buňky 4T1 - zásadní poznatky o výzkumu a aplikacích buněk rakoviny prsu

4T1 je transplantovatelná buněčná linie myšího karcinomu prsu. Je široce používána jako geneticky identický model nádoru in vitro pro výzkum lidského karcinomu prsu. buňky 4T1 jsou vysoce invazivní a tumorigenní; mají tendenci metastazovat z místa primárního nádoru v mléčné žláze do dalších míst, včetně jater, lymfatických uzlin, plic, kostí a mozku, a jsou tak ideální pro studium metastáz karcinomu prsu [1].

Obecná charakteristika a původ buněk 4T1

Před prací s buněčnou linií je nezbytné znát její původ a obecné charakteristiky. V tomto oddíle jsme uvedli základní informace o buňkách 4T1 pro karcinom prsu. Například co jsou buňky 4T1? Jaké jsou vlastnosti buněčné linie 4t1? Jaký je původ buněčné linie 4T1? Jaká je morfologie buněčné linie 4T1?

4T1 je buněčná linie nádoru prsu pocházející z nádoru mléčné žlázy, který spontánně vznikl u myšího kmene BALB/c. Tyto vysoce invazivní a nádorové buňky věrně napodobují chování lidského karcinomu prsu, pokud jde o růst a metastatické šíření. Konkrétně model nádoru 4T1 zkoumá trojitě negativní karcinom prsu (TNBC).
buňky 4T1 jsou adherentní a mají morfologii podobnou epiteliálním buňkám.

buněčná linie 4T1 versus EMT-6

4T1 a EMT-6 jsou neimunogenní myší buněčné modely pro studium trojitě negativního karcinomu prsu. Zde jsou 4T1 agresivnější a invazivnější nádorové buňky než EMT-6 s méně invazivními vlastnostmi [2].

buňky 4T1 vs 4T07

4T07 je rovněž myší nádorová buněčná linie. Hlavní rozdíl mezi buňkami 4T1 a 4T07 spočívá v tom, že buňky 4T1 mohou opustit místo primárního nádoru a šířit se a vytvářet viditelné sekundární metastázy, zatímco buňky 4T07 nemohou vytvářet viditelné metastázy, přestože opustily primární místo [3].

Tomografický snímek SEM buňky 4T1.

Informace o kultivaci buněčné linie 4T1

buněčná linie 4T1 pro karcinom prsu nabízí rozsáhlé výzkumné využití v biomedicíně. Pro kultivaci těchto buněk byste si měli projít následující klíčové body, které popisují: Co je to zdvojovací čas 4T1? Jak se kultivují buňky 4T1? Jaká je hustota výsevu buněk pro 4T1?

Klíčové body pro kultivaci buněk 4T1

Doba zdvojení:	Průměrná doba zdvojení populace uváděná pro buňky rakoviny prsu 4T1 je 14 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:	4T1 je adherentní buněčná linie.
Poměr subkultivace:	Pro buněčnou linii 4T1 triple-negativního karcinomu prsu se doporučuje poměr dělení 1:6 a 1:8. Při dělení se buňky opláchnou PBS a inkubují s enzymem Accutase po dobu 8 až 10 minut. Disociované buňky se shromáždí centrifugací a resuspendují v čerstvém médiu. Resuspendované buňky se dávkují do nové baňky pro růst.
Růstové médium:	Pro kultivaci buněk 4T1 se používá médium RPMI 1640. pro ideální růst buněk se do kultivačního média přidává 10 % fetálního hovězího séra (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 a 2,1 mM stabilního glutaminu.
Růstové podmínky:	nádorové buňky 4T1 jsou uchovávány ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C s 5% přívodem_CO2.
Skladování:	4T1 buňky by měly být skladovány při teplotě nižší než -150 °C, tj. v elektrickém mrazáku nebo v plynné fázi tekutého dusíku, aby se zachovala životaschopnost buněk.
Postup zmrazování a médium:	Pro buněčnou linii 4T1 se doporučuje CM-1 nebo CM-ACF. Upřednostňuje se pomalá metoda zmrazování, která chrání životaschopnost buněk tím, že umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C.
Postup rozmrazování:	Lahvička se zmraženými buňkami se ponechá několik sekund ve vodní lázni o teplotě 37 °C, dokud buňky nerozmrznou a nezůstane z nich jen malý ledový chuchvalec. Tyto buňky se resuspendují v čerstvém médiu a přelijí se do kultivační baňky. Po 24 hodinách inkubace se médium vymění, aby se odstranily složky mrazicího média.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Pro kultivaci buněk karcinomu prsu 4T1 se doporučuje laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1.

