HT22-Zelllinie
HT22 ist eine neuronale Zelllinie der Maus, die häufig in der neurowissenschaftlichen Forschung eingesetzt wird. Sie ist wertvoll für die Untersuchung neurogenerativer Erkrankungen und die Prüfung potenzieller neuroprotektiver Therapien oder Behandlungen. Außerdem sind die HT22-Zellen glutamatempfindlich und werden daher zur Untersuchung der durch Glutamat verursachten Toxizität oder neuronalen Schädigung verwendet.
Dieser Artikel beleuchtet die wichtigsten Aspekte von HT22-Zellen, die Sie bei Ihrer Forschungsarbeit unterstützen können. Er wird hauptsächlich Folgendes behandeln:
- Allgemeine Eigenschaften und Herkunft von HT22-Zellen
- Informationen zur Kultivierung der HT22-Zelllinie
- Vorteile und Nachteile der HT22-Zelllinie
- Forschungsanwendungen der HT22-Zelllinie
- Forschungspublikationen, die HT22-Zellen verwenden
- Ressourcen für HT22-Zellen: Protokolle, Videos und mehr
1. Allgemeine Eigenschaften und Herkunft von HT22-Zellen
In diesem Abschnitt des Artikels werden die Herkunft und die allgemeinen Eigenschaften von HT22-Zellen beleuchtet. Die Kenntnis dieser Informationen über eine Zelllinie ist notwendig, bevor Sie mit der Arbeit an ihr beginnen. In diesem Abschnitt erfahren Sie: Was sind HT22-Zellen? Wie ist die Morphologie der HT22-Hippocampuszellen? Wie groß sind HT22-Zellen?
HT22 ist eine kontinuierliche Zelllinie, die aus der Hippocampusregion des Mäusegehirns stammt. Sie ist ein Subklon der elterlichen HT-4-Zelllinie, die durch Immortalisierung von neuronalem Gewebe der Maus mittels eines temperaturempfindlichen Polyomavirus Simian Virus 40 (SV40) T-Antigens entwickelt wurde.
Diese Zellen unterscheiden sich von reifen Hippocampuszellen, da ihnen Glutamat- und cholinerge Rezeptoren wie reifen Neuronen hippocampalen Ursprungs fehlen. Daher eignen sie sich nicht für gedächtnisbezogene Forschungsstudien [1].
HT22-Zellen haben ein epitheliales, zellähnliches Aussehen.
2. Informationen zur Kultivierung der HT22-Zelllinie
HT22-Zellen werden in neurowissenschaftlichen Forschungslabors verwendet. Bevor sie diese Zellen kultivieren, suchen Forscher nach wesentlichen Informationen zur Zellkultur, die ihre Arbeit einfach und effizient machen. In diesem Abschnitt werden alle wichtigen Punkte zur Kultivierung von HT22-Zellen behandelt. Sie werden wissen: Was ist die Verdopplungszeit von HT22-Zellen? Wie kultiviert man HT22-Zellen? Was ist das HT22-Zellkulturprotokoll? Was ist das HT22-Zellmedium?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von HT22-Zellen
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Verdopplungszeit: |
Die Verdopplungszeit von HT22-Zellen beträgt etwa 15 Stunden. |
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Adhärent oder in Suspension: |
HT22-Zellen sind adhärent. |
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Sub-Kultivierungs-Verhältnis: |
Das Subkultivierungsverhältnis für HT22-Hippocampuszellen beträgt 1:3 bis 1:6. Kurz gesagt, wird das Medium entfernt und die adhärenten Zellen werden mit 1 x PBS gespült. Die Accutase-Dissoziationslösung wird in den Kolben gegeben, und die Zellen werden 8 bis 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend wird frisches Kulturmedium zugegeben, und die Zellen werden in einem Fläschchen gesammelt und zentrifugiert. Das erhaltene Zellpellet wird vorsichtig resuspendiert, und die Zellen werden zum Wachstum in eine Kulturflasche gegeben. |
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Wachstumsmedium: |
Für die Kultivierung von HT22-Zellen wird DMEM-Medium verwendet. Es wird mit 10% FBS, 4,5 g/L Glucose, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 und 1,0 mM Natriumpyruvat für ein optimales Zellwachstum ergänzt. |
