Células B16: guía básica sobre las células de melanoma B16 en la investigación oncológica
B16 es una línea celular de cáncer de piel (melanoma) de origen murino. Esta línea celular constituye un modelo in vitro eficaz para el estudio de los cánceres de piel humanos. Se utiliza con frecuencia para investigar la formación de tumores sólidos y la metástasis de las células cancerosas.
- Medio de cultivo
- Las células B16 se cultivan en medio EMEM (medio mínimo esencial de Eagle) que contiene un 10 % de suero fetal bovino (FBS). El medio de crecimiento debe renovarse 2-3 veces a la semana.
- Tiempo de duplicación
- Se estima que el tiempo medio de duplicación de la población de las células B16 es de 24 horas.
- Tipo de crecimiento
- Las células B16 son adherentes y crecen en monocapas.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir B16
Este artículo le ayudará a comprender los conceptos básicos de la línea celular de melanoma B16. En concreto, tratará los siguientes temas:
- Características generales y origen de la línea celular B16
- Información sobre el cultivo de la línea celular B16
- Línea celular B16: ventajas y desventajas
- Aplicaciones de las células B16
- 5. Publicaciones de investigación sobre las células B16
- Recursos para la línea celular B16: protocolos, vídeos y más
- Preguntas frecuentes
Características generales y origen de la línea celular B16
En esta sección del artículo se tratarán las características de la línea celular de melanoma B16. Encontrará aquí las respuestas a las siguientes preguntas frecuentes, tales como: ¿Qué es la línea celular cancerosa B16? ¿De dónde proceden las células B16? ¿Cuál es el tamaño de las células B16?
- La línea celular B16 se estableció en 1954. Estas células se obtuvieron de ratones C57BL/6J que desarrollaron espontáneamente un tumor en la piel en los Laboratorios Jackson de Maine.
- Se trata de células epiteliales productoras de melanina con capacidad para metastatizar en el bazo, el hígado y los pulmones.
- Las células de melanoma B16 crecen en monocapas y presentan una morfología celular de tipo epitelial y fusiforme.
- El tamaño de la línea celular B16 es de aproximadamente 15,4 μm.
- Existen distintos subclones de células B16, entre los que se incluyen B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 y B16F10. Estas sublíneas son diferentes de las células B16 parentales y conservan algunas características específicas. Por ejemplo, presentan diferencias en la morfología, el tamaño celular y otras propiedades. La B16F10 tiene una alta capacidad de metástasis pulmonar, y la B164A5 es la línea celular de cáncer de piel más agresiva en comparación con la B16F10, la B16-GMCSF y la B16FLT3 [1].
Información sobre el cultivo de la línea celular B16
Antes de mantener o cultivar una línea celular, es posible que busque información clave sobre el tiempo de duplicación, el tipo de célula, los medios de cultivo, las condiciones de cultivo, etc. En esta sección se recoge toda la información necesaria para el cultivo de células B16.
Puntos clave para el cultivo de células B16
Tiempo de duplicación de la población:
Se estima que el tiempo medio de duplicación de la población de las células B16 es de 24 horas.
Adherentes o en suspensión:
Las células B16 son adherentes y crecen en monocapas.
Densidad de siembra:
Se recomienda sembrar las células B16 a una densidad de 1 a 2 x 10⁴ células/cm². Las células B16 adheridas se enjuagan con PBS 1x y se disocian de la superficie utilizando una solución de Accutase. Las células se centrifugan y el sedimento celular se resuspende en el medio de crecimiento. Posteriormente, estas células se dispensan en un nuevo frasco para su crecimiento.
Medio de crecimiento:
Las células B16 se cultivan en medio EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) que contiene un 10 % de suero fetal bovino (FBS). El medio de crecimiento debe renovarse 2-3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:
Para el cultivo de la línea celular B16 se utiliza una incubadora humidificada con un suministro de CO₂ al 5 % y una temperatura de 37 °C.
Almacenamiento:
Estas células se almacenan a una temperatura inferior a -150 °C o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para proteger la viabilidad celular.
Proceso y medio de congelación:
Se utiliza el medio de congelación CM-1 o CM-ACF para congelar las células B16 mediante un proceso de congelación lenta.
Proceso de descongelación:
Las células B16 congeladas se descongelan a 37 °C en un baño de agua que contiene un agente antimicrobiano. Las células descongeladas pueden cultivarse directamente vertiéndolas en frascos que contengan medio de crecimiento. Además, estas células pueden centrifugarse para eliminar los componentes del medio de congelación y, a continuación, cultivarse en un medio nuevo.
Nivel de bioseguridad:
La línea celular B16 debe manipularse o mantenerse en un laboratorio de nivel de bioseguridad uno.
Línea celular B16: ventajas y desventajas
Al igual que otras líneas celulares, la B16 presenta una combinación única de ventajas y desventajas. En esta sección se enumeran algunos de los principales pros y contras de esta línea celular de melanoma.
Ventajas
La B16 es la primera herramienta murina eficaz ampliamente utilizada en la investigación de la metástasis debido a las ventajas que ofrece. Algunas de las ventajas de esta línea celular de cáncer de piel son:
Fácil de cultivar
La línea celular B16 es fácil de cultivar en laboratorios de investigación. Se utiliza ampliamente para estudiar la biología de las células cancerosas, las vías de señalización y mucho más.
Crecimiento rápido
La línea celular de melanoma B16 presenta una alta tasa de proliferación, lo que la hace adecuada para estudiar los procesos de división y crecimiento celular.
