BxPC-3-Zelllinie
BxPC-3 ist eine Zelllinie für Bauchspeicheldrüsenkrebs, die vom Menschen stammt. Sie wird in der Krebsforschung in großem Umfang eingesetzt. Forscher verwenden diese Zellen hauptsächlich, um die Biologie von Bauchspeicheldrüsenkrebs zu untersuchen, therapeutische Ziele zu identifizieren und Krebsmedikamente zu entwickeln.
Dieser Artikel enthält wichtige Informationen über die BxPC-3-Zelllinie, die Ihnen bei der Arbeit mit ihr helfen können. Im Wesentlichen wird er Folgendes behandeln:
- Allgemeine Informationen und Herkunft der BxPC-3-Zelllinie
- Kultivierung von BxPC-3-Zellen
- BxPC-3-Zelllinie: Vorteile und Beschränkungen
- Anwendungen von BxPC-3-Zellen in der Forschung
- Forschungspublikationen über BxPC-3-Zellen
- Ressourcen für die BxPC-3-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
1. allgemeine Informationen und Herkunft der BxPC-3-Zelllinie
Die Kenntnis der Herkunft einer Zelllinie ist entscheidend für ihre Anwendbarkeit in der Forschung. Die Kenntnis ihrer Eigenschaften, einschließlich Morphologie, Zellgröße und Ploidie, macht ihre Verwendung einfacher und bequemer. Im Folgenden erfahren Sie mehr über den Ursprung und die allgemeinen Eigenschaften von BxPC-3-Zellen: Was sind BxPC-3-Zellen? Was ist die BxPC-3-Zelllinie? Was ist der Ursprung der BxPC-3-Zelllinie? Wie sieht die Morphologie von BxPC-3 aus?
- BxPC-3, menschliche Pankreaskarzinomzellen, wurden 1986 von einer 61-jährigen Europäerin mit einem Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse gewonnen. Diese Zellen erwiesen sich auch nach mehreren Radio- und Chemotherapien als tumorigene Zellen. Die etablierte Zelllinie ist daher ein unschätzbares Modell für die Untersuchung der Krebsentwicklung und -progression.
- BxPC-3-Zellen besitzen eine epithelialzellähnliche Morphologie.
- Die modale Chromosomenzahl für BxPC-3 ist 59. Diese Zellen haben eine homozygote Deletion auf Chromosom 18q, das für das SMAD4/DPC4-Protein kodiert. Außerdem fehlt der Zelllinie die bei Pankreastumoren übliche BxPC-3-Kras-Mutation. In diesen Bauchspeicheldrüsenkrebszellen findet sich auch eine BxPC-3 braf-Deletion.
Was ist der Unterschied zwischen BxPC3 und PANC-1?
BxPC-3 PADC (pancreatic ductal adenocarcinoma) und PANC-1 Zellen sind primäre Pankreaskrebs-Zelllinien mit epithelialer Morphologie. Dabei weisen erstere Zellen eher epithelähnliche Eigenschaften auf, während letztere eher mesenchymale Merkmale aufweisen [1].
2. kultivierung von BxPC-3-Zellen
Die BxPC-3-Zelllinie wird häufig in Krebsforschungslabors verwendet. Für eine effiziente Kultivierung dieser Zelllinie für Bauchspeicheldrüsenkrebs müssen Sie die folgenden Schlüsselpunkte kennen. Sie werden lernen: Wie lang ist die Verdopplungszeit von bxpc3? Wie kultiviert man die BxPC-3-Zelllinie?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von BxPC-3-Zellen
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Verdopplungszeit der Population: |
Die Verdopplungszeit von BxPC-3-Zellen liegt zwischen 48 und 60 Stunden. |
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Adhärent oder in Suspension: |
BxPC-3 ist eine adhärente Zelllinie. |
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Teilungsverhältnis: |
BxPC-3-Zellen werden in einem Verhältnis von 1:2 bis 1:4 subkultiviert. Die Zellen werden mit 1 x PBS gewaschen und mit einer Passagierlösung namens Accutase inkubiert. Nach 8-10 Minuten wird den Zellen frisches Medium zugesetzt, und die Zellen werden zentrifugiert. Das Pellet wird erneut in Medium resuspendiert, und die Zellen werden zum Wachstum in ein neues Kulturgefäß gegossen. |
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Wachstumsmedium: |
Für die Kultivierung der BxPC-3-Zelllinie wird RPMI 1640-Medium verwendet. Es wird mit 10 % fötalem Rinderserum, 2,1 mM stabilem Glutamin und 2,0 g/L NaHCO3 ergänzt, um ein ideales Zellwachstum zu erreichen. Die Medien sollten 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden. |
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Wachstumsbedingungen: |
BxPC-3-Zellkulturen werden in einem befeuchteten Inkubator bei 37 °C gehalten, der an eine 5%ige CO2-Zufuhr angeschlossen ist. |