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Wachstumsbedingungen: |
HT22-Zellkulturen werden in einem befeuchteten Inkubator (37 °C Temperatur) mit einer 5%igenCO2-Zufuhr gehalten. |
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Lagerung: |
Gefrorene HT22-Zellen können bei einer Temperatur von unter -150 °C entweder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder in einem elektrischen Ultratiefkühlschrank langfristig gelagert werden. |
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Einfrierprozess und Medium: |
HT22-Zellen können in CM-1- oder CM-ACF-Medien mit einem langsamen Einfrierverfahren eingefroren werden. Bei diesem Verfahren sinkt die Temperatur der Probe nur um 1 °C pro Minute, was die Zellen vor Schock schützt und ihre Lebensfähigkeit erhält. |
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Auftauprozess: |
Die Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem 37 °C warmen Wasserbad aufgetaut, bis nur noch ein kleiner Eisklumpen übrig ist. Anschließend werden die Zellen mit Kulturmedium versetzt und zentrifugiert, um die Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Das Zellpellet wird resuspendiert und die Zellen werden in einen neuen Kolben mit Kulturmedium gegeben. Anschließend werden die Zellen mindestens 24 Stunden lang bei 37 °C in einem Brutschrank bebrütet. |
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Biosicherheitsstufe: |
Für die Kultivierung von HT22-Zellen sind Laborbedingungen der Biosicherheitsstufe 1 vorgeschrieben. |
3. Vorteile und Nachteile der HT22-Zelllinie
HT22-Hippocampus-Zellen weisen einige Vor- und Nachteile auf, die sie von anderen neuronalen Zelllinien unterscheiden. Einige bemerkenswerte Vor- und Nachteile der Zelllinie werden hier genannt.
Vorteile
Die Vorteile der murinen neuronalen HT22-Zelllinie sind:
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Schnelle Wachstumsrate
HT22-Zellen haben eine Verdopplungszeit von 15 Stunden, was schnelle und effiziente Experimente ermöglicht und zu zeitnahen Forschungsergebnissen beiträgt.
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Immortalisierung
HT22 ist eine immortalisierte Zelllinie, die ein kontinuierliches Wachstum über längere Zeiträume gewährleistet. Dies sorgt für eine konstante Verfügbarkeit von Zellen, reduziert den Zeit- und Kostenaufwand und erleichtert Langzeitexperimente mit konsistenten Ergebnissen.
Nachteile
Die Nachteile von HT22-Zellen sind:
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Muriner Ursprung
Die HT22-Zelllinie wurde aus dem Hippocampus-Gewebe des Mäusegehirns gewonnen, das die Komplexität der Physiologie und des Verhaltens menschlicher Nervenzellen möglicherweise nicht vollständig repräsentiert, was ihre translationale Relevanz einschränkt.
4) Forschungsanwendungen der HT22-Zelllinie
Die HT22-Zellen werden in der neurobiologischen Forschung ausgiebig verwendet. Einige vielversprechende Anwendungen dieser Zelllinie werden in diesem Abschnitt des Artikels erörtert:
- Neurowissenschaftliche Forschung: HT22-Zellen werden häufig in der Forschung zu neurodegenerativen Erkrankungen, d. h. Alzheimer und Parkinson, eingesetzt. Sie gelten als wertvolles Forschungsinstrument zur Untersuchung der Neurotoxizität und der Mechanismen des oxidativen Stresses im Zusammenhang mit diesen Krankheiten. In einer im Jahr 2020 durchgeführten Studie wurde festgestellt, dass der PI3K/AKT/CREB-Signalweg an der durch Hyperglykämie ausgelösten neuronalen Toxizität in HT22-Zellen beteiligt ist [2]. In ähnlicher Weise schlug eine neuere Studie vor, dass der Nrf2/HO-1-Signalweg und die NF-κB-Signalachse eine wichtige Rolle bei der HT22-Amyloid-Beta-Toxizität spielen [3].
