Κύτταρα SH-SY5Y - Η έρευνα για το νευροβλάστωμα και η νευροεπιστημονική σημασία των κυττάρων SH-SY5Y
Η κυτταρική σειρά SH-SY5Y, που προέρχεται από ανθρώπινο νευροβλάστωμα, χρησιμοποιείται εκτενώς στην ιατρική έρευνα για τη διερεύνηση νευροεκφυλιστικών ασθενειών και την ανάπτυξη φαρμάκων. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα στην αρχική αδιαφοροποίητη μορφή τους ή τα διαφοροποιούν σε κύτταρα που μοιάζουν με νευρώνες.
Γενικές πληροφορίες και προέλευση της κυτταρικής σειράς SH-SY5Y
Αυτή η ενότητα θα καλύψει βασικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά SH-SY5Y, συμπεριλαμβανομένης της προέλευσης, του ορισμού και της κυτταρικής δομής της. Θα ασχοληθούμε με ζητήματα όπως η μορφολογία της και η προέλευση των κυττάρων.
- Η SH-SY5Y είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά που προήλθε από υποκλωνοποίηση της κυτταρικής σειράς νευροβλαστώματος SK-N-SH το 1970.
- Η μητρική κυτταρική σειρά, SK-N-SH, αναπτύχθηκε από τη βιοψία μυελού των οστών μιας τετράχρονης ασθενούς με νευροβλάστωμα.
- Τα κύτταρα SH-SY5Y είναι φαινοτυπικά αδρενεργικά και εκφράζουν ντοπαμινεργικούς δείκτες, καθιστώντας τα ένα χρήσιμο in vitro μοντέλο για τη μελέτη νευροεκφυλιστικών ασθενειών, νευρογένεσης και χαρακτηριστικών εγκεφαλικών κυττάρων [1].
- Τα κύτταρα SH-SY5Y αναπτύσσονται ως συστάδες βιώσιμων νευροβλαστικών κυττάρων με νευρίτες και είναι χαλαρά προσκολλημένα.
- Το μέγεθος των κυττάρων SH-SY5Y είναι 12 μm.
- Ο τυπικός αριθμός χρωμοσωμάτων για τα κύτταρα SH-SY5Y είναι 47 και διαθέτουν έναν σπάνιο δείκτη χρωμοσωμικού αριθμού 1, την τρισωμία 1q, που προκαλείται από την εισαγωγή ενός επιπλέον αντιγράφου του τμήματος 1q στο μακρύ σκέλος του χρωμοσώματος 1.
Καλλιέργεια κυττάρων SH-SY5Y
Στα εργαστήρια νευροβιολογικής έρευνας, τα κύτταρα SH-SY5Y είναι τα κύτταρα νευροβλαστώματος που καλλιεργούνται περισσότερο. Για να εργαστείτε με αυτά τα κύτταρα, είναι απαραίτητο να κατανοήσετε ποιος τύπος μέσου ανάπτυξης είναι κατάλληλος για την καλλιέργειά τους, τα χαρακτηριστικά ανάπτυξής τους, τη βέλτιστη πυκνότητα σποράς και τη σωστή μέθοδο κατάψυξής τους. Αυτή η ενότητα θα παράσχει βασικές πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια κυττάρων SH-SY5Y για να σας βοηθήσει σε αυτές τις πτυχές.