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Lagerung: |
Eingefrorene Zellen werden im Allgemeinen bei einer Temperatur unter -150 °C oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu schützen. |
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Einfrierverfahren und Medium: |
Zum Einfrieren von BxPC-3-Zellkulturen kann CM-1 oder CM-ACF verwendet werden. Es wird ein langsames Einfrierverfahren angewandt, das nur einen Temperaturabfall von 1 °C zulässt, um einen Schock der Zellen zu vermeiden. |
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Auftauprozess: |
Eingefrorene BxPC-3-Zellen werden in einem voreingestellten Wasserbad bei 37 °C für 40 bis 60 Sekunden aufgetaut. Nachdem ein kleiner Eisklumpen zurückgeblieben ist, werden die Zellen mit frischem Kulturmedium versetzt und zentrifugiert, um gefrierende Medienbestandteile zu entfernen. Dann wird das Zellpellet resuspendiert, und die Zellen werden zum Wachstum in den Kolben gegeben. |
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Biosicherheitsstufe: |
BxPC-3-Zellkulturen werden in Labors der Biosicherheitsstufe 1 gehalten. |
3. bxPC-3-Zelllinie: Vorteile und Beschränkungen
BxPC-3 ist eine bekannte Adenokarzinom-Zelllinie der Bauchspeicheldrüse, die mehrere Vorteile und Einschränkungen aufweist. Die wichtigsten Vor- und Nachteile der Zelllinie sind hier aufgeführt.
Vorteile
Die wichtigsten Vorteile von BxPC-3-Zellen sind:
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In-vitro-Modell für Bauchspeicheldrüsenkrebs
BxPC-3-Zellen, die von Patienten mit Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse stammen, weisen relevante Eigenschaften auf, die sie zu einem geeigneten Modell für die Untersuchung des Verhaltens von Bauchspeicheldrüsenkrebs in vitro machen.
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Tumorigene Zelllinie
BxPC-3-Zellen besitzen tumorerzeugende Eigenschaften und können Tumore bilden, wenn sie in nackte oder immungeschwächte Mäuse injiziert werden. Diese Tumore sind primären Adenokarzinomen der Bauchspeicheldrüse sehr ähnlich, so dass sich das BxPC-3-Xenograft-Modell ideal für die Untersuchung von Krebswachstum und -progression eignet.
Beschränkungen
Die mit der BxPC-3-Zelllinie verbundenen Einschränkungen sind:
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Kreuzkontamination
Die BxPC-3-Zelllinie birgt wie jede andere ein Risiko der Kreuzkontamination. Forscher sollten beim Umgang mit diesen Zellen Vorsicht walten lassen und sich an strenge Protokolle zur Vermeidung von Kontaminationen halten.
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Langsame Wachstumsrate
BxPC-3-Zellen weisen eine relativ langsame Proliferationsrate auf, mit einer Verdopplungszeit zwischen 48 und 60 Stunden. Diese Eigenschaft kann bei bestimmten Experimenten längere Inkubationszeiten erfordern, was zu Verzögerungen im Forschungsfortschritt führen kann.
4. anwendungen von BxPC-3-Zellen in der Forschung
BxPC-3-Zellen bieten zahlreiche Anwendungsmöglichkeiten in der Krebsforschung. Die häufigsten Anwendungen sind:
- Bauchspeicheldrüsenkrebsforschung: BxPC-3-Zellen imitieren das Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse und werden daher zur Erforschung der genetischen und molekularen Mechanismen verwendet, die der Tumorentwicklung und dem Wachstum zugrunde liegen. Darüber hinaus entdecken die Forscher mit diesen Zellen neue Biomarker und therapeutische Ziele. Darüber hinaus exprimieren BxPC-3-Zellen in erheblichem Maße angiogene Faktoren, d. h. Interleukin-8 (IL-8), Prostaglandin E2 (PGE2) und den vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF), was sie für die Untersuchung der Angiogenese geeignet macht. Die Angiogenese ist ein entscheidender Prozess, der mit dem Wachstum und der Metastasierung von Krebs in Verbindung steht. In einer 2022 veröffentlichten Studie wurde untersucht, dass die Überexpression von Laminin-5 gamma-2 (LAMC2) in BxPC3-PDAC (duktales Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse) dessen Tumorigenese über die Regulierung des EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR-Signalweges fördert [2].