Tumorigénesis
La B16 es una línea celular tumorigénica con propiedades similares a las de los tumores, como la invasión, la migración y la proliferación. Es valiosa para estudiar la formación, la progresión y la metástasis de los tumores.
Desventajas
Las desventajas asociadas a la línea celular B16 son:
Falta de relevancia en humanos
Dado que B16 es una línea celular de melanoma de ratón, es posible que no represente con precisión la biología del cáncer de piel humano, lo que limita la aplicabilidad de los resultados de la investigación.
Heterogeneidad
Las células B16 son heterogéneas y presentan propiedades genéticas y fenotípicas variadas dentro del mismo cultivo. Esto puede afectar a la fiabilidad y reproducibilidad de los resultados.
Aplicaciones de las células B16
La línea celular B16 se utiliza ampliamente en estudios de investigación. Algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular son:
- Biología tumoral: esta línea celular de cáncer de piel murino es tumorigénica y se utiliza ampliamente para comprender la biología tumoral. Se han llevado a cabo varios estudios para explorar los mecanismos celulares que subyacen al crecimiento, la proliferación y la metástasis de las células tumorales utilizando células B16. Un estudio de investigación realizado en 2020 utilizó células B16 para investigar el papel del ARN no codificante largo, LncRNA MEG3, en la formación, el crecimiento y la metástasis del melanoma. Esta investigación descubrió que el ARN no codificante modula el eje miARN-21/E-cadherina para estimular estos eventos celulares [2]. Del mismo modo, se llevó a cabo una investigación para estudiar el posible papel de la señalización de Notch1 en la inmunosupresión inducida por el tumor utilizando células B16 [3].
- Descubrimiento de fármacos: las células B16 se utilizan para validar y probar los posibles efectos terapéuticos de los fármacos candidatos. Un estudio evaluó el efecto antitumoral del ácido neogambogico, un compuesto natural, utilizando una línea celular B16. Los resultados del estudio revelaron que este compuesto modula la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR para provocar la muerte de las células cancerosas [4]. Otro estudio investigó el efecto antitumoral del ginsenósido Rg3, una saponina, utilizando la línea celular B16. La investigación propuso que este compuesto natural provocaba actividad antitumoral mediante la regulación a la baja de las vías ERK y Akt [5].
5. Publicaciones de investigación sobre las células B16
A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación relevantes sobre la línea celular de melanoma B16.
Esta publicación en la revista Cancer Cell International (2020) propone que el ARN largo no codificante MEG3 potencia la formación, el crecimiento y la metástasis de las células de melanoma B16 mediante la modulación del eje miRNA-21/E-cadherina.
Este artículo se publicó en la revista International Journal of Molecular Medicine en 2018. Este estudio investigó el efecto melanogénico y los mecanismos de un derivado del psoraleno, el 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g]cromen-2-ona (MPFC), en células B16. El estudio propuso que este derivado promueve la melanogénesis al estimular la señalización celular de PKA y p38 MAPK.
Esta investigación se publicó en 2018 en la revista Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Los resultados del estudio sugieren que la activación de la señalización de Notch1 en las células B16 puede impedir la inmunidad antitumoral al aumentar la expresión del gen TGF-β1.
Este estudio fue realizado por Chunlan Wu y sus colegas en 2020 y publicado en la revista Acta Biochimica Polonica. Esta investigación afirma que el ácido neogambogico, un compuesto natural, puede provocar la muerte de las células de melanoma B16 al modular la cascada de señalización PI3K/Akt/mTOR.
Este artículo de investigación se publicó en la revista European Journal of Medicinal Chemistry en 2018. En este estudio, los investigadores analizaron la actividad anticancerígena de un compuesto, el complejo de iridio (III), utilizando células de melanoma B16.
Este estudio propuso que un bioactivo vegetal, la ailantona, posee potencial anticancerígeno, ya que puede inducir la apoptosis y la detención del ciclo celular en las células de melanoma B16 y A375. Este artículo se publicó en Biomolecules en 2019.
Recursos para la línea celular B16: protocolos, vídeos y más
Existen pocos recursos sobre la línea celular B16 que expliquen sus protocolos de cultivo y transfección.
- Cultivo de células de melanoma: este vídeo ofrece consejos útiles para el cultivo de líneas celulares de melanoma.
- Subcultivo de una línea celular: este vídeo explica un protocolo general de subcultivo para una línea celular.
- Transfección de la línea celular B16F10: este vídeo explica el protocolo de transfección para una sublínea de células de melanoma B16. Puede ayudarle a optimizar el protocolo de transfección para las células B16.
A continuación se presentan algunos protocolos de cultivo celular para las células B16.
- Cultivo de células B16: Este sitio web contiene toda la información necesaria para el cultivo de células B16, incluyendo medios de crecimiento, subcultivo, descongelación y congelación de células.
Referencias
- Danciu, C., et al., Comportamiento de cuatro sublíneas diferentes de células de melanoma murino B16: piel de C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Wu, L., et al., El ARNlnc MEG3 promueve el crecimiento, la metástasis y la formación del melanoma mediante la modulación del eje miR-21/E-cadherina. Cancer Cell International, 2020. 20: p. 1-14.
- Yang, Z., et al., La señalización de Notch1 en células de melanoma promovió la inmunosupresión inducida por el tumor a través de la regulación al alza de TGF-β1. Revista de Investigación Oncológica Experimental y Clínica, 2018. 37(1): p. 1-13.
- Wu, C., et al., El ácido neogambogico induce la apoptosis de las células de melanoma B16 a través de la vía de señalización PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
- Meng, L., et al., Actividad antitumoral del ginsenósido Rg3 en el melanoma a través de la regulación negativa de las vías ERK y Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.