SiHa-Zellen - Licht in die Gebärmutterhalskrebsforschung bringen
SiHa-Zellen sind in der biomedizinischen Forschung weit verbreitete Gebärmutterhalskrebszellen. Sie sind hervorragende Transfektionswirte und eignen sich daher für Genexpressionsstudien. Aufgrund ihres menschlichen Ursprungs und ihrer Relevanz für Gebärmutterhalskrebs werden diese Zellen vor allem in der Krebsbiologie, Virologie und in Studien zur Arzneimittelentwicklung eingesetzt.
Allgemeine Merkmale und Herkunft von SiHa-Zellen
Das Verständnis der Herkunft und der allgemeinen Eigenschaften einer Zelllinie ist von entscheidender Bedeutung, da es ihre Verwendung in Ihrer Forschung beeinflusst. In diesem Artikel erfahren Sie mehr über die Herkunft der SiHa-Zelllinie, ihre charakteristischen Merkmale und vieles mehr: Was ist die SiHa-Krebszelllinie? Was sind SiHa-Zellen HPV? Was ist der Ursprung der SiHa-Zelllinie? Was ist die Morphologie von SiHa?
- Die Zervixkarzinom-Zelllinie SiHa wurde aus Fragmenten einer primären Gebärmutterbiopsie einer asiatischen Frau (55 Jahre alt) mit Plattenepithelkarzinom gewonnen [1].
- Die SiHa-Zelllinie weist einen hypertriploiden Karyotyp auf. Die meisten Zellen haben eine durchschnittliche Chromosomenzahl zwischen 69 und 72. Etwa 24 % der Zellen besitzen jedoch eine modale Chromosomenzahl von 71.
- SiHa-Zellen sind positiv für das humane Papillomavirus 16. Sie weisen eine Integration von etwa 1 bis 2 Kopien des HPV-Genoms pro Zelle auf [2].
- Diese Gebärmutterhalskrebszellen weisen eine epitheliale Morphologie auf.
SiHa-Zelllinie: Informationen zur Kultivierung
Die Aufrechterhaltung einer Zelllinienkultur ist nicht einfach, wenn Sie nicht alle wichtigen Punkte für die Kultivierung der Zelllinie kennen. Das sollten Sie wissen: Was ist die Verdopplungszeit von SiHa? Was ist ein SiHa-Zellmedium? Wie kultiviert man die SiHa-Zelllinie?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von SiHa-Zellen
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Verdopplungszeit: |
Die Verdoppelungszeit für SiHa-Zellen beträgt etwa 17 Stunden. |
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Adhärent oder in Suspension: |
SiHa ist eine adhärente Zelllinie. |
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Subkultivierungsverhältnis: |
Das Subkultivierungsverhältnis für SiHa-Zellen beträgt 1:2 bis 1:4. Zum Passagieren werden die adhärenten Zellen mit 1x PBS gespült. Accutase-Lösung wird zugegeben, und die Zellen werden 8 bis 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend wird Kulturmedium zugegeben, und die Zellen werden zentrifugiert. Das Zellpellet wird resuspendiert, und die Zellen werden zur Kultivierung in einen neuen Kolben gegeben. |
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Wachstumsmedium: |
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) mit 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 und Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) wird für das ideale Wachstum von SiHa-Zellen verwendet. Das Medium wird 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht. |
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Wachstumsbedingungen: |
SiHa-Zellen werden in einem befeuchteten 37°C-Inkubator mit 5% CO2-Zufuhr gehalten. |
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Lagerung: |
Die gefrorenen SiHa-Zelllinien werden bei einer Temperatur von unter -150°C in einem elektrischen Gefrierschrank oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff für einen längeren Zeitraum gelagert. |
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Einfrierprozess und Medium: |
Für das Einfrieren von SiHa-Zellen wird CM-1- oder CM-ACF-Einfriermedium verwendet. Die Zellen werden mit einer langsamen Gefriermethode eingefroren, die nur eine Abnahme von 1 °C pro Minute zulässt, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu schützen. |
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Auftauprozess: |
Die eingefrorenen Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem 37 °C warmen Wasserbad gehalten, bis ein kleiner Eisklumpen übrig bleibt. Anschließend wird frisches Wachstumsmedium zugegeben, und die Zellen werden zentrifugiert, um die Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Das Zellpellet wird resuspendiert, und die Zellen werden zum Wachstum in eine Kulturflasche gegeben. |
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Biosicherheitsstufe: |
Für die Handhabung und Pflege von SiHa-Zellkulturen ist ein Labor der Biosicherheitsstufe 1 erforderlich. |
Vorteile und Nachteile der SiHa-Zelllinie
Wie andere menschliche Karzinomzelllinien weist auch SiHa einige besondere Merkmale auf, die mit bestimmten Vor- und Nachteilen verbunden sind. Im Folgenden werden einige der wichtigsten davon erörtert.
