Células DLD-1: Aplicaciones y conocimientos de las células DLD-1 en la investigación del cáncer colorrectal
DLD-1 es una línea celular de carcinoma colorrectal humano empleada habitualmente en la investigación del cáncer. Es una herramienta valiosa para investigar diversos aspectos del cáncer de colon, como el desarrollo tumoral, la progresión, los mecanismos moleculares subyacentes y la respuesta a agentes terapéuticos. Así pues, DLD-1 destaca en la comprensión de la enfermedad y el desarrollo de posibles estrategias de tratamiento.
Este artículo proporcionará información importante sobre la línea celular DLD-1 que debe conocer antes de trabajar con ella. Abarcará:
- Características generales y origen de las células DLD-1
- Información sobre el cultivo de la línea celular DLD-1
- Línea celular DLD-1: Ventajas y limitaciones
- Aplicaciones de investigación de la línea celular DLD-1
- Publicaciones de investigación sobre las células DLD-1
- Recursos para la línea celular DLD-1: Protocolos, vídeos y más
1. Características generales y origen de las células DLD-1
Antes de trabajar con una línea celular, la primera consideración de un investigador es su origen y sus atributos generales. Esta sección del artículo es una introducción detallada a la línea celular DLD-1. Abarcará las siguientes preguntas frecuentes: ¿Qué son las células DLD-1? ¿Qué es una línea celular de cáncer DLD-1? ¿Cuáles son las mutaciones de la línea celular DLD-1? ¿Cuál es el tamaño de una célula DLD-1? ¿Cuál es la morfología de las células DLD-1?
- DLD-1, una línea celular de cáncer de colon, se originó a partir del intestino grueso de un paciente varón de 67 años con adenocarcinoma colorrectal. Fue aislada por D.L. Dexter y sus colegas entre 1977 y 1979. Esta línea celular comparte el mismo origen con las líneas celulares HCT-8, HCT-15 y HRT-18.
- Al igual que los cánceres colorrectales, las células DLD-1 poseen un fenotipo de inestabilidad de microsatélites [1].
- Las mutaciones de DLD-1 incluyen KRAS, P53, BRAF, BRCA1 y BRCA2. Debido al estatus DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2, y DLD-1 mutación KRAS, estas células se consideran ideales para estudios de cáncer.
- Estas células poseen una morfología de tipo epitelial.
- El tamaño de la línea celular DLD-1 es de aproximadamente 15 µm.
- La línea celular de cáncer colorrectal humano DLD-1 posee un cariotipo pseudodiploide. Alrededor del 86% de las células poseen un número cromosómico modal de 46. Sin embargo, también puede existir poliploidía en el 17,1% de la población celular.
2.información sobre el cultivo de la línea celular DLD-1
Antes de cultivar cualquier línea celular, debe conocer sus requisitos básicos de cultivo celular. Esta sección resaltará los puntos importantes que debe aprender antes de comenzar a trabajar con la línea celular DLD-1. Esto incluye: ¿Qué es el tiempo de duplicación de DLD-1? ¿Cuál es el medio de cultivo de DLD-1? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células DLD-1? ¿Cómo se cultivan las células DLD-1?
Puntos clave para el cultivo de células DLD-1
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Tiempo de duplicación: |
El tiempo de duplicación de las células DLD-1 es de aproximadamente 15 horas. |
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Adherentes o en suspensión: |
La DLD-1 es una línea celular de cáncer de colon humano adherente. Las células crecen en monocapas. |
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Densidad de siembra: |
Las células DLD-1 se siembran a una densidad de 1 a 2 x104 células/cm2. Las células adherentes se lavan con 1x tampón fosfato salino (PBS) y se incuban con solución de pasaje (Accutase) a temperatura ambiente. Tras una incubación de 8 a 10 minutos, las células desprendidas se añaden al medio de cultivo y se centrifugan. A continuación, el sedimento celular se resuspende cuidadosamente y las células se vierten en nuevos recipientes de cultivo que contienen medio de crecimiento. |
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Medio de crecimiento: |
Para el cultivo de células DLD-1 se utiliza RPMI 1640 con suplementos de medio, incluyendo 10% de suero bovino fetal FBS, 2,1 mM de Glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO3. El medio debe sustituirse 2-3 veces por semana. |
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Condiciones de crecimiento: |
Los cultivos de DLD-1 se mantienen en una incubadora humidificada a 37°C con un suministro de CO2 al 5%. |
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Almacenamiento: |
Las células DLD-1 se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja (a menos de -150°C de temperatura). |
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Proceso y medio de congelación: |
Para congelar las células DLD-1 pueden utilizarse los medios de congelación CM-1 o CM-ACF. Se recomienda siempre un proceso de congelación lento, que permita una disminución gradual de 1°C de la temperatura, evitando así el choque de las células y protegiendo su viabilidad. |
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Proceso de descongelación: |
Las células congeladas se descongelan en un baño de agua preajustado a 37 °C de temperatura durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño grumo de hielo. Después, las células se añaden a un medio fresco y se centrifugan. Este paso es necesario para eliminar de las células los componentes del medio de congelación. Las células recogidas se resuspenden en un medio de crecimiento y se dispensan en el matraz para su crecimiento. |
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Nivel de bioseguridad: |
La línea celular DLD-1 se mantiene en los laboratorios de bioseguridad de nivel 1. |
3.línea celular DLD-1: Ventajas y limitaciones
En esta sección del artículo, revisaremos las ventajas y limitaciones de la línea celular de cáncer de colon DLD-1.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular DLD-1 son:
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Modelo de cáncer colorrectal |
Las células DLD-1 poseen mutaciones comúnmente encontradas en pacientes con cáncer colorrectal, como la mutación KRAS DLD-1, BRCA DLD-1 y BRCA2 DLD-1. Esta relevancia las convierte en un modelo celular clínicamente apropiado para el estudio de esta enfermedad. |
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Línea celular tumorigénica |
Las células DLD-1 son tumorigénicas. Pueden causar tumores cuando se inyectan en ratones desnudos. Por lo tanto, los investigadores emplean estas células para desarrollar modelos tumorales de xenoinjerto que ayudan a investigar la formación, el desarrollo y la progresión de tumores in vivo. |
Limitaciones
Las limitaciones asociadas a las células DLD-1 son:
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Heterogeneidad |
Las poblaciones de células de cáncer de colon DLD-1 presentan heterogeneidad genética y fenotípica. Esto puede influir en la generalizabilidad de los resultados de la investigación. |
4.aplicaciones de la línea celular DLD-1 en investigación
La línea celular DLD-1 ofrece una amplia gama de aplicaciones en la investigación del cáncer. En esta sección se comentan algunas aplicaciones destacadas.