- Wirkstoff-Screening: HT22-Zellen werden in großem Umfang für Arzneimitteltests und -screenings verwendet. Sie helfen Forschern bei der Identifizierung potenzieller Therapeutika mit neuroprotektiver Wirkung zur Bekämpfung neurodegenerativer Erkrankungen. Eine 2019 durchgeführte Studie untersuchte das neuroprotektive Potenzial der Tetrahydro-Curcumin-Verbindung in Glutamat-behandelten HT22-Hippocampuszellen. Darin induziert Glutamat oxidativen Stress in HT22-Zellen und verursacht den Zelltod durch die Aktivierung von mitogen-aktivierten Proteinkinasen [4].
5. Forschungspublikationen mit HT22-Zellen
Hier finden Sie einige interessante Forschungsarbeiten, in denen die HT22-Zelllinie verwendet wird:
In dieser Studie im International Journal of Molecular Medicine (2019) wurde das neuroprotektive Potenzial von Crocin, einer aus Crocus sativus L. isolierten Verbindung, in denL-Glutamat-geschädigtenHT22-Zellen untersucht.
Diese Veröffentlichung in Neuropharmacology (2018) berichtet, dass Oxindol-Derivate vor dem durch oxidativen Stress induzierten HT22-Zelltod schützen.
Diese Forschungsarbeit wurde 2019 im Journal of Ginseng Research veröffentlicht. Diese Studie untersuchte die neuroprotektiven Wirkungen eines Naturprodukts, Ginsenosid Rb2, anhand der HT22-Zelllinie. Die Studie ergab, dass Ginsenosid Rb2 den Glutamat-induzierten oxidativen Stress und den Zelltod in Hippocampuszellen der Maus HT22 wirksam reduzierte.
Diese Studie in Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) untersuchte das zytotoxische Potenzial von Silbernanopartikeln in der HT22-Zelllinie.
Ferrostatin-1 schützt HT-22-Zellen vor oxidativer Toxizität
Dieser Forschungsartikel wurde im Jahr 2020 in der Zeitschrift Neural regeneration research veröffentlicht. Darin wird vorgeschlagen, dass Ferrostatin-1, ein Inhibitor der Ferroptose, die oxidative Toxizität in HT22-Hippocampuszellen verhindert.
6. Ressourcen für HT22-Zellen: Protokolle, Videos und mehr
Einige Online-Ressourcen zu HT22-Zellen erklären deren Transfektion, Differenzierung und Zellkulturprotokolle:
- HT22-Transfektion: Dieses Dokument enthält ein optimiertes Protokoll für die HT22-Transfektion in 24- und 96-Well-Zellkulturplatten.
- HT22-Zelldifferenzierung: Dieser Artikel enthält eine umfassende Anleitung für das HT22-Differenzierungsprotokoll.
Der folgende Link enthält das HT22-Zellkulturprotokoll:
- Subkultivierung von HT22-Zellen: Dieser Link hilft Ihnen, das Subkultivierungsprotokoll für die HT22-Zelllinie zu lernen. Außerdem hilft er Ihnen, das Protokoll für die Induktion von Neurotoxizität in den Zellen zu lernen.
- HT22 Hippocampus-Zellen: Diese Website enthält viele nützliche Informationen über die Verdopplungszeit von HT22-Zellen, Medien und Zellkulturprotokolle.
Referenzen
- He, M., et al., Differentiation makes susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin schützt HT22-Zellen vor einer durch hohe Glukose induzierten Neurotoxizität über den PI3K/Akt/CREB-Signalweg. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Neuroprotektive Effekte von Tetrahydrocurcumin gegen Glutamat-induzierten oxidativen Stress in hippocampalen HT22-Zellen. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.