Línea celular A375 - Una guía sobre la investigación del melanoma
A375 es una línea celular de melanoma humano ampliamente utilizada en la investigación toxicológica e inmuno-oncológica. Los investigadores emplean esta línea celular para estudiar la biología del cáncer y las vías de señalización, probar o cribar posibles agentes anticancerígenos y desarrollar terapias nuevas y eficaces.
Origen y características generales de las células A375
Conocer el origen y las características generales de una línea celular puede ayudarle a planificar su uso en investigación. Esta sección del artículo cubrirá el origen y las características de la línea celular A375. Por ejemplo, ¿qué es la línea celular A375? ¿Cuáles son las características de la línea celular A375? ¿De dónde proceden las células A375? ¿Cuál es la morfología de las células de melanoma A375? ¿Cuál es el tamaño de las células A375?
- La línea celular A375 de cáncer de piel se originó a partir del cultivo de explantes de un tumor sólido de una mujer de 54 años con melanoma maligno [1].
- Las células A375 tienen una morfología de tipo epitelial.
- El tamaño de las células A375 es relativamente menor en comparación con otras líneas celulares. Poseen aproximadamente un diámetro de 12 µm.
- Las células de melanoma A375 son hipotriploides. El número modal de cromosomas de esta línea celular es 62. Normalmente, cada célula tiene nueve cromosomas marcadores y una copia de los cromosomas normales N2, N6 y N22.
Células A375: Información sobre el cultivo celular
Los cultivos de células A375 son fáciles de mantener. No tienen ningún requisito exigente de cultivo celular. Esta sección le ayudará a conocer la información necesaria sobre el cultivo celular. Por ejemplo, cuál es el tiempo de duplicación de A375. ¿Cuál es el medio de la línea celular A375? ¿Cuál es la densidad de siembra de A375? ¿Son adherentes las células de melanoma A375?
Puntos clave para el cultivo de células A375
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Tiempo de duplicación de la población: |
El tiempo de duplicación de A375 es de 20 horas. |
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Adherentes o en suspensión: |
A375 es una línea celular de melanoma humano adherente. |
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Densidad de siembra: |
1 x104 células/cm2 de densidadcelular es ideal para cultivos celulares de A375. Las células adherentes se enjuagan con 1 x tampón fosfato salino (PBS) y se incuban con solución de pasaje (Accutase). Después, se añadieron células con medio de cultivo y se centrifugaron. Las células cosechadas se resuspendieron en un medio de cultivo y se dispensaron en nuevos matraces para su crecimiento. |
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Medio de cultivo: |
Se recomienda DMEM como medio ideal para A375 cuando se complementa con un 10% de suero bovino fetal (FBS), 4,5 g/L de glucosa, 1,5 g/L de NaHCO3, 4 mM de L-glutamina y 1,0 mM de piruvato sódico. El medio A375 debe renovarse 2-3 días por semana. |
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Condiciones de crecimiento: |
Las células de melanoma A375 se cultivan en una incubadora humidificada (37°C) con un aporte de CO2 del 5%. |
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Conservación: |
Las células A375 congeladas deben conservarse por debajo de -150°C en la fase de vapor de nitrógeno líquido o en un congelador eléctrico. |
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Proceso y medio de congelación: |
Para congelar la línea celular A375 se utilizan los medios CM-1 o CM-ACF. Se ha optado por un proceso de congelación lento que permite un descenso gradual de la temperatura de 1°C para proteger la viabilidad celular. |
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Proceso de descongelación: |
El vial de células de melanoma A375 congelado se agita rápidamente en el baño de agua durante 40 a 60 segundos hasta que sólo quede un pequeño grumo de hielo. Las células se añaden con medio fresco y se centrifugan para eliminar los elementos del medio de congelación. El sedimento celular obtenido se resuspende de nuevo y se vierte en nuevos matraces. |
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Nivel de bioseguridad: |
Los cultivos de A375 se manipulan y mantienen en laboratorios de nivel de bioseguridad 1. |
Ventajas y limitaciones de la línea celular A375
Al igual que otras líneas celulares, la línea celular de melanoma A375 está asociada a una combinación única de ventajas y limitaciones, lo que la convierte en una herramienta valiosa para la investigación del cáncer de melanoma. En esta sección se han enumerado sólo algunas ventajas y desventajas significativas de la línea celular A375.
Ventajas
A continuación se mencionan las ventajas significativas de las células A375:
- Modelo de tumor de melanoma: La línea celular A375 se derivó de un tumor de melanoma maligno, por lo que constituye un modelo tumoral inestimable para investigar la biología del melanoma y las intervenciones terapéuticas. Estas células presentan propiedades similares a las del melanoma, como una alta tasa de proliferación y capacidad de invasión.
- Tumorigenicidad: Las células A375 son altamente tumorigénicas, lo que significa que pueden formar tumores. Se ha descrito que las células A375 producen melanomas amelanóticos agresivos en ratones NIH Swiss tratados con suero antitimocítico (un agente inmunosupresor).