- Entdeckung und Entwicklung von Medikamenten: Die BxPC-3-Zelllinie dient als unschätzbares Modell für die Prüfung von Krebsmedikamenten. Forscher untersuchen die zytotoxische, anti-metastatische und apoptotische Wirkung potenzieller Medikamente auf BxPC-3-PDAC. Eine von Alexandria Turner und Kollegen im Jahr 2020 durchgeführte Studie untersuchte die apoptotischen Eigenschaften von Fruchtextrakten aus Elaeocarpus reticulatus in BxPC-3-Pankreaskrebszellen [3]. In ähnlicher Weise wurde im Jahr 2020 das krebshemmende Potenzial eines methanolischen Extrakts einer Pflanze namens Oxialis obtriangulata in BxPC-3-Zellen untersucht. Außerdem untersuchten die Forscher den zellmechanistischen Weg, über den der Pflanzenextrakt therapeutische Wirkungen entfaltet [4].
5.forschungspublikationen über BxPC-3-Zellen
In diesem Abschnitt sind einige der am häufigsten zitierten und interessantesten Veröffentlichungen aufgeführt, in denen die BxPC-3-Zelllinie behandelt wird.
Licocoumaron induziert den Tod von BxPC-3-Pankreas-Adenokarzinomzellen durch Hemmung von DYRK1A
Diese Veröffentlichung in Chemico-Biological Interactions (2020) untersuchte die apoptotischen Wirkungen eines Naturprodukts, Licocoumaron, auf BxPC-3-Pankreaskrebszellen.
Dieser Forschungsartikel wurde in Anticancer Research (2022) veröffentlicht. Die Studie legt nahe, dass Hydroxychloroquin den Zelltod von BxPC3 durch Hemmung des BCL-XL-Gens verursacht.
Diese Forschungsarbeit wurde 2020 im Journal of Cellular Biochemistry veröffentlicht. Die Studie besagt, dass ein natürlicher Wirkstoff, Salidrosid, in BxPC-3-Zellen krebshemmend wirkt, indem er die Signalkaskade von HIF-1α (hypoxia-inducible factor) und LOXL2 reguliert.
Dieser Artikel in der Zeitschrift Biomedicine & Pharmacotherapy legt nahe, dass Ibrutinib bei Patienten mit Bauchspeicheldrüsenkrebs als ein hervorragender Radiosensibilisator eingesetzt werden kann. In vitro-Studien an BxPC-3-Zellen deuten darauf hin, dass Ibrutinib die EGFR-Phosphorylierung von BxPC3 sowie die Expression von pAKT und nachgeschalteten Genen, die durch die Strahlentherapie hochreguliert werden, verringert.
Diese Studie in der Zeitschrift Integrative Cancer Therapies zeigt, dass das Naturprodukt Chelidonin in menschlichen Bauchspeicheldrüsenzellen BxPC-3 über die Regulierung von BxPC3 p53 und GADD45a-Signalen eine apoptotische Wirkung entfaltet.
6. ressourcen für die BxPC-3 Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
Die BxPC-3-Zelllinie hat viele bestechende Vorteile, die sie für die Forschung geeignet machen. Viele Online-Ressourcen über die BxPC-3-Zelllinie erwähnen ihre Handhabung, Wartung und Transfektionsprotokolles.
- BxPC3-Transfektion: Dieses Video ist eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zum Erlernen des Transfektionsprotokolls für BxPC-3-Zellen.
Dieser Abschnitt des Artikels enthält einige Links, die BxPC3-Zellkulturprotokolle erklären.
- BxPC3-Zellkultur: Auf dieser Website finden Sie Protokolle für die Subkultivierung und den Umgang mit kryokonservierten und proliferativen BxPC-3-Kulturen.
Referenzen
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Zelluläre und molekulare Lebenswissenschaften, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro. Molekularbiologische Berichte, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-Krebs-Potenzial von Oxialis obtriangulata in Bauchspeicheldrüsenkrebszellen durch Regulierung des ERK/Src/STAT3-vermittelten Weges. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.