Línea celular BEWO

BeWo es una línea celular humana derivada de coriocarcinoma ampliamente utilizada en la investigación biomédica. Sirve de valioso modelo in vitro para explorar el intrincado proceso del desarrollo placentario y la sincitialización de los trofoblastos humanos. Los investigadores también emplean estas células para estudiar el comportamiento celular de los trofoblastos, la producción de hormonas y el transporte de sustancias a través de la placenta. Además, las células BeWo también ofrecen aplicaciones en toxicología, infección y estudios de transmisión de enfermedades.

Este artículo abarca conocimientos fundamentales sobre las células BeWo que pueden ayudarle a tratarlas en su investigación. Incluirá:

  1. Características generales y origen de las células BeWo
  2. Línea celular BeWo: Información sobre el cultivo
  3. Ventajas e inconvenientes de la línea celular BeWo
  4. Aplicaciones de las células BeWo en la investigación
  5. Publicaciones de investigación con células BeWo
  6. Recursos para la línea celular BeWo: Protocolos, vídeos y más

1. Características generales y origen de las células BeWo

Conocer previamente el origen y las características generales de una línea celular es crucial para utilizarla en su investigación. Esta parte del artículo explora el origen de la línea celular BeWo, sus rasgos característicos y mucho más. Aquí aprenderá: ¿Qué es la línea celular de coriocarcinoma BeWo? ¿Qué es la sincitialización de BeWo? ¿De dónde proceden las células BeWo? ¿Cuál es la morfología de las células BeWo? ¿Cuál es la ploidía de BeWo?

  • La línea celular placentaria, BeWo, se originó a partir del coriocarcinoma gestacional maligno de una placenta fetal masculina en 1968 [1]. Por ello, constituye un modelo inestimable para la investigación placentaria.
  • Las células BeWo presentan una morfología similar a la epitelial.
  • Las células BeWo son relativamente pequeñas, de entre 20 y 30 µM [2].
  • Las células BeWo presentan un cariotipo estable. Su número de cromosomas madre es hipo-tetraploide. El número modal de cromosomas de las células BeWo es 86. Puede variar de 71 a 178.
  • Las células BeWo producen varias hormonas: somatomammotropina coriónica humana, gonadotropina coriónica humana (hCG) y hormonas esteroideas.
  • Las células BeWo expresan marcadores moleculares, como CK 7, cadherina E y cadherina VE.

Sublínea B30

B30 es la sublínea de células BeWo. Se utiliza para investigar la captación y el transporte de nutrientes. Esto se atribuye a su vigoroso crecimiento en membranas porosas.

BeWo y JEG-3

Las líneas celulares BeWo JEG-3 derivan de coriocarcinomas y se utilizan en la investigación de la placenta. Las células BeWo producen hormonas a niveles más bajos que las JEG-3, como la gonadotropina coriónica humana (hCG) y el estradiol.

Visualización time-lapse de la fertilidad del óvulo humano, que ilustra las etapas de formación del blastocisto, observadas al microscopio.

2. Línea celular BeWo: Información sobre el cultivo

Mantener un cultivo celular puede ser complicado si no se conocen los detalles clave. Por ejemplo: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de BeWo? ¿Qué es el medio celular BeWo? ¿Cómo se cultiva la línea celular BeWo? y ¿Cómo se congelan las células BeWo?

Puntos clave para el cultivo de células BeWo

Tiempo de duplicación:

El tiempo de duplicación de la población de células BeWo es de aproximadamente 30 horas.

Adherentes o en suspensión:

BeWo es una línea celular adherente.

Densidad de siembra celular:

La densidad de siembra recomendada para las células BeWo es de 1 x104 células/cm2. Para la siembra, se retira el medio antiguo de las células y se enjuagan con 1 x PBS. A continuación, se añade Accutase (solución de pasaje) y se incuban las células de 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se añaden las células desprendidas con medio de cultivo y se centrifugan. Las células cosechadas se resuspenden y se vierten en un nuevo matraz.

