Línea celular A375: guía para la investigación del melanoma
La A375 es una línea celular de melanoma humano ampliamente utilizada en la investigación toxicológica e inmuno-oncológica. Los investigadores emplean esta línea celular para estudiar la biología del cáncer y las vías de señalización, probar o cribar posibles agentes anticancerígenos y desarrollar terapias nuevas y eficaces.
- Medio de cultivo
- Ver página del producto
- Tiempo de duplicación
- Ver página del producto
- Tipo de crecimiento
- Adherente
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir A375
- Origen y características generales de las células A375
- Células A375: Información sobre el cultivo celular
- Ventajas y limitaciones de la línea celular A375
- Compra ahora tus células A375
- Aplicaciones de investigación de la línea celular A375
- Células A375: Publicaciones
- Recursos para la línea celular A375: protocolos, vídeos y más
- Preguntas frecuentes (FAQ) sobre las células A375
- Referencias
- Preguntas frecuentes
Origen y características generales de las células A375
Conocer el origen y las características generales de una línea celular puede ayudarle a planificar su uso en la investigación. En esta sección del artículo se tratarán el origen y las características de la línea celular A375. Por ejemplo, ¿qué es la línea celular A375? ¿Cuáles son las características de la línea celular A375? ¿De dónde proceden las células A375? ¿Cuál es la morfología de las células de melanoma A375? ¿Cuál es el tamaño de las células A375?
- La línea celular de cáncer de piel A375 se originó a partir del cultivo de un explante de un tumor sólido de una mujer de 54 años con melanoma maligno [1].
- Las células A375 tienen una morfología de tipo epitelial.
- El tamaño de las células A375 es relativamente más pequeño en comparación con otras líneas celulares. Tienen un diámetro aproximado de 12 µm.
- Las células de melanoma A375 son hipotriploides. El número modal de cromosomas de esta línea celular es 62. Por lo general, cada célula tiene nueve cromosomas marcadores y una copia de los cromosomas normales N2, N6 y N22.
Células A375: Información sobre el cultivo celular
Los cultivos de células A375 son fáciles de mantener. No tienen requisitos de cultivo celular exigentes. Esta sección le ayudará a conocer la información necesaria sobre el cultivo celular. Por ejemplo, ¿cuál es el tiempo de duplicación de las células A375? ¿Cuál es el medio de cultivo de la línea celular A375? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células A375? ¿Son las células de melanoma A375 adherentes?
Puntos clave para el cultivo de células A375
Tiempo de duplicación de la población:
El tiempo de duplicación de las A375 es de 20 horas.
Adherentes o en suspensión:
La A375 es una línea celular de melanoma humano adherente.
Densidad de siembra:
Una densidad celular de 1 x 10⁴ células/cm² es ideal para los cultivos de células A375. Las células adherentes se enjuagan con solución salina tamponada con fosfato (PBS) 1x y se incuban con solución de pasaje (Accutase). Posteriormente, se añaden medios de cultivo a las células y se centrifugan. Las células cosechadas se resuspenden en un medio de cultivo y se dispensan en nuevos frascos para su crecimiento.
Medio de crecimiento:
Se recomienda el DMEM como medio ideal para A375 cuando se suplementa con un 10 % de suero fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glucosa, 1,5 g/L de NaHCO3, 4 mM de L-glutamina y 1,0 mM de piruvato de sodio. El medio A375 debe renovarse 2-3 días a la semana.
Condiciones de cultivo:
Las células de melanoma A375 se cultivan en una incubadora humidificada (37 °C) con un suministro de CO₂ al 5 %.
Almacenamiento:
Las células A375 congeladas deben mantenerse a una temperatura inferior a -150 °C en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en un congelador eléctrico.
Proceso de congelación y medio:
Para congelar la línea celular A375 se utilizan los medios CM-1 o CM-ACF. Se ha optado por un proceso de congelación lenta que permite una disminución gradual de la temperatura de 1 °C para proteger la viabilidad celular.
Proceso de descongelación:
El vial de células de melanoma A375 congeladas se agita rápidamente en un baño de agua durante 40 a 60 segundos hasta que solo quede un pequeño trozo de hielo. Se añaden medios frescos a las células y se centrifugan para eliminar los elementos del medio de congelación. El sedimento celular obtenido se resuspende de nuevo y se vierte en nuevos frascos.
Nivel de bioseguridad:
Los cultivos de A375 se manipulan y mantienen en entornos de laboratorio de nivel de bioseguridad 1.
Ventajas y limitaciones de la línea celular A375
Al igual que otras líneas celulares, la línea celular de melanoma A375 presenta una combinación única de ventajas y limitaciones, lo que la convierte en una herramienta valiosa para la investigación del cáncer de melanoma. En esta sección se enumeran solo algunas de las ventajas y desventajas más significativas de la línea celular A375.
Ventajas
A continuación se mencionan las ventajas significativas de las células A375:
- Modelo tumoral de melanoma: la línea celular A375 se derivó de un tumor de melanoma maligno, por lo que sirve como un modelo tumoral inestimable para investigar la biología del melanoma y las intervenciones terapéuticas. Estas células presentan propiedades similares a las del melanoma, como una alta tasa de proliferación y capacidad invasiva.