- Estudio del cáncer: Las células DLD-1 constituyen un valioso modelo in vitro para comprender los mecanismos moleculares que subyacen al crecimiento, desarrollo y progresión del cáncer colorrectal. Además, se utilizan para estudiar la expresión génica, las vías de señalización y la influencia de mutaciones genéticas específicas en el comportamiento de las células cancerosas. Una investigación realizada en 2022 observó que la cascada de señalización PI3K/Akt/YAP regula la migración y la invasión de la línea celular de cáncer colorrectal DLD-1 [2].
- Desarrollo de fármacos: Los investigadores emplean la línea celular DLD-1 para probar la eficacia de fármacos anticancerígenos y evaluar su potencial para el tratamiento del cáncer de colon. Esto ayuda al desarrollo de fármacos y a combatir eficazmente la enfermedad. Un estudio realizado en 2022 utilizó la línea celular de cáncer DLD-1 y exploró la actividad anticancerígena de las ftalocianinas de silicio, compuestos sintetizados químicamente. Los resultados del estudio sugirieron que estos compuestos eran potentes agentes anticancerígenos [3]. Curiosamente, otra investigación descubrió el potencial anticancerígeno de una proteína P8 derivada de probióticos utilizando células DLD-1 [4].
5.publicaciones de investigación sobre las células DLD-1
En esta sección se destacan algunas publicaciones interesantes y citadas con frecuencia sobre la línea celular de carcinoma de colon DLD-1.
Esta publicación aparece en el Journal of Biologically Active Products de Nature (2022). El estudio descubrió que la diosmina, un flavonoide, inducía la muerte celular en las células DLD-1 y también provocaba la detención del ciclo celular; por tanto, puede ser un potencial agente anticancerígeno.
La bromelaína suprime eficazmente el cáncer colorrectal con mutación Kras estimulando la ferroptosis
Este estudio en Animal Cells and Systems (2018) propuso que la bromelina, una enzima, reprime la mutación KRAS de DLD-1 y ejerce potentes efectos citotóxicos.
Este artículo de investigación se publicó en 2019 en la revista "Environmental Toxicology". El estudio exploró los efectos antitumorales de un compuesto natural, Bergapten, utilizando una línea celular corectal DLD-1.
Este estudio publicado en el Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) descubrió que los nanocompuestos de curcumina/óxido de hierro son muy eficaces contra las células de cáncer colorrectal DLD-1.
Este artículo de investigación se publicó en 2020 en la revista Turkish Journal of Biology. El estudio propuso que un producto natural, la activación de AKT mediada por epibrassinolide en células DLD-1, estimula la autofagia relacionada con las poliaminas.
6.recursos para la línea celular DLD-1: Protocolos, vídeos y más
Los siguientes son algunos recursos sobre las células DLD-1:
- Transfección DLD-1: Este video tutorial es una guía completa sobre el protocolo de transfección in vitro de DLD-1.
- Células DLD-1: Este artículo de investigación describe brevemente los requisitos para el cultivo de células DLD-1, incluidos los medios y las condiciones de cultivo. Además, puede ayudarle a conocer el protocolo de transfección utilizado para las células DLD-1.
Los siguientes enlaces contienen el protocolo de cultivo de las células DLD-1, derivadas del cáncer de colon humano.
- Línea celular DLD-1: Este sitio web le proporcionará información básica sobre la línea celular DLD-1. Le ayudará a aprender diferentes protocolos de cultivo de células DLD-1, incluyendo el subcultivo y la manipulación de cultivos criopreservados y en proliferación.
Referencias
- Gavrilas, L.I., et al., Genes proapoptóticos como nuevas dianas para tratamientos únicos y combinatorios con resveratrol y curcumina en cáncer colorrectal. Alimentos y función, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., La señalización PI3K/Akt/YAP promueve la migración y la invasión delas células de cáncer colorrectal DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1). Nueva Revista de Química, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1 (Funciones anticancerígenas de la proteína P8 derivada de probióticos en la línea celular de cáncer colorrectal DLD-1 ) . Revista Internacional de Ciencias Moleculares, 2023. 24(12): p. 9857.