Medio de cultivo:

Para cultivar células BeWo se utiliza un medio F12K de Ham que contiene un 10% de FBS, 2,0 mM de L-glutamina, 2,0 mM de piruvato sódico y 2,5 g/L de NaHCO3. El medio de cultivo de las células BeWo debe sustituirse de 2 a 3 veces por semana.

Condiciones de crecimiento:

Las células BeWo se mantienen en una incubadora humidificada a 37 grados Celsius y con un 5% de CO2.

Almacenamiento:

Las células BeWo congeladas se almacenan a menos de -150°C en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja o en la fase de vapor de nitrógeno líquido.

Proceso y medio de congelación:

Se recomienda congelar las células BeWo en medio de congelación CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan utilizando un método de congelación lenta. Este método sólo permite un descenso de la temperatura de 1 grado por minuto, evitando así que las células sufran un choque y protegiendo su viabilidad.

Proceso de descongelación:

Las células congeladas se descongelan sumergiéndolas en un baño de agua a 37°C durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño grumo de hielo. A continuación, se añade medio de crecimiento fresco y se centrifugan las células para eliminar los componentes del medio de congelación. El sedimento celular recogido se resuspende y se dispensa en un matraz de cultivo para su crecimiento.

Nivel de bioseguridad:

Es necesario un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manipular y mantener los cultivos celulares de BeWo.

Captura de la morfología epitelial, poligonal y de crecimiento en forma de islote de la línea celular de coriocarcinoma humano, BEWO, mediante aumentos de 10x y 20x en el microscopio.

3. Ventajas y desventajas de la línea celular BeWo

Las células BeWo presentan características únicas y tienen ventajas e inconvenientes específicos. En esta sección exploraremos algunas de las más destacadas.

Ventajas

Las principales ventajas de la línea celular de coriocarcinoma BeWo son:

  • Modelo celular in vitro de placenta

    Las células BeWo proporcionan un modelo in vitro para estudiar el comportamiento de las células trofoblásticas y la sincitialización placentaria, reproduciendo procesos difíciles de observar in vivo.

  • Producción de hormonas

    Las células BeWo secretan hormonas, como la hCG y el lactógeno placentario, lo que las hace valiosas para estudios de regulación hormonal e investigación en biología reproductiva.

Desventajas

Las desventajas de las células trofoblásticas BeWo son:

  • Línea celular cancerosa

    Las células BeWo se derivaron de un coriocarcinoma, que es un tumor placentario. Es posible que este origen no represente totalmente la función normal de las células placentarias.

4. Aplicaciones de las células BeWo en la investigación

La línea celular BeWo se utiliza ampliamente en la investigación placentaria. A continuación se mencionan algunas aplicaciones específicas de esta línea celular:

  • Investigación sobre la placenta y el embarazo: Las células BeWo son fundamentales en la investigación relacionada con la placenta y el embarazo. Por ejemplo, los investigadores utilizan estas células para estudiar el transporte de sustancias, como fármacos, nutrientes y toxinas, a través de la barrera placentaria. Además, también investigan la producción y regulación de hormonas, como la gonadotropina coriónica humana (hCG), el lactógeno placentario y las hormonas esteroideas. Esto es importante para comprender los cambios hormonales durante el embarazo. La investigación realizada en 2018 investigó el efecto de los retardantes de llama bromados (BFR) en la actividad de la sulfotransferasa en la línea celular trofoblástica humana (BeWo). Esta enzima está implicada en la regulación de los niveles intracelulares de la hormona tiroidea [3].
  • Investigación de infecciones y enfermedades: Las células BeWo también se emplean para examinar la interacción entre patógenos y células placentarias. Esta investigación es valiosa para comprender las enfermedades que pueden transmitirse de la madre al feto y para desarrollar estrategias de protección de la salud fetal. Además, esta línea celular ayuda a los investigadores a estudiar complicaciones que surgen durante el embarazo, como la preeclampsia. Por ejemplo, un estudio realizado por Michalina Bralewska en 2023 utilizó el modelo celular de trofoblasto BeWo y descubrió que tanto la cromogranina A (CgA) como el péptido derivado de ella, la catestatina (CST), pueden desempeñar funciones en el intrincado proceso de patogénesis de la preeclampsia (PE) [4]. Más adelante, otro estudio exploró el potencial anticancerígeno de la tricosantina utilizando la línea celular de coriocarcinoma BeWo. La investigación también hizo un esfuerzo adicional para descubrir biomarcadores realizando análisis proteómicos comparativos antes y después del experimento [5].