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων SH-SY5Y
|
Χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού: Ο μέσος χρόνος διπλασιασμού του πληθυσμού για τα κύτταρα SH-SY5Y είναι περίπου 3 έως 4 ημέρες. |
|
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα: Τα SH-SY5Y είναι χαλαρά προσκολλημένα κύτταρα. Αναπτύσσονται ως συσσωματώματα όταν σπείρονται σε υψηλή πυκνότητα. |
|
Πυκνότητα σποράς: Η βέλτιστη πυκνότητα σποράς για την SH-SY5Y είναι 1 x 104 κύτταρα/cm2. Οι καλλιέργειες SH-SY5Y αποτελούνται τόσο από προσκολλημένα όσο και από αιωρούμενα κύτταρα. |
|
Μέσο ανάπτυξης: Το μέσο DMEM:Ham's F12 συμπληρωμένο με 3,1 g/L γλυκόζης, 10% FBS και 1,6 mM L-γλουταμίνης είναι ιδανικό για την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς SH-SY5Y. |
|
Συνθήκες ανάπτυξης (Θερμοκρασία, CO2): Τα κύτταρα SH-SY5Y αναπτύσσονται σε θερμοκρασία 37°C σε υγροποιημένο επωαστήρα με παροχή 5% CO2. |
|
Αποθήκευση: Για να διατηρηθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων SH-SY5Y, αποθηκεύονται σε φάση ατμών υγρού αζώτου σε θερμοκρασία κάτω των -150°C. |
|
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο: Για την κατάψυξη των κυττάρων SH-SY5Y χρησιμοποιούνται τα μέσα κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Για την κατάψυξη αυτής της κυτταρικής σειράς νευροβλαστώματος επιλέγεται μια μέθοδος αργής κατάψυξης που μειώνει σταδιακά τη θερμοκρασία κατά 1°C. |
|
Διαδικασία απόψυξης: Τα κατεψυγμένα φιαλίδια που περιέχουν κύτταρα SH-SY5Y τοποθετούνται σε υδατόλουτρο θερμοκρασίας 37°C. Το φιαλίδιο αναδεύεται ταχέως έως ότου αποψυχθούν τα κύτταρα και απομείνει μόνο ένα μικρό σβόλο πάγου. |
|
Επίπεδο βιοασφάλειας: Τα κύτταρα SH-SY5Y μπορούν να καλλιεργηθούν σε εργαστήριο επιπέδου βιοασφάλειας 1. |
Κύτταρα SH-SY5Y: Πλεονεκτήματα & Περιορισμοί
Πλεονεκτήματα
- Διαφοροποίηση σε νευρώνες: Παρέχοντας μια πιο βολική εναλλακτική λύση σε σχέση με τους πρωτογενείς νευρώνες και αποφεύγοντας ηθικές ανησυχίες που σχετίζονται με τη χρήση τους [2].
- Μοντέλο in vitro για νευροεκφυλιστικές ασθένειες: Η έκφραση μοριακών δεικτών, συμπεριλαμβανομένων των ντοπαμινεργικών νευρικών δεικτών, καθιστά τα κύτταρα SH-SY5Y κατάλληλα για τη μελέτη νευροεκφυλιστικών διαταραχών όπως η νόσος του Πάρκινσον.
Περιορισμοί
- Μη συγχρονισμένος κυτταρικός κύκλος: Οι καλλιέργειες κυττάρων SH-SY5Y παρουσιάζουν μη συγχρονισμένους κυτταρικούς κύκλους σε αδιαφοροποίητη κατάσταση [3].
- Απροσδιόριστη κατάσταση διαφοροποίησης: Τα κύτταρα SH-SY5Y έχουν μια απροσδιόριστη κατάσταση διαφοροποίησης που κυμαίνεται από μια καρκινική κατάσταση νευροβλαστώματος έως μεταμιτωτικούς νευρώνες ή νευρικά προγονικά κύτταρα. Δεν εκφράζουν μοριακούς δείκτες που εκφράζουν τα ώριμα νευρωνικά κύτταρα [4].
Κύτταρα SH-SY5Y για In Vitro Νευροφαρμακολογία & Ανακάλυψη Φαρμάκων
Εφαρμογές των κυττάρων SH-SY5Y
Έρευνα νευροεκφυλιστικών ασθενειών: SH-SY5Y χρησιμοποιούνται για τη μελέτη νευροεκφυλιστικών διαταραχών, όπως η νόσος του Alzheimer και η νόσος του Parkinson. Για παράδειγμα, σε μια μελέτη αντιμετωπίστηκαν κύτταρα SH-SY5Y με το πεπτίδιο 1-42 του αμυλοειδούς β για τη δημιουργία ενός in vitro μοντέλου της νόσου Alzheimer. Η κυτταρική σειρά που αναπτύχθηκε στη συνέχεια διαμολύνθηκε με pcDNA-17A και 17A shRNA για να εξεταστεί η επίδραση του μακρού μη κωδικού RNA 17A σε κύτταρα που μοιάζουν με τη νόσο Alzheimer. Η μελέτη έδειξε ότι το LncRNA-17A ρυθμίζει την απόπτωση και την αυτοφαγία των κυττάρων SH-SY5Y, μιμούμενο τη ΝΑ [5].