Myší buňky karcinomu prsu 4T1, 20- a 10násobné zvětšení.

buněčná linie 4T1: Výhody a nevýhody

Tato část článku se bude zabývat výhodami a nevýhodami spojenými s metastatickým modelem 4T1.

Výhody

Hlavní výhody buněčné linie 4T1 jsou:

Nádorová aktivita:
4T1 je vysoce tumorigenní buněčná linie. Tyto buňky mají schopnost vytvořit syngenní myší model 4T1 pro studium rakoviny prsu, pokud jsou injikovány do myši. Model 4T1 se proto ideálně používá ke studiu vývoje, růstu a metastazování nádorů. Kromě toho je užitečný pro screening a hodnocení terapeutických léčiv.
Model metastázování in vitro:
model 4T1 má přirozenou tendenci k metastazování, což výzkumníkům umožňuje účinně zkoumat základní mechanismy a cesty zapojené do procesu metastazování. Buňky 4T1 jsou navíc rezistentní vůči 6-thioguaninu. To napomáhá účinné detekci mikrometastatických buněk s vyšší přesností ve srovnání s jinými modely, protože odpadá nutnost vážit cílové orgány a počítat uzliny.

Nevýhody

Nevýhodou spojenou s buněčnou linií 4T1 je:

Agresivita/rychlý růst:
4T1 je vysoce agresivní buněčná linie triple-negativního karcinomu prsu. Vzhledem k rychlému růstu je použití této buněčné linie v dlouhodobých experimentech a kontrola experimentálních proměnných obtížná.

Zakoupit buněčnou linii 4T1: vysoce kvalitní model rakoviny prsu

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300300

buněčná linie 4T1: Aplikace ve výzkumu rakoviny

Myší modelová buněčná linie 4T1 je cenným výzkumným nástrojem pro studium biologie rakoviny a hodnocení nových léčebných postupů. Zde jsou uvedeny hlavní aplikace buněk 4T1:

Biologie rakoviny

Buněčná linie 4T1 se široce používá ke studiu vývoje a růstu rakoviny. Je ideálním in vitro modelem pro zkoumání a výzkum různých buněčných a molekulárních mechanismů, které se podílejí na progresi nádorů a metastazování. Kromě toho může odhalit úlohu buněčných signálních drah, mikroprostředí a genové exprese v těchto procesech. Výzkum prováděný v roce 2019 využíval buňky 4T1 k odhalení hnacích mechanismů, které stojí za invazí a migrací nádorových buněk. Výsledky odhalily, že se na nich podílejí geny STAT3, MMP2 a MMP9 a že inhibice těchto genů může výrazně omezit migraci a invazi nádorových buněk [4]. Podobné studie poukázaly také na několik dalších signálních drah zapojených do vývoje nádorů a metastazování.

Model 4T1 je navíc užitečný pro pochopení mikroprostředí karcinomu prsu, včetně infiltrace imunitními buňkami a růstu primárního nádoru. Studie zaměřené na mikroprostředí nádoru 4T1 ukázaly významné poznatky o úloze imunitních buněk a cytokinů, jako je exprese CXCL13, v progresi nádoru. Tento model také pomáhá při zkoumání metastatických nik a metastazování nádoru, zejména u pozdních stadií karcinomu prsu, kde převládá kolonizace mamárním karcinomem.

Výzkum terapie rakoviny

Buněčná linie 4T1 se hojně využívá ve výzkumu terapie rakoviny pro screening a hodnocení nových léčebných postupů. Studie zkoumala cytotoxický potenciál zeleně syntetizovaných nanočástic železa z rozmarýnového extraktu (Rosemary-FeNPs) a čistého rozmarýnového extraktu na buněčné linii 4T1. Výsledky výzkumu navrhly, že rozmarýn-FeNPs jsou slibnější než čistý extrakt [5]. Podobně studie provedená v roce 2021 zkoumala protinádorový potenciál zázvorového extraktu u buněk rakoviny prsu 4T1 a myšího modelu 4T1 [6].

Kromě přírodních extraktů se buněčná linie 4T1 používá k hodnocení účinnosti tradičních chemoterapeutik. Například výzkum zahrnující kombinaci cisplatiny s dalšími léčebnými přípravky prokázal na modelu 4T1 zvýšenou smrt nádorových buněk a snížení progrese nádoru. Zavedení světluščí luciferázy do buněk 4T1 umožnilo zobrazování růstu nádoru a metastatického fenotypu v reálném čase, což usnadnilo hodnocení dopadu různých léčebných postupů.

Rezistence buněčné linie 4T1 vůči 6-thioguaninu navíc usnadnila studie mikrometastatických buněk, což zlepšilo detekci a analýzu metastáz. Tato buněčná linie hraje také klíčovou roli při studiu protinádorové imunity a účinků imunoterapie, zejména v kontextu ortotopických myších modelů, kde mohou výzkumníci věrně napodobit lidské nádory.