5. Publicaciones de investigación sobre las células BeWo

Estas son algunas de las publicaciones de investigación más importantes sobre las células trofoblásticas BeWo.

La señalización AMPK regula la mitofagia y la producción de ATP mitocondrial en la línea celular de trofoblastos humanos BeWo

Este estudio publicado en Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) propuso que la señalización AMPK activa la mitofagia en las células trofoblásticas BeWo a través de las vías de mitofagia facilitadas por FUNDC1 y PRKN. Como resultado, la mitofagia ayuda a mantener la producción de ATP y el potencial de membrana mitocondrial.

El etilparabeno induce la muerte celular apoptótica en células BeWo de placenta humana a través de la vía de la Caspasa-3

Este artículo se publicó en Animal Cells and Systems (2020). El estudio propone que el etilparabeno media en la apoptosis de las células BeWo a través de la regulación de la vía de la caspasa 3.

Caracterización del potencial de disposición de xenobióticos y esteroides de líneas celulares y tejidos placentarios humanos (BeWo, JEG-3, JAR y HTR-8/SVneo) mediante proteómica cuantitativa

Este estudio de la revista Drug Metabolism and Disposition (2023) utilizó líneas celulares placentarias, incluidas BeWo, JAR, JEG-3 y HTR-8/SVneo, para investigar la deposición de xenobióticos y esteroides en las células.

Apelina y receptor de apelina en placenta humana: Expresión, vía de señalización y regulación de la proliferación y el ciclo celular de las células trofoblásticas JEG-3 y BeWo

Este artículo de investigación del International Journal of Molecular Medicine (2020) propuso que la apelina, ligando del receptor APJ, promueve la proliferación de las células BeWo a través de la señalización de APJ y ERK1/2, stat3 y AMPK. Por lo tanto, podría ser una adipocina esencial que regula el desarrollo de la placenta.

Medicamentos anticonvulsivos y nutrientes fetales: efectos sobre los transportadores de colina en una línea celular placentaria humana

Este estudio publicado en Epilepsia (2021) exploró los efectos de los nutrientes fetales y los anticonvulsivos sobre los transportadores de colina en la línea celular trofoblástica de origen humano, BeWo.

6. Recursos para la línea celular BeWo: Protocolos, vídeos y más

He aquí algunos recursos en línea disponibles sobre las células BeWo:

  • Transfección in vitro: Este vídeo le ayudará a aprender el protocolo de transfección in vitro de ADN plasmídico para células adherentes.

El siguiente enlace contiene información sobre el cultivo de células BeWo:

  • Células BeWo: Este sitio web contiene información esencial sobre el cultivo celular de la línea celular BeWo. Incluye información sobre los medios celulares y las condiciones de cultivo. También contiene protocolos de subcultivo y manipulación de cultivos criopreservados y proliferativos.

Referencias

  1. Weber, M., et al., Citogenómica de seis líneas celulares trofoblásticas humanas. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., Características de los trofoblastos en cultivo a largo plazo. Boletín de biología y medicina experimental, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt, y H.M. Stapleton, Alteración de la actividad de la hormona tiroidea sulfotransferasa por productos químicos retardantes de llama bromados en la línea celular de placenta de coriocarcinoma humano, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. Revista Internacional de Ciencias Moleculares, 2023. 24(8): p. 7124.
  5. Hu, Y., et al., Comparative proteomic analysis of drug trichosanthin addition to BeWo cell line. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.

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