mediante GC-MS. Informes científicos, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., El silenciamiento de la expresión de ACTG1 induce la transición epitelial mesenquimal del cáncer de próstata a través de la vía de señalización MAPK/ERK. ADN y Biología Celular, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., Betaine suppresses cell proliferation by increasing oxidative stress-mediated apoptosis and inflammation in DU-145 human prostate cancer cell line. Estrés celular y chaperonas, 2019. 24: p. 871-881.