Células A431 - Análisis en profundidad de células de carcinoma epidermoide en la investigación dermatológica

A431 es una línea celular de cáncer epidermoide humano. Se utiliza ampliamente en el campo de la investigación biomédica, principalmente en biología del cáncer, inmuno-oncología y estudios toxicológicos. Además, las células A431 sobreexpresan EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico), por lo que se utilizan como un valioso modelo in vitro para estudiar el ciclo celular y las vías de señalización celular asociadas al cáncer.

En este artículo se explican los fundamentos de la línea celular A431. Aprenderá lo siguiente

Células A431: Características generales y origen
Línea celular A431: Información sobre el cultivo
Ventajas e inconvenientes de la línea celular A431
Aplicaciones de las células A431 en investigación
Publicaciones de investigación con células A431
Recursos para la línea celular A431: Protocolos, vídeos y más

1. Células A431: Características generales y origen

Esta sección del artículo te ayudará a conocer la información general sobre la línea celular A431 que necesitas saber antes de trabajar con ella. Por ejemplo, ¿cuál es el origen de la línea celular A431? ¿Cuáles son las características de la línea celular A431? ¿Cuál es la morfología de las células A431? ¿De dónde proceden las células A431?

A431, una línea celular humana de cáncer de piel, se obtuvo de la epidermis de una paciente de 85 años con carcinoma epidermoide [1]. Fue establecida por D.J. Giard, et al., que desarrollaron muchas otras líneas celulares a partir de tumores sólidos.
Las células A-431 poseen morfología epitelial. Se agregan y forman grupos celulares.
La línea celular de cáncer de piel a431 es hipertriploide. El número cromosómico modal de esta línea celular es 74, que se da en alrededor del 36% de las células. También existen ploidías superiores en aproximadamente el 1% de la población celular.

Tumor que crece bajo la piel y se infiltra en los tejidos subyacentes.

2.línea celular A431: Información sobre el cultivo

Conocer los requisitos y procedimientos de cultivo de una línea celular puede facilitar su manipulación. Esta parte del artículo le ayudará a conocer los puntos clave para el cultivo de la línea celular A431. Por ejemplo, sabrá: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células A431? ¿Es adherente la línea celular A431? ¿Qué medio de cultivo se utiliza para A431?

Puntos clave para el cultivo de células A431

Tiempo de duplicación:	El tiempo de duplicación de la población de células A431 oscila entre 80 y 100 horas.
Adherentes o en suspensión:	A431 es una línea celular adherente.
Densidad de siembra:	1 x¹⁰⁴ ^células/cm2 de densidad celular es ideal para la línea celular A431. Las células tardan casi 4 días en hacerse confluentes a esta densidad. Las células adherentes se lavan con PBS (1x) y se incuban con la solución de pasaje Accutase. Después, las células se resuspendieron en un medio de cultivo y se centrifugaron. Las células cosechadas se resuspendieron de nuevo y se dispensaron en nuevos matraces para su crecimiento.
Medio de crecimiento:	Para cultivar la línea celular A431 se utiliza medio DMEM suplementado con 10% de suero bovino fetal, 4,5 g/L de glucosa, 1,0 mM de piruvato sódico, 1,5 g/L de NaHCO3 y 4 mM de L-glutamina. Los medios deben sustituirse cada 2 o 3 días a la semana.
Condiciones de crecimiento:	Las células cancerosas A431 se cultivan en una incubadora humidificada equipada con una fuente de CO2 al 5% a 37°C de temperatura.
Almacenamiento:	La línea celular puede almacenarse en un congelador eléctrico o en fase vapor de nitrógeno líquido a una temperatura inferior a -150°C, ya que ayuda a proteger la viabilidad celular.
Proceso y medio de congelación:	CM-1 o CM-ACF son los dos medios de congelación altamente recomendados para las células A431. Las células se congelan utilizando un método de congelación lenta que permite que la temperatura descienda sólo 1 grado por minuto.
Proceso de descongelación:	Las células A431 congeladas se descongelan en un baño de agua a 37°C que contiene un agente antimicrobiano durante 40 a 60 segundos. Cuando sólo queda un pequeño grumo de hielo, se añaden las células con medio de cultivo y se centrifugan. Las células recolectadas se resuspenden y se vierten en frascos de cultivo para su crecimiento.
Nivel de bioseguridad:	Se recomienda un nivel de bioseguridad uno para la manipulación y el mantenimiento de los cultivos de A431.

Esferoides A-431 a diferentes densidades celulares.

3.ventajas e inconvenientes de la línea celular A431

La línea celular A431 posee características distinguibles y ofrece varias ventajas e inconvenientes. A continuación resumimos algunas de ellas.

Ventajas

Las principales ventajas de la línea celular de cáncer A431 son:

Sobreexpresión de EGFR	Las células A431 sobreexpresan el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Sirven como control positivo para estudiar la señalización del EGFR y sus implicaciones en el cáncer. También se utilizan para evaluar nuevas terapias contra el cáncer.
Tumorigenicidad	Las células A431 son tumorigénicas y tienen la capacidad de formar tumores. Pueden utilizarse para desarrollar modelos de xenoinjerto de cáncer, que son herramientas valiosas para estudiar la dinámica de crecimiento tumoral y evaluar nuevos tratamientos contra el cáncer.

