BV2-Zellen
Einblicke in BV2-Zellen
Beschreibung | BV2-Zellen sind eine Art von Mikroglia-Zelllinie, die von der C57BL/6-Maus stammt, einem weit verbreiteten Labormausstamm für Tierversuche. Diese Mikrogliazellen wurden mit Hilfe des J2-Retrovirus immortalisiert, das die Onkogene v-raf und v-myc trägt, was zu einer stabilen Zelllinie mit einzigartigen Eigenschaften führte. BV2-Zellen exprimieren nukleäre v-myc- und zytoplasmatische v-RAF-Onkogene sowie das env gp70-Antigen auf ihrer Oberfläche, was zu ihrer Rolle bei Immunreaktionen und Entzündungen im Gehirn beiträgt. Einer der entscheidenden Vorteile von BV2-Zellen ist ihre Fähigkeit, die morphologischen und funktionellen Merkmale primärer Mikroglia, der ansässigen Immunzellen des Zentralnervensystems, beizubehalten, was sie zu einem idealen Modell für die Untersuchung von Neurodegeneration und Gehirnentzündungen macht. Die Rolle der Mikroglia bei der Neurodegeneration, Toxikologie und Immunität, insbesondere bei Erkrankungen wie der Alzheimer-Krankheit, ist ein ständig wachsendes Feld in der biomedizinischen Forschung. Traditionelle Studien stützen sich häufig auf primäre Mikroglia-Kulturen und kontinuierliche Zellpräparate. Die Verwendung einer Mikroglia-ähnlichen Zelllinie, wie BV2-Zellen, bietet eine vielversprechende Alternative, da sie eine kontinuierliche und reproduzierbare Quelle für Mikroglia darstellt. BV2-Zellen weisen aufgrund ihrer v-raf/v-myc-Expression einen verstärkten Stoffwechsel und ein verstärktes Wachstum auf, was ideal für die Erforschung von Mikroglia-Aktivierung und Entzündungen ist. Ihre Expression spezifischer Onkogene und Antigene spiegelt die von Makrophagen wider, was sie für die Untersuchung von Immunreaktionen und Krankheitsmechanismen wertvoll macht. In einer kürzlich durchgeführten Neubewertung von BV2-Mikrogliazellen aus der Maus wurde ihre Eignung als Ersatz für primäre Mikroglia (PM) untersucht. Die Reaktion von BV2-Zellen auf Lipopolysaccharid wurde sowohl in vitro als auch in vivo mit der von Mikroglia verglichen, wobei die Hochregulierung von Genen jedoch im Durchschnitt etwas weniger ausgeprägt war. BV2-Zellen zeigten eine normale Regulierung von Stickstoffmonoxid und eine funktionelle Reaktion auf IFN-gamma, entscheidende Parameter für ihre Interaktion mit T-Zellen, Neuronen und anderen Gliazellen wie Astrozyten. Es wurde auch festgestellt, dass BV2-Zellen andere Gliazellen wirksam stimulieren können, was zur Produktion von Interleukin-6 (IL-6) in Astrozyten führt. Diese Interaktion zwischen Astrozyten und Mikroglia ist entscheidend für das Verständnis der komplexen Zell-Zell-Interaktionen und der Entzündungsreaktion im Gehirn, insbesondere im Zusammenhang mit neurodegenerativen Erkrankungen wie Alzheimer, bei denen Proteine wie NAPoe31 und NAPoe41 sowie Signalwege wie die Schreckreaktion und Apoptose eine wichtige Rolle spielen. BV2-Zellen sind ein robustes und zuverlässiges Werkzeug für Forscher auf dem Gebiet der Mikroglia-Biologie. Durch die Expression von Produkten des Onkogens v-raf/v-myc behalten sie wichtige Eigenschaften von Mikroglia und Makrophagen bei. BV2-Zellen haben sich in verschiedenen Versuchsanordnungen als vollwertiger Ersatz für primäre Mikroglia erwiesen und erleichtern die Erforschung von Neurodegeneration, Toxikologie, Immunität und Zell-Zell-Interaktionen. |
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Organismus | Maus |
Gewebe | Gehirn |
Synonyme | BV-2 |
Spezifikationen
Alter | 1 Woche |
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Geschlecht | Weiblich |
Morphologie | Morphologie der Mikroglia |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Dokumentation
Zitat | BV2 (Cytion Katalognummer 305156) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Genetik der BV2-Mikroglia-Zelllinie
Handhabung
Nährboden | RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen. |
Splitverhältnis | 1 × 104 Zellen/cm2 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätssicherung für BV2-Zellen
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
M_18-3: 16,17
M_4-2: 20. Mrz
M_6-7: 15
M_3-2: 14
M_19-2: 13
M_7-1: 26. Februar
M_1-1: 16,17
M_Sex: x
M_8-1: 16
M_2-1: 16
M_15-3: 22.3,23.3,24.3
M_6-4: 18
M_11-2: 16
M_1-2: 19
M_17-2: 15
M_12-1: 17
M_5-5: 17
M_X-1: 27
M_13-1: 17
Mensch D4/D8: -
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