- Bien caracterizadas: A375 es una línea celular genéticamente bien caracterizada. Posee mutaciones genéticas específicas como el melanoma. Las mutaciones de A375 incluyen la alteración del gen A375 BRAF, lo que la hace sensible a los inhibidores específicos de BRAF. Este perfil genético convierte a las células A375 en una excelente herramienta de investigación del cáncer para estudiar las vías moleculares subyacentes y las terapias dirigidas.
Limitaciones
Las limitaciones asociadas a las células A375 son
- Limitaciones in vitro: A375 es un modelo tumoral in vitro. Aunque imita las características del melanoma, no puede representar completamente la complejidad de los tumores de melanoma. Por lo tanto, hay que tener cuidado cuando los resultados in vitro se generalizan a estudios clínicos.
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Aplicaciones de investigación de la línea celular A375
La línea celular A375 tiene amplias aplicaciones en la investigación del cáncer. Éstas son algunas de las áreas comunes en las que se utilizan las células A375.
- Investigación del cáncer: Las células A375 tienen amplias aplicaciones en la investigación del melanoma. Los investigadores utilizan estas células para investigar la biología del cáncer de piel, los procesos y los mecanismos de señalización celular subyacentes, incluida la proliferación celular, la migración y la invasión. Esto también puede ayudar a los investigadores a identificar nuevas dianas terapéuticas moleculares. Un estudio realizado por Lin Zhu y sus colegas en 2019 utilizó células de melanoma A375 altamente agresivas y descubrió el papel del microRNA-3662 en el crecimiento y la invasión de las células de melanoma A375. Los hallazgos del estudio afirman que el microRNA-3662 se dirige al gen ZEB1 y regula el crecimiento de las células de melanoma in vitro e in vivo en el modelo tumoral A375 [2]. Del mismo modo, una investigación realizada en 2018 descubrió que las vías PI3K/AKT y MAPK/ERK están implicadas en la proliferación y metástasis de la línea celular A375 [3].
- Descubrimiento y ensayo de fármacos: La línea celular A375 es un modelo tumoral in vitro útil para probar y cribar posibles agentes anticancerígenos. Los investigadores evalúan la toxicidad y eficacia de nuevos fármacos quimioterapéuticos, compuestos y otras terapias utilizando estas células de melanoma A375. Por ejemplo, un estudio exploró las propiedades anticancerígenas de micro y nanovesículas derivadas del pomelo en células humanas de melanoma A375. Los resultados revelaron que las micro y nanovesículas inducen la detención del ciclo celular y la apoptosis y dificultan la expresión génica en la proliferación, migración e invasión celular [4].
Células A375: Publicaciones
A continuación se mencionan algunas publicaciones de investigación importantes sobre las células A375.
Este estudio se publicó en la revista Journal of Oncology en 2019. El estudio propuso que el tratamiento conjunto con vitamina D y análogos mejora la actividad anticancerosa del cisplatino y la dacarbazina en células de melanoma A375.
Esta investigación se publicó en el Journal of Herbal Medicine en 2022. Este estudio exploró los efectos antimelanoma del gel de aloe vera en células de melanoma A375.
Este estudio publicado en Oncogene (2021) propone que el miembro 2 de la familia de la fermitina (FERMT2 o kindlin-2) favorece la progresión del melanoma mediante la activación de la MAPK a través de la unión con p-α-Pix y Rac1.
Este estudio en The American Journal of Dermatopathology (2019) propuso que FARP1 puede facilitar el desarrollo y la progresión del melanoma cutáneo. Por lo tanto, puede ser una diana terapéutica útil.
Este artículo de investigación se publicó en Bioengineered (2019). Este estudio exploró la actividad citotóxica y apoptótica de un extracto de la planta Phyllodium elegans sobre líneas celulares de carcinoma humano, incluida la A375.
Recursos para la línea celular A375: Protocolos, vídeos y más
A continuación se presentan algunos recursos en línea sobre las células A375.
- Transfección de células A375: Este tutorial en vídeo le ayudará a aprender paso a paso la transfección de células A375.
- Cultivo celular: Este vídeo contiene información muy útil sobre el cultivo de líneas celulares.
Aquí se enumeran los protocolos de cultivo celular para células A375.
- Línea celular A375: Este enlace contiene información útil sobre el cultivo y mantenimiento de la línea celular A375, incluidos los medios de cultivo A375 y la manipulación de cultivos A375 congelados y en proliferación.
Preguntas frecuentes sobre las células A375
Referencias
- Avram, S., et al., Estandarización de modelos de melanoma humano A375 en membrana corioalantoidea de embrión de pollo y ratones nude Balb/c. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
- Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 se dirige a ZEB1 y atenúa la invasión de la línea celular de melanoma altamente agresiva A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., La oxifadichalcona C inhibe la proliferación celular y la metástasis del melanoma A375 mediante la supresión de las vías PI3K/Akt y MAPK/ERK. Ciencias de la vida, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al., Las micro y nanovesículas derivadas del pomelo muestran perfiles metabólicos distintos y actividades anticancerígenas en la línea celular de melanoma humano A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.