Desventajas

Las desventajas de las células A431 son

Anomalías genéticas	A431 es una línea celular de cáncer que presenta mutaciones y alteraciones genéticas que pueden distinguirla de las características del tumor original.
Contaminación microbiana	A431 es propensa a la contaminación microbiana, principalmente bacteriana. Sin embargo, el mantenimiento de unas condiciones de cultivo asépticas estándar puede ayudar a prevenir dicha contaminación en los cultivos de células A431.

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4. Aplicaciones de las células A431 en investigación

La línea celular A431 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer. A continuación se enumeran algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular de cáncer de piel. Biología del cáncer: La línea celular A431 de cáncer de piel es una gran herramienta de investigación para estudiar los mecanismos celulares y moleculares que impulsan el crecimiento, el desarrollo, la metástasis y la invasión del cáncer.

Los investigadores han utilizado ampliamente esta línea celular para estudiar intensamente las vías de señalización celular implicadas en diferentes procesos celulares del cáncer. Por ejemplo, un estudio realizado en 2018 exploró que la vía de señalización PI3K/AKT/mTOR está implicada en la proliferación de células cancerosas, y la inhibición de esta vía induce la apoptosis en células tumorales de la piel, A431 [2]. Además, otro estudio también informó de la contribución de la vía PI3K/AKT/mTOR en la metástasis de células de cáncer de piel y la transición epitelial a mesenquimal (EMT), lo que indica su papel crucial en el desarrollo y la progresión del cáncer [3]. Ensayo y evaluación de fármacos: Las células A431 se utilizan para evaluar la eficacia y efectividad de posibles candidatos a fármacos contra el cáncer. Los investigadores determinaron los efectos de los fármacos en la proliferación, metástasis, invasión y apoptosis de las células cancerosas realizando varios experimentos de laboratorio -investigación dirigida por Nurhidayah Ab. Rahim y sus colegas utilizaron células A431 y evaluaron el potencial terapéutico de unas nanopartículas de plata de la planta Alstonia angustiloba sintetizadas biogénicamente en 2022. Los resultados revelaron que las angustiloba-AgNPs ejercían efectos antiproliferativos sobre las células de carcinoma escamoso de piel [4]. Modelos de xenoinjerto tumoral: La línea celular A431 es tumorigénica y puede formar tumores cuando se inocula en un modelo de ratón. Por lo tanto, es una herramienta útil para desarrollar modelos de xenoinjerto en ratón para investigar la biología del cáncer in vivo. Varios estudios han utilizado la línea celular A431 para desarrollar modelos de xenoinjerto tumoral. Por ejemplo, Yu Jin Lim y su equipo desarrollaron un modelo de ratón de xenoinjerto de tumor cutáneo utilizando células A431 para evaluar los efectos antitumorales y radiosensibilizadores del factor de crecimiento epidérmico (EGF) exógeno in vivo [5]. 5. Publicaciones de investigación con células A431 Eficacia de las nanofibras biopoliméricas PVA-AuNPs y PCL-Curcumina cargadas con electrospun y su actividad anticancerígena contra la línea celular de cáncer de piel A431 Este artículo se publicó en Materials Today Communications en 2020. El estudio evaluó el potencial anticancerígeno de nanofibras electrospun cargadas con curcumina de poli-ε-caprolactona y alcohol polivinílico-AuNPs contra células cancerosas A431. miRNA-221 promueve la progresión del carcinoma escamoso cutáneo dirigiéndose a PTEN Este estudio publicado en Cellular & Molecular Biology Letters (2019) propuso que el microRNA-221 desempeña un papel oncogénico en el carcinoma escamoso cutáneo dirigiéndose al gen PTEN. Fungal vincristine from Eutypella spp-CrP14 isolated from Catharanthus roseus induces apoptosis in human squamous carcinoma cell line-A431 Esta investigación en BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) sugiere que la vincristina, un metabolito secundario aislado de un hongo, Eutypella spp - CrP14, induce la apoptosis en células A431. La sobreexpresión de CDC42SE1 en células A431 redujo la proliferación celular mediante la inhibición de la vía Akt Este estudio se publicó en 2019 en la revista Cells. Esta investigación propuso el gen CDC42SE1 como un biomarcador importante de la progresión del cáncer de piel, ya que su regulación a la baja facilita la tumorigénesis. La metformina inhibe la proliferación de células A431 modulando la vía de señalización PI3K/Akt Esta investigación se publicó en Medicina experimental y terapéutica en 2015. En ella se proponía que la metformina suprimía la proliferación de la línea celular de cáncer de piel a431 mediante la regulación de la vía de señalización PI3K/Akt. 6. Recursos para la línea celular A431: Protocolos, vídeos y más A continuación se presentan algunos recursos en línea sobre la línea celular A431 de cáncer de piel. Transfección de células A-431: Este enlace proporciona una guía paso a paso para transfectar células cancerosas A431. El siguiente enlace contiene información sobre el cultivo celular de células A431. Línea celular de cáncer A431: Este enlace contiene información necesaria sobre el cultivo celular de la línea celular A431. Incluye medios de cultivo, densidad celular, manejo de cultivos criopreservados y proliferativos, etc. Cultivo de células A431: Este sitio web contiene un breve protocolo para el cultivo de la línea celular A431.

Referencias

Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausana), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Informes de medicina molecular, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eucalyptol targets PI3K/Akt/mTOR pathway to inhibit skin cancer metastasis.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells.

Investigación y tratamiento del cáncer: Revista oficial de la Asociación Coreana del Cáncer, 2015. 47(4): p. 921-930.