Celkově zůstává buněčná linie 4T1 nepostradatelným nástrojem v onkologickém výzkumu, od pochopení základních mechanismů biologie rakoviny až po vývoj a testování nových terapeutických strategií.

buňky 4T1: Výzkumné publikace

Tato část článku se bude zabývat několika zajímavými a nejcitovanějšími publikacemi o buňkách 4T1.

Potenciální antiproliferační aktivita AgNPs syntetizovaných pomocí M. longifolia v buněčné linii 4T1 prostřednictvím tvorby ROS a poškození buněčné membrány

Tento článek byl publikován v roce 2018 v časopise Journal of Photochemistry and Photobiology. Výzkum navrhl, že nanočástice stříbra syntetizované z Madhuca longifolia mají antiproliferační účinek u nádorových buněk 4T1 prostřednictvím degradace buněčné stěny a generace ROS.

Cytotoxicita a apoptotické účinky verbaskosidu na buněčnou linii karcinomu prsu 4T1

Tato studie v časopise BMC Pharmacology and Toxicology (2021) navrhla, že verbaskosid, přírodní sloučenina, vyvolává apoptotické účinky u buněk rakoviny prsu 4T1 prostřednictvím signalizace TLR4.

Eupatorin potlačil progresi nádoru a posílil imunitu na modelu myšího karcinomu prsu 4T1

Tento výzkum byl publikován v časopise Integrative Cancer Therapies v roce 2020. V této studii byly použity buňky 4T1 k vytvoření syngenního myšího modelu 4T1 a pomocí něj byl zkoumán protinádorový potenciál eupatorinu. Eupatorin zpomalil vývoj nádoru na myším modelu 4T1.

Inhibiční účinek extraktu z violky vonné (Viola odorata) na růst nádoru a metastazování u modelu rakoviny prsu 4T1

Tento výzkum publikovaný v časopise Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018) navrhl, že léčivá bylina Viola odorata má potenciální cytotoxické účinky na buňky 4T1.

Pevné lipidové nanočástice naložené docetaxelem zabraňují růstu nádoru a metastazování do plic buněk 4T1 myšího karcinomu prsu

Tato studie navrhla, že pevné lipidové nanočástice naložené docetaxelem (SLN naložené DTX) mohou být slibným prostředkem pro léčbu karcinomu prsu a prevenci metastáz, protože omezují růst nádoru a plicní metastázy buněk 4T1.

Zdroje pro buněčnou linii 4T1: Zdroje: protokoly, videa a další zdroje pro 4T4

Níže je uvedeno několik zdrojů o buňkách 4T1:

4T1 transfection tutorial: Toto video je průvodcem krok za krokem, jak provést transfekci buněčné linie 4T1.
Subkultivace buněčné linie: Toto video vysvětluje protokol subkultivace adherentních buněčných linií.

Následující odkaz obsahuje protokol kultivace buněk 4T1:

buněčné linie 4T1: Tento odkaz na webové stránky obsahuje všechny užitečné informace týkající se manipulace s kulturami 4T1. Obsahuje informace o kultivačních médiích, protokoly o manipulaci s kryokonzervovanými kulturami a proliferačními kulturami.

Často kladené otázky o buněčné linii 4T1

Odkazy

Pulaski, B.A. a S. Ostrand-Rosenberg, Mouse 4T1 breast tumor model. Curr Protoc Immunol, 2001. Kapitola 20: s. Jednotka 20.2.
Maxwell, K.G., Immunomodulation of Breast Cancer Cells for Whole Tumor Vaccination (Imunomodulace buněk rakoviny prsu pro vakcinaci celého nádoru ). 2016.
Walker, I., a další, Mamární nádory indukují centrální expresi prozánětlivých cytokinů, ale ne behaviorální deficity u myší Balb/C. (Mammary tumors induce central pro-inflammatory cytokine expression, but not behavioral deficits in Balb/C mice). Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
Li, Y., et al., Inhibice signální dráhy Stat3 přírodním produktem pectolinarigenin tlumí metastazování karcinomu prsu. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
Farshchi, H.K., et al., Green synthesis of iron nanoparticles by Rosemary extract and cytotoxicity effect evaluation on cancer cell lines [Zelená syntéza nanočástic železa rozmarýnovým extraktem a hodnocení cytotoxického účinku na nádorové buněčné linie ]. Biokatalýza a zemědělské biotechnologie, 2018. 16: p. 54-62.
Gholizadeh, A.P., et al., Effect of Ginger Extract on 4T1 Breast Cancer Cell Line in Balb/c Mouse [Účinek zázvorového extraktu na buněčnou linii rakoviny prsu 4T1 u myší Balb/c ]. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.