Vorteile der SiHa-Zelllinie für Gebärmutterhalskrebs
- Gebärmutterhalskrebs-Modell
- Abgeleitet vom Plattenepithelkarzinom des Gebärmutterhalses.
- Wird verwendet, um die Mechanismen, das Wachstum und die Entwicklung von Gebärmutterhalskrebs zu untersuchen.
- Expressiert die Gene p53+ und pRB+, die mit der DNA-Reparatur, der Zellzyklusregulation und der Tumorsuppression zusammenhängen.
- Tumorigenes Potenzial
- SiHa-Zellen sind tumorerzeugend und können in Nacktmäusen schlecht differenzierte Epidermoidtumoren des Grades III hervorrufen.
- Sie werden für die In-vivo-Krebsforschung und die Erprobung von Krebsbehandlungen verwendet.
Nachteile von SiHa-Zellen
- Proliferationsrate
- SiHa-Zellen vermehren sich schnell, was zu übermäßigem Wachstum führt.
- Erfordert häufiges Passagieren, was das Risiko einer genetischen Instabilität erhöht, die sich mit der Zeit auf das Zellverhalten auswirken kann.
Forschungsanwendungen von SiHa-Zellen
Die SiHa-Zelllinie wird in der Gebärmutterhalskrebsforschung häufig verwendet. Einige spezifische Anwendungen dieser Zelllinie werden hier erörtert.
- Studien zum humanen Papillomavirus (HPV): SiHa-Zellen sind HPV-16-positiv und daher wertvolle Entitäten für die Untersuchung der Infektion mit dem humanen Papillomavirus, seiner molekularen Mechanismen und seiner Rolle bei der Entwicklung und dem Fortschreiten von Gebärmutterhalskrebs. Die Forscher nutzen diese Zellen auch, um die Virusreplikation, die Integration und die Auswirkungen auf die Prozesse der Wirtszellen zu untersuchen. In einer 2020 durchgeführten Studie wurde die SiHa-Zelllinie verwendet, um die Rolle der HPV E6/E7-Onkoproteine bei der Entstehung von Gebärmutterhalskrebs zu untersuchen, indem sie mit der CRISPR-Technologie gezielt ausgeschaltet wurden. Die Ergebnisse zeigten, dass die Ausschaltung der E6/E7-Gene das Wachstum der SiHa-Zellen hemmt und zur Apoptose führt. Daher könnten diese viralen Gene als entscheidende Angriffspunkte für die Entwicklung von Therapien gegen HPV-assoziierten Gebärmutterhalskrebs dienen [3].
- Krebsbiologie: SiHa-Zellen sind ein wertvolles Modell für die Untersuchung der Biologie von Gebärmutterhalskrebs, einschließlich Krebsentwicklung, -progression, -metastasierung und -invasion. Forscher nutzen diese Zellen, um die genetischen Mutationen und die zugrundeliegenden molekularen Pfade zu erforschen, die zur Entwicklung und zum Wachstum von Gebärmutterhalskrebs beitragen. So wurde in einer Studie mit SiHa-Zellen festgestellt, dass hochreguliertes SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) die Proliferation von Gebärmutterhalskrebszellen durch Aktivierung der MAPK-Kaskade fördert [4].
