LN229-Zellen








Allgemeine Informationen
Beschreibung | LN229 ist eine humane Glioblastom-Zelllinie, die von einer 60-jährigen weißen Patientin mit Glioblastoma multiforme (GBM), insbesondere aus dem rechten frontalen parieto-okzipitalen Kortex, stammt. Das Glioblastom ist eine der aggressivsten und tödlichsten Formen von Hirnkrebs, und LN229-Zellen werden in der Forschung intensiv genutzt, um die molekularen Grundlagen der Krankheit zu verstehen und potenzielle therapeutische Strategien zu entwickeln. Die Zellen weisen eine epithelähnliche Morphologie und adhärente Wachstumseigenschaften auf, was sie ideal für In-vitro-Studien macht. Aufgrund ihres hohen tumorerzeugenden Potenzials bilden sie bei der Injektion in Nacktmäuse leicht Tumore, was sie zu einem robusten Modell für die Krebsforschung macht. Eines der entscheidenden Merkmale der LN229-Zellen ist das Vorhandensein eines mutierten p53-Gens (TP53) mit einer spezifischen CCT (Pro)-zu-CTT (Leu)-Mutation am Codon 98. Diese Mutation trägt wesentlich zum aggressiven Verhalten und zur Apoptoseresistenz der Zelllinie bei. Darüber hinaus haben LN229-Zellen ein Wildtyp-PTEN-Gen, aber sie weisen homozygote Deletionen in den Tumorsuppressorgenen p16 und p14ARF auf, die den Zellzyklus und die Apoptose entscheidend regulieren. Diese genetischen Veränderungen machen LN229 zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der Auswirkungen dieser Mutationen auf die Tumorbiologie und die Therapieresistenz. LN229-Zellen sind besonders nützlich für Apoptose-Studien. Nach Stimulation mit Fas-Ligand werden sie apoptotisch, wobei der Zelltod innerhalb von 16 Stunden eintritt. Interessanterweise kann die Expression von Bcl-2 die LN229-Zellen zwar vor der durch den Fas-Liganden ausgelösten Apoptose schützen, sie bietet jedoch nur einen begrenzten Schutz vor der durch den Proteinsynthesehemmer Puromycin ausgelösten Apoptose. Dieses selektive Resistenzmuster macht die LN229-Zellen zu einem wichtigen Modell für das Verständnis der molekularen Mechanismen der Apoptose beim Glioblastom und für die Prüfung potenzieller apoptosemodulierender Therapien. Wie alle In-vitro-Forschungsmodelle sind auch die LN229-Zellen nicht für therapeutische oder In-vivo-Anwendungen geeignet. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Gehirn, rechter frontaler parieto-okzipitaler Kortex |
Krankheit | Glioblastom |
Synonyme | LN 229, LN229, LNT-229 |
Merkmale
Alter | 60 Jahre |
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Geschlecht | Weiblich |
Ethnizität | Europäisch |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | LN229 (Cytion-Katalognummer 305043) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Handhabung
Nährboden | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Verdopplungszeit | 31 Stunden |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:5 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | Verwenden Sie als Kryokonservierungsmedium ein komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren. |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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