- Tumorigenicidad: Las células A375 son altamente tumorígenas, lo que significa que pueden formar tumores. Se ha descrito que las células A375 producen melanomas amelanóticos agresivos en ratones NIH Swiss tratados con suero antitimocítico (un agente inmunosupresor).
- Bien caracterizada: La A375 es una línea celular genéticamente bien caracterizada. Posee mutaciones genéticas específicas similares a las del melanoma. Las mutaciones de la A375 incluyen la alteración del gen BRAF, lo que la hace sensible a los inhibidores específicos de BRAF. Este perfil genético convierte a las células A375 en una excelente herramienta de investigación oncológica para estudiar las vías moleculares subyacentes y las terapias dirigidas.
Limitaciones
Las limitaciones asociadas a las células A375 son:
- Limitaciones in vitro: A375 es un modelo tumoral in vitro. Aunque imita las características del melanoma, no puede representar plenamente la complejidad de los tumores de melanoma. Por lo tanto, se debe actuar con cautela al generalizar los hallazgos in vitro a los estudios clínicos.
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Aplicaciones de la línea celular A375 en la investigación
La línea celular A375 tiene amplias aplicaciones en la investigación del cáncer. A continuación se enumeran algunas de las áreas más comunes en las que se utilizan las células A375.
- Investigación sobre el cáncer: Las células A375 tienen amplias aplicaciones en la investigación del melanoma. Los investigadores utilizaron estas células para estudiar la biología del cáncer de piel, sus procesos y los mecanismos de señalización celular subyacentes, incluyendo la proliferación, la migración y la invasión celular. Esto también puede ayudar a los investigadores a identificar nuevas dianas terapéuticas moleculares. Un estudio realizado por Lin Zhu y sus colegas en 2019 utilizó células de melanoma A375 altamente agresivas y descubrió el papel del microARN-3662 en el crecimiento y la invasión de las células de melanoma A375. Los resultados del estudio indican que el microARN-3662 se dirige al gen ZEB1 y regula el crecimiento de las células de melanoma in vitro e in vivo en el modelo tumoral A375 [2]. De manera similar, una investigación realizada en 2018 descubrió que las vías PI3K/AKT y MAPK/ERK están implicadas en la proliferación y la metástasis de la línea celular A375 [3].
- Descubrimiento y ensayo de fármacos: la línea celular A375 es un modelo tumoral in vitro útil para probar y seleccionar posibles agentes anticancerígenos. Los investigadores evalúan la toxicidad y la eficacia de nuevos fármacos quimioterapéuticos, compuestos y otras terapias utilizando estas células de melanoma A375. Por ejemplo, un estudio exploró las propiedades anticancerígenas de las micro y nanovesículas derivadas del pomelo en células de melanoma humano A375. Los resultados revelaron que las micro y nanovesículas inducen la detención del ciclo celular y la apoptosis, y obstaculizan la expresión génica en la proliferación, migración e invasión celular [4].
Células A375: Publicaciones
A continuación se mencionan algunas publicaciones de investigación significativas en las que se utilizan las células A375.
Este estudio se publicó en la revista Journal of Oncology en 2019. El estudio propuso que el tratamiento combinado con vitamina D y sus análogos mejora la actividad anticancerígena del cisplatino y la dacarbazina en las células de melanoma A375.
Esta investigación se publicó en la revista Journal of Herbal Medicine en 2022. Este estudio exploró los efectos antimelanoma del gel de aloe vera en células de melanoma A375.
Este estudio publicado en Oncogene (2021) propuso que el miembro 2 de la familia de la fermitina (FERMT2 o kindlin-2) favorece la progresión del melanoma mediante la activación de la MAPK a través de la unión con p-α-Pix y Rac1.
Este estudio publicado en The American Journal of Dermatopathology (2019) propone que FARP1 podría facilitar el desarrollo y la progresión del melanoma cutáneo. Por lo tanto, puede constituir una diana terapéutica útil.
Este artículo de investigación se publicó en Bioengineered (2019). Este estudio exploró la actividad citotóxica y apoptótica de un extracto de la planta Phyllodium elegans en líneas celulares de carcinoma humano, incluida la A375.
Recursos para la línea celular A375: protocolos, vídeos y más
A continuación se presentan algunos recursos en línea sobre las células A375.
- Transfección de células A375: este tutorial en vídeo le ayudará a aprender paso a paso la transfección de células A375.
- Cultivo celular: este vídeo contiene información muy útil sobre el cultivo de líneas celulares.
Los protocolos de cultivo celular para las células A375 se enumeran aquí.
- Línea celular A375: este enlace contiene información útil sobre el cultivo y mantenimiento de la línea celular A375, incluyendo los medios de cultivo A375 y la manipulación de cultivos A375 congelados y en proliferación.
Preguntas frecuentes sobre las células A375
Referencias
- Avram, S., et al., Estandarización de modelos de melanoma humano A375 en membrana corioalantoidea de embrión de pollo y ratones Balb/c nude. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
- Zhu, L., et al., El microARN-3662 se dirige a ZEB1 y atenúa la invasión de la línea celular de melanoma A375, altamente agresiva. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., La oxyfadichalcone C inhibe la proliferación y la metástasis de las células del melanoma A375 mediante la supresión de las vías PI3K/Akt y MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al., Las micro y nanovesículas derivadas del pomelo muestran perfiles metabolómicos y actividades anticancerígenas distintivos en la línea celular de melanoma humano A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.