Ανάπτυξη φαρμάκων: Τα κύτταρα SH-SY5Y χρησιμοποιούνται για τον έλεγχο και την επικύρωση φαρμάκων για τη θεραπευτική τους δράση έναντι νευροεκφυλιστικών ασθενειών. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2021 προκάλεσε παρκινσονισμό σε κύτταρα SH-SY5Y χρησιμοποιώντας ένα ζιζανιοκτόνο (Paraquat) και στη συνέχεια χρησιμοποίησε αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσει το θεραπευτικό δυναμικό ενός φλαβονοειδούς, της Naringenin. Η ένωση επέδειξε προστατευτική δράση έναντι του νευροεκφυλισμού και της νευροτοξικότητας που προκαλούνται από τη νόσο του Πάρκινσον σε κυτταρικά μοντέλα, υποδεικνύοντας τις δυνατότητές της για την ανάπτυξη θεραπειών για τη νόσο του Πάρκινσον [6].
Ερευνητικές δημοσιεύσεις με κύτταρα SH-SY5Y
Υπάρχει πληθώρα ερευνητικών μελετών σχετικά με τα κύτταρα SH-SY5Y. Η παρούσα ενότητα θα καλύψει μερικά σημαντικά παραδείγματα.
- Το LncRNA17A ρυθμίζει την αυτοφαγία και την απόπτωση της κυτταρικής σειράς SH-SY5Y ως in vitro μοντέλο για τη νόσο Alzheimer: Σε αυτή τη δημοσίευση, προτάθηκε ότι το LncRNA17A μεσολαβεί στην απόπτωση και την αυτοφαγία των κυττάρων SH-SY5Y που μετατράπηκαν πειραματικά σε μοντέλο της νόσου του Alzheimer.
- Η ναρινγενίνη ανακουφίζει την επαγόμενη από paraquat ντοπαμινεργική νευρωνική απώλεια σε κύτταρα SH-SY5Y και σε ένα μοντέλο αρουραίου για τη νόσο του Πάρκινσον: Αυτή η μελέτη πρότεινε ενώσεις Naringenin ως νευροπροστατευτικό έναντι ενός πειραματικά αναπτυγμένου κυτταρικού και ζωικού μοντέλου της νόσου του Parkison.
- Βιοχημικός χαρακτηρισμός της πολλαπλασιαστικής και διαφοροποιημένης κυτταρικής σειράς SH-SY5Y ως μοντέλο για τη νόσο του Πάρκινσον: Τα διαφοροποιημένα κύτταρα SH-SY5Y χρησιμοποιήθηκαν για τον χαρακτηρισμό και την αξιολόγηση διαφόρων βιοχημικών διεργασιών που μελετώνται συχνά στη νόσο του Πάρκινσον.
- In vitro επιδράσεις της ασιτρετίνης σε ανθρώπινα νευρωνικά κύτταρα SH-SY5Y: Τα κύτταρα SH-SY5Y χρησιμοποιήθηκαν για τη μελέτη της νευρωνικής διαφοροποίησης. Οι ερευνητές διερεύνησαν ότι η ασιτρετίνη προάγει τη διαφοροποίηση των νευρώνων και αντιμετωπίζει νευροεκφυλιστικές και νευροαναπτυξιακές διαταραχές και όγκους του εγκεφάλου.
- Μετασχηματισμός της κυτταρικής σειράς SH-SY5Y σε κύτταρα που μοιάζουν με νευρώνες: Διερεύνηση των ηλεκτροφυσιολογικών και εμβιομηχανικών αλλαγών: Αυτή η μελέτη μετέτρεψε τα κύτταρα του νευρικού βλαστώματος SH-SY5Y σε νευρώνες με τη θεραπεία τους με ρετινοϊκό οξύ και μόρια του νευροτροφικού παράγοντα που προέρχεται από τον εγκέφαλο (BDNF) και εξέτασε τις βιοχημικές και ηλεκτροφυσιολογικές αλλαγές σε αυτά.