- Wirkstoffscreening und -tests: SiHa ist eine weit verbreitete Gebärmutterhalskrebslinie, mit der die Wirksamkeit potenzieller Krebsmedikamente speziell gegen HPV-assoziierten Gebärmutterhalskrebs untersucht wird. Forscher untersuchen mit diesen Zellen das antiproliferative, apoptotische und anti-metastatische Potenzial von Medikamenten. In einer 2019 durchgeführten Studie wurde beispielsweise das zytotoxische Potenzial von Fruchtextrakten aus Vatica diospyroides Symington Typ SS auf die SiHa-Zelllinie für Gebärmutterhalskrebs untersucht [5].
SiHa-Zellen für Ihre Forschung!
Forschungspublikationen mit SiHa-Zellen
Einige wichtige und häufig zitierte Forschungspublikationen befassen sich mit der SiHa-Zelllinie für Plattenepithelkarzinome des Gebärmutterhalses.
Diese Veröffentlichung in OncoTargets and Therapy (2019) schlug vor, dass eine natürliche Verbindung, Aloe-Emodin, HPV E6/E7- und Glukosestoffwechsel-assoziierte apoptotische Effekte in SiHa-Gebärmutterhalskrebszellen ausübt.
Dieser Artikel wurde im Future Journal of Pharmaceutical Sciences im Jahr 2022 veröffentlicht. Diese Studie untersuchte die Anti-Tumor-Aktivitäten des Blattextrakts von Excoecaria agallocha (L.) bei der SiHa-Zelllinie für Gebärmutterhalskrebs.
In dieser im Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) veröffentlichten Studie wird vorgeschlagen, dass das 1,10-Phenanthrolin-Molekül nach Kopplung mit Zinksulfat-Nanopartikeln eine signifikante antiproliferative Wirkung auf SiHa-Zellen ausübt.
Diese Forschungsarbeit wurde 2019 in den Oncology Reports veröffentlicht. Die Studie zeigte, dass Astragalosid IV, ein Naturprodukt, die Migration und Invasion von SiHa-Zellen durch Modulation der TGF-β1-vermittelten PI3K- und MAPK-Signalwege unterdrückt.
Diese in Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) veröffentlichte Studie zeigt, dass IFI16 (Interferon-Gamma-induzierbares Protein 16) das PD-L1-Gen über die Aktivierung des STING-TBK1-NF-kB-Signalwegs reguliert und so das Wachstum von SiHa-Gebärmutterhalskrebszellen fördert.
Ressourcen für die SiHa-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
Hier finden Sie einige Online-Ressourcen zu den SiHa-Zellen.
- Transfektion von SiHa-Zellen: Dieser Forschungsartikel enthält ein Protokoll für die Aufrechterhaltung von SiHa-Zellen für Gebärmutterhalskrebs und für die Transfektion von SiHa-Zellen.
Der folgende Link enthält Informationen zur Zellkultur von SiHa-Zellen.
- SiHa-Zelllinie: Diese Website enthält viele wertvolle Daten über die SiHa-Zelllinie. Dazu gehören Informationen über Wachstumsmedien, Kultivierungsbedingungen, Protokolle für die Subkultivierung von SiHa-Zellen und die Handhabung ihrer proliferativen und kryokonservierten Kulturen.
FAQs für SiHa-Zervixkarzinomzellen
Referenzen
- Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem Cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., Untersuchung des Einflusses des hochriskanten humanen Papillomavirus auf die biochemische Zusammensetzung von Gebärmutterhalskrebszellen mittels Schwingungsspektroskopie. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., SEC61G fördert die Proliferation von Gebärmutterhalskrebs durch Aktivierung des MAPK-Signalweges. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines. The Scientific World Journal, 2019. 2019.