Πόροι για τα κύτταρα SH-SY5Y: SYY5Y: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Διατίθενται διάφοροι διαδικτυακοί πόροι σχετικά με αυτή τη διάσημη κυτταρική σειρά νευροβλαστώματος. Αυτοί οι πόροι μπορούν να σας εκπαιδεύσουν σχετικά με τον χειρισμό και τη συντήρηση των καλλιεργειών SH-SY5Y.
Πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων
Τα παρακάτω άρθρα του ιστότοπου μπορούν να σας βοηθήσουν να μάθετε μεθόδους για την καλλιέργεια, την κατάψυξη και την απόψυξη των κυττάρων SH-SY5Y.
- Καλλιέργεια κυττάρων SH-SY5Y: Βασικέςπληροφορίες σχετικά με τα κύτταρα SH-SY5Y, συμπεριλαμβανομένης της απόψυξης, της κατάψυξης και της υποκαλλιέργειας των κυττάρων.
- Υποκαλλιέργεια κυττάρων SH-SY5Y: Εμφανίζει πληροφορίες σχετικά με τα χρησιμοποιούμενα μέσα ανάπτυξης και τα βήματα υποκαλλιέργειας για τα κύτταρα SH-SY5Y.
- Διαμόλυνση κυττάρων SH-SY5Y: Αυτό το έγγραφο περιγράφει ένα πρωτόκολλο παροδικής διαμόλυνσης για την κυτταρική σειρά SH-SY5Y.
- Πρωτόκολλο διαφοροποίησης: Αυτό το βίντεο εξηγεί το πρωτόκολλο για τη διαφοροποίηση των κυττάρων SH-SY5Y.
Αναμένουμε ότι αυτό το άρθρο θα παράσχει χρήσιμες πληροφορίες σχετικά με το χειρισμό, την καλλιέργεια και τη χρήση των κυττάρων SH-SY5Y σε ερευνητικές μελέτες- αν θέλετε να εργαστείτε με αυτή τη σειρά κυττάρων νευροβλαστώματος, σκεφτείτε να κάνετε παραγγελία από εμάς.
Κυτταρική γραμμή SH-SY5Y: SHYY: Συχνές Ερωτήσεις
Αναφορές
- Carvajal-Oliveros, A., et al., Η κυτταρική σειρά BE (2)-M17 έχει καλύτερο ντοπαμινεργικό φαινότυπο από την παραδοσιακά χρησιμοποιούμενη για την έρευνα της νόσου Parkinson SH-SY5Y, η οποία είναι κυρίως σεροτονινεργική. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
- Kovalevich, J. and D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Καλλιέργεια νευρωνικών κυττάρων: μέθοδοι και πρωτόκολλα, 2013: σ. 9-21.
- Martin, E.-R., J. Gandawijaya και A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: σ. 4042.
- Feles, S., et al., Βελτιστοποίηση των συνθηκών καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς νευροβλαστώματος SH-SY5Y: προϋπόθεση για λειτουργικές μελέτες. Μέθοδοι και πρωτόκολλα, 2022. 5(4): p. 58.
- Wang, X., M. Zhang και H. Liu, Το LncRNA17A ρυθμίζει την αυτοφαγία και την απόπτωση της κυτταρικής σειράς SH-SY5Y ως in vitro μοντέλο για τη νόσο του Alzheimer. Βιοεπιστήμες, βιοτεχνολογία και βιοχημεία, 2019. 83(4): p. 609-621.
- Ahmad, M.H., et al., Η ναρινγενίνη ανακουφίζει την επαγόμενη από paraquat ντοπαμινεργική νευρωνική απώλεια σε κύτταρα SH-SY5Y και σε ένα μοντέλο αρουραίου για τη νόσο του Πάρκινσον. Νευροφαρμακολογία, 2021. 